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tunel染色在线播放_tunel染色试剂盒(2024年12月免费观看)

内容来源:麦吉窗影视所属栏目:导读更新日期:2024-11-30

tunel染色

TUNEL染色常见问题及解决方法 TUNEL染色是一种常用的细胞凋亡检测方法,但在实际操作中可能会遇到一些常见问题。以下是一些常见的挑战及其解决方案: 荧光信号弱或缺失𐟔 样本处理不当 切片太厚:适当将切片切薄一点,便于染色。 脱蜡和水化不充分:脱蜡先用60℃ 20分钟,再用二甲苯两次5-10分钟。 Proteinase K孵育时间过短:优化孵育时间,4um左右的片子孵育10分钟,30um左右的片子孵育30分钟。 Proteinase K浓度过低:蛋白酶K一般工作液浓度为20 ug/mL。 切片不新鲜:使用新鲜切片。 染色操作不当 染色时间过短:一般37℃孵育60分钟,可以根据凋亡损伤程度延长至2小时。 TdT酶或荧光素/酶标记的dUTP浓度过低:适当提高浓度。 TdT酶失活:TUNEL反应液临用前配制,短时间在冰上保存。不宜长期保存,会导致TdT酶失活。 样本干燥:加上TUNEL反应液后,请盖上盖玻片/保鲜膜/湿盒中进行,保证样本均匀染色,又可防止反应液干燥。 非特异性染色(假阳性高)𐟌€ 样本处理不当 使用酸性或碱性固定液:使用pH中性的固定液固定组织或细胞。 固定液浓度过高:使用4%多聚甲醛溶液(溶于PBS)。 固定时间过长:控制固定时间在4℃放置25分钟。 蛋白酶K处理时间过长:适当缩短处理时间。 蛋白酶K浓度过大:适当调整蛋白酶K溶液浓度,一般工作液浓度为20ug/ml。 染色操作不当 TUNEL染色时间过长:一般是37℃孵育60分钟,可以根据凋亡损伤程度,可长至2小时。 未充分清洗样本:染色后PBS清洗次数可增加到5次,来避免切片的非特异性染色。 荧光背景强𐟌ˆ 样本操作不当 TUNEL染色时间过长:染色时间适当,一般是37℃孵育60分钟,避免串色。 TUNEL染色液浓度过大:增大稀释倍数,优化浓度。 PBS未充分清洗样本:TUNEL反应后增加PBS清洗次数,避免切片样本残留染料。 荧光检测操作不当 曝光时间过长:可以微调,但是不需要大调。 通过以上方法,可以有效解决TUNEL染色中常见的问题,获得更准确和可靠的结果。

阿尔茨海默病大鼠模型建立及行为学检测 𐟐�补ž‹建立: 采用SD大鼠,通过1%戊巴比妥钠40/g腹腔内注射麻醉,固定于脑立体定位仪上。根据大鼠脑立体定位图谱,以前囟为零起点,前囟后3.5 mm处为穿刺点,中线右侧旁开2mm,使用牙科钻钻开颅骨。采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm,即(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm),双侧海马CA1区缓慢匀速注射A-40各10  (1 ),留针5 min,退针后缝合伤口。 𐟒‰ 造模后3天,开始尾静脉注射生理盐水,大鼠每只给药100/次/d,连续给药21天。 𐟧頨ጤ𘺥�〦𕋯𜚊在给药后21天,进行Morris水迷宫试验,分为定位航行实验和空间探索实验。 定位航行实验:大鼠连续接受5天训练,每天4次,每次时间间隔30min,记录下大鼠从4个入水点和入水并找到平台所需要的时间,即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果。 空间探索实验:实验第6天,撤去平台,从距离平台的最远端入水后,将大鼠放入水中,记录下30s内大鼠的游泳轨迹,观察分析大鼠在目标象限的停留时间及穿越平台的次数。 𐟧젧𛄧𛇧—…理学: 尼氏染色:海马组织固定后石蜡切片,进行尼氏染色,观察海马区神经细胞形态和数量。光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的神经元数量。 免疫荧光染色:观察海马区A-40染色情况。荧光显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性斑块数量。 TUNEL染色:观察神经元凋亡情况。荧光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性染色数量。 𐟔젦 ‡志因子水平: RT-qPCR检测:收集海马组织,提取RNA,反转录cDNA,PCR检测caspase-3,Bcl-2和Bax的表达。 Western-blot检测:收集海马组织蛋白,检测active-caspase-3,Bcl-2和Bax的蛋白表达。

肿瘤微环境响应的纳米药物:精准治疗新策略 肿瘤微环境响应的纳米药物在精准医疗领域展现出了巨大的潜力。通过利用纳米药物的粒径可调特性,可以实现对肿瘤的精准图像引导治疗,同时减少副作用。然而,如何在肿瘤微环境中实现纳米粒径的可调性,仍然是纳米治疗领域的一个挑战。 最近,科学家们设计了一种肿瘤微环境ROS(活性氧物种)响应性聚集策略,旨在实现图像引导的精准肿瘤治疗。这种ROS响应的纳米治疗体系(Au-MB-PEG NPs)由修饰了次氯酸(HOCl)探针的金纳米粒子(AuNPs)组成。通过响应HOCl,改变其表面电荷并实现Au NPs的聚集,同时释放出光敏剂亚甲基蓝(MB),用于光动力治疗。 在肿瘤微环境中,AuNPs的聚集不仅提高了其在肿瘤中的聚集度,还能使其吸收峰红移,从而实现近红外光激发光声成像(PAI)和光热治疗(PTT)。这一设计在肿瘤的诊断和治疗中取得了优异的效果。 通过尾静脉注射Au-PEG NPs(A)和Au-MB-PEG NPs(B)后,HepG2荷瘤小鼠的光声成像显示,Au-MB-PEG NPs在肿瘤部位的聚集明显增加。不同处理组的荷瘤小鼠肿瘤生长曲线、体重变化图以及治疗前后的对照图片均表明,该体系能够有效抑制肿瘤的生长。 此外,通过HE染色和TUNEL染色,科学家们发现Au-MB-PEG NPs能够显著减少肿瘤细胞的存活率,并诱导细胞凋亡。这一结果表明,该体系在肿瘤治疗中具有显著的疗效。 总的来说,这项研究设计了一种刺激性应答纳米聚集体系,为肿瘤的诊断和治疗提供了一种新的思路。更重要的是,这种ROS响应聚合策略可以应用于其他纳米材料治疗体系,推动了肿瘤治疗纳米药物的进一步发展。

动物实验与病理染色服务全攻略 𐟔젥Š觉饮ž验服务 WB检测(全膜) 抗体费用 引物设计 RT-PCR实验 RNA提取及反转 RT-PCR检测 microRNA PCR RNA提取 PCR检测 基因组DNA提取 载体构建 基因型鉴定 双荧光素酶实验 𐟔젧—…理染色服务 包埋 切片 免疫组化操作 免疫组化 抗体费用 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描 免疫组化软件分析 免疫荧光(单标) 免疫荧光(双标) 免疫荧光(三标) 单标抗体费用 全景扫描(单标) 全景扫描(双标) 全景扫描(三标) 免疫荧光软件分析 透射电镜 透射电镜分析 电镜 扫描电镜 扫描电镜分析 OCT包埋 冰冻切片 ATP染色 ATP染色 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描 Tunel检测 荧光拍照 全景扫描 软件分析 FISH(探针自备) FISH(单标)检测 荧光拍照 全景扫描 HE染色 HE染色 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描 HE分析 masson染色 masson染色 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描 masson软件分析 Von kossa染色 Von kossa染色 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描 定量分析 PAS染色 PAS染色 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描 PAS软件分析 Ab-PAS染色 AB-PAS染色 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描 AB-PAS软件分析 阿利新蓝(AB)染色 阿利新蓝(AB)染色 拍照(2个倍数,3个视野) 全景扫描

阿尔茨海默病大鼠模型构建及药物研发全攻略 𐟐�ꌥŠ觉餸Ž分组 实验选用SPF级SD大鼠,健康雄性,体重在250g-300g之间。实验分为六组:正常对照组、模型组、阳性药组和三个不同剂量的受试药组。 𐟔젥ꌥ‘覜Ÿ 实验周期为4-6周。 𐟒‰ 建模方法 采用1%戊巴比妥钠40/g腹腔内注射麻醉SD大鼠,麻醉后固定于脑立体定位仪上。根据大鼠脑立体定位图谱,以前囟为零起点,前囟后3.5mm处为穿刺点,中线右侧旁开2mm,用牙科钻钻开颅骨。采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm,即(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm),双侧海马CA1区缓慢匀速注射A-40各10 (1),留针5分钟后退针并缝合伤口。造模后3天,开始尾静脉注射生理盐水,每只大鼠给药100/次/d,连续给药21天后进行水迷宫行为学检测。 𐟓Š 行为学检测 所有组别在给药后21天进行Morris水迷宫试验,分为定位航行实验和空间探索实验。 定位航行实验:大鼠连续接受5天训练,每天4次,每次间隔30分钟,记录大鼠从4个入水点和入水并找到平台所需的时间,即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果。 空间探索实验:实验第6天,撤去平台,从距离平台最远端入水后将大鼠放入水中,记录30秒内大鼠的游泳轨迹,观察分析大鼠在目标象限的停留时间及穿越平台的次数。 𐟧젧𛄧𛇧—…理学 行为学结束后,将各组大鼠摘取全脑,冰上剥去小脑,将剩余部分左右对切,一半放入4%多聚甲醛中固定,用于病理学检测。另一半取海马用于PCR和蛋白检测。 尼氏染色:海马组织固定后石蜡切片,进行尼氏染色,观察海马区神经细胞形态和数量。光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的神经元数量,作统计分析。 免疫荧光染色:观察海马区A-40染色情况。荧光显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性斑块数量,作统计分析。 TUNEL染色:观察神经元凋亡情况。荧学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性染色数量,作统计分析。 Western-blot检测:收集海马组织蛋白,检测active-caspase-3,Bcl-2和Bax的蛋白表达。 通过以上方法,可以评估阿尔茨海默病大鼠模型的行为学表现和病理学变化,为药物研发提供有力支持。

整体课题实验包括动物实验、CCK8检测、划痕测试、流式细胞分选、耐药株构建、线粒体膜电位测定、Transwell实验和平板计数等。通过动物饮食建模,诱导模型生成,并进行转录组分析、细胞测序、小管形成及克隆形成实验。采用WB、ELISA、蛋白质双向电泳、荧光定量PCR、质粒构建、免疫荧光共定位和免疫共沉淀技术。此外,还运用HE染色、Masson染色、PAS染色、共聚焦显微镜、透射电镜、Tunel荧光和ros荧光等多种方法。实验室日常、科研之路、读博的日子、研究生生活、医学生日常、生物实验室探索、医学之路、科研日常、医学研究生实验。「双胞胎生一个代一个」「张three」探索科学的奥秘的微博视频

上海松江动物实验外包服务,真实数据可见 𐟏⠤𝍤𚎤𘊦𕷦𞦱Ÿ的动物实验服务平台,欢迎实地考察!我们发表的众多文章足以证明我们的专业与值得信赖。 𐟔젦Š€术服务包括: 动物实验:心血管系统、呼吸系统、消化系统、内分泌系统、泌尿系统、神经系统、肿瘤实验、骨科实验、定制化动物模型等。 病理实验:石蜡包埋、切片、HE染色、Masson染色、天狼染色、免疫组化、免疫荧光、组化分析、组织芯片、TUNEL、多标、切片进口数字扫描、电镜等。 检测:水迷宫、矿场等12种行为学、活体成像、X光、Micro-CT、超声、骨密度检测、生化、血常规、血凝等。 𐟐�Š觉驇‡购:SPF级大小鼠、兔子等。 𐟕’ 我们提供24小时全年无休服务,确保每一个实验数据真实可靠,支持拍照、视频甚至直播,让您随时了解实验进展。

百奥思科实验外包,高效透明 北京百奥思科欢迎全国各地的合作伙伴加入,共同开拓业务。我们提供多种实验服务,包括动物实验、细胞实验、课题设计、石蜡包埋切片、HE染色、番红固绿染色、Masson染色、PAS染色等特殊染色服务,以及免疫组化、荧光、透射/扫描电镜、共聚焦、TUNEL检测、扫描、病理分析等病理实验。我们还提供PCR、Western Blot、ELISA检测,流式凋亡、流式周期检测,以及血管支架硬切等服务。 我们的优势在于: 周期短:快速响应,高效完成实验。 价格优惠:提供有竞争力的价格。 质量保证:确保实验结果的准确性。 售后无忧:提供全面的售后服务。 公司总部位于北京,实验室占地超过6000平方米,拥有SPF级实验室和先进的仪器设备。我们的技术团队和销售团队都具备丰富的经验和专业知识,欢迎随时参观,客户可以亲自参与实验。

𐟔젥…視𙤽实验外包服务 𐟔슦ˆ‘们提供全方位的实验外包服务,涵盖多种实验类型,包括细胞实验、动物实验、分子实验以及整体课题实验等。𐟔찟�笊 我们的服务内容还包括药代动力学实验、包埋切片及各种特殊染色、IHC、IF、多重免疫荧光、Tunel、Fish等。𐟌ˆ𐟔 此外,我们还提供切片全景扫描、激光共聚焦、透射/扫描电镜、病理分析、电镜分析以及WB、PCR、ELISA、生化检测等多种实验技术。𐟔�’ኊ我们可以通过线上与科研团队进行答疑,并且欢迎实地考察参与其中,有专人指导。𐟑袀𐟏밟‘颀𐟏뀀

细胞凋亡检测的五大方法及其原理 细胞凋亡是生物学中的重要过程,了解其检测方法对于研究细胞命运至关重要。以下是五种常用的细胞凋亡检测方法及其作用原理: 1️⃣ Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双标记法 作用原理:当细胞坏死时,质膜不完整,PI进入细胞内部,嵌入DNA或RNA中,使坏死细胞着色(红色)。Hoechst33342是一种亲脂性荧光染料,可跨膜进入活细胞并与DNA特异结合,显示活细胞(蓝色)。凋亡细胞和活细胞不着色。 2️⃣ Annexin V/PI双染色法 作用原理:磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡早期,PS翻转到细胞膜表面。Annexin-V是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。标记后的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜检测细胞凋亡。 3️⃣ TUNEL法 作用原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,掺入凋亡细胞DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶的抗地高辛抗体结合。过氧化物酶在适合底物存在下产生颜色反应,特异定位正在凋亡的细胞。 4️⃣ Caspase-3活性检测法 作用原理:Caspase家族在介导细胞凋亡中起重要作用,其中caspase-3为关键执行分子。正常状态下,caspase-3以酶原形式存在于胞浆中。在凋亡早期,它被激活,活化的caspase-3裂解相应底物,最终导致细胞凋亡。在细胞凋亡晚期和死亡细胞中,caspase-3活性下降。通过Western blot分析Procaspase-3的活化及对底物的裂解来检测细胞凋亡。 5️⃣ 形态学检测法 作用原理:根据凋亡细胞的形态特征,使用透射电镜检测凋亡细胞的形态变化。凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期细胞核内染色质高度盘绕,出现空泡结构;Ⅱa期细胞核染色质高度凝聚、边缘化;晚期细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。 这些方法提供了检测细胞凋亡的不同角度,帮助研究者更好地理解细胞的命运和调控机制。

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