序列比对最新视觉报道_序列比对网站(2024年12月全程跟踪)
基因扩增不出条带?试试这些实用技巧! 基因扩增真的是一门玄学,大家都懂的…有时候快得一周,有时候慢得几个月甚至半年。一直在扩增、连接T载体、测序、比对序列、再扩增再连接再测序再比对的路上徘徊,尤其是卡在第一步,不出条带时,急得一身汗…这里我分享一些实战经验,希望能帮大家早日见到条带。 降低退火温度并增加循环数 首先,为了确保能出条带,首次扩增时降低退火温度,同时增加循环数,比如到35个。如果有条带出现,别急着回收。用高保真酶,再将同样的体系缩小循环数至25-30个进行重新扩增,这样可以降低扩增突变。如果有条带,进行切胶回收,正常进行后续步骤。 更换cDNA 悦循环数改变后仍无条带,考虑更换cDNA。有些基因在本体表达量少,需要逆境诱导表达。这时可以尝试用逆境处理后反转的cDNA做模板,扩增出条带的希望很大。 稀释模板浓度 ꊥ﹤些扩增体系而言,模板浓度不是越高越好。如果前两个方法都不通,尝试稀释模板浓度。 设计多对引物 引物方面也要下功夫,一般设计两对,UTR区设计一对,ATG和TAA处设计一对。 选择高保真酶 为了减少扩增中的碱基突变,选好高保真酶,我常用ExTaq酶和诺维赞的高保真酶。 切胶回收 悦扩增的条带浅浅的也不要放弃,一定切胶回收。回收浓度即使是5以下也可连接T载后测序。 比对序列 序列比对时用碱基序列和氨基酸序列同时比对,确保氨基酸序列无误基本没问题。 相信自己的结果 对于复杂的多倍体植物,一些基因可能含有多个转录本。如果你更换酶、改变体系反复扩增后仍是相同的重复序列,即使与模板序列有些碱基或氨基酸不同,这时你要相信自己,这就是扩增出的这个基因的序列。 多做好事,积攒好运 每天多做好事,积攒好运,打破扩增玄学。 换个人扩增试一下 劦后,换个人扩增试一下,有时候不同的实验员会有不同的结果。 你们还有什么好办法吗?欢迎留言讨论!
转录组数据分析:从遗传变异到SNP解析 转录组数据分析是现代生物学研究的重要手段,尤其在探索遗传变异和单核苷酸多态性(SNP)方面。通过深入分析转录组数据,我们可以更好地理解基因组的复杂性和多样性。 砥訿行转录组数据分析之前,首先需要建立参考基因组。这一步非常关键,因为它是后续所有分析的基础。使用STAR工具进行基因组比对,可以生成基因组的索引文件,为后续的比对和注释提供支持。 第一次序列比对时,需要使用STAR工具并指定相关参数,如线程数、基因组目录、参考基因组文件和注释文件的位置。此外,还需要指定剪切位点的相关信息,以便在后续步骤中正确处理。 第二次序列比对时,STAR工具将使用第一次比对得到的剪切位点信息来生成新的参考索引。这一步的目的是为了更精确地定位和注释变异位点。 寸 比对完成后,需要对得到的SAM文件进行预处理,包括添加RG标签和标记重复序列。这些步骤可以确保数据的准确性和可靠性。 最后,通过MarkDuplicates工具来标记重复序列并排序,以减少后续分析中的误差。这一步非常重要,因为它可以帮助我们更准确地识别和分析遗传变异。 通过以上步骤,我们可以从转录组数据中提取出丰富的遗传变异信息,包括SNP等重要数据。这些信息对于理解生物体的复杂性和进化机制具有重要意义。
医健优重组人源化III型胶原蛋白详解 广泛适用范围:重组人源化III型胶原蛋白适用于多种场景,创新点在于其100%人源化特性。 100%人源化:该产品无过敏反应,无排异现象。通过原子结构确认和人类基因库序列比对,发现其与人源化III型胶原蛋白中央功能区域100%相同,氨基酸序列也完全一致。 砩똧性:其特有的164.88Ⱖ性弯折结构使得细胞黏附性极高。首次在原子水平上解析了人源化III型胶原蛋白核心功能区的原子结构,并被国际蛋白数据库(PDB)收录。 大量结合水:该产品含有大量带电基团,能够结合众多水分子,亲水性强,水溶性高。其稳固的三螺旋结构使其具有高稳定性。 젤𑻥器械:该产品为无菌产品,符合二类医疗器械的标准。 通过这些特点,医健优重组人源化III型胶原蛋白为用户提供了安全、高效的选择。
NCBI数据库全解析 젎CBI,即美国国立生物技术信息中心,是一个不可或缺的科学数据库。它涵盖了各种序列信息,包括基因序列、基因组序列和蛋白质序列等。 通过NCBI的accession number,你可以轻松下载所需的序列数据,为科研工作提供极大的便利。 ᠩ䦭䤹外,NCBI还提供了BLAST工具,它可以帮助你检索DNA、RNA序列和蛋白质序列,并进行多序列比对,为生物信息学研究提供强大支持。 另外,IGBLAST是NCBI旗下的人抗体数据库,你可以使用抗体序列来检索数据库中的近似抗体序列,并查看其所属的人基因座。 无论你是科研工作者还是学生,NCBI数据库都是你不可或缺的科研助手。快来探索这个强大的科学数据库吧!
系统发育树:你真的懂吗? 系统发育树(Phylogenetic tree)这个东西,听起来有点高大上,但其实它就是用来展示生物物种之间进化关系的图形工具。简单来说,它就像是一棵家族树,只不过这里面的“家族成员”是各种生物。 系统发育树的基本构造 𓊨点(Node):每个节点都代表一个共同的祖先,分叉点则表示物种的分化。 分支(Branch):这些分支连接节点,展示了物种之间的演化路径和时间。 叶子(Leaf):叶子代表现代物种或基因序列,是树的末端。 系统发育树的主要用途 进化关系:帮助研究者理解物种是如何随着时间演变的,以及它们之间的亲缘关系。 分类学:用于生物分类,帮助识别和归类新发现的物种。 遗传研究:在遗传学中,系统发育树用于分析基因的进化历史。 如何构建系统发育树 ️ 序列比对:通过比对DNA、RNA或蛋白质序列,寻找相似性和差异性。 计算方法:使用统计和计算模型(如最大似然法、贝叶斯推断等)来构建树。 软件工具:有很多软件可以帮助构建和分析系统发育树,比如MEGA和RAxML。 系统发育树的重要性 系统发育树不仅在生物学领域有广泛应用,还对生态学、保护生物学、疾病传播等领域具有重要意义。它为我们提供了一个可视化的方式来理解生物的多样性和演化历史。 总之,系统发育树是一个非常有用的工具,帮助我们更好地理解生物世界的复杂关系。下次看到这样的树图时,不妨多花点时间仔细看看,说不定你会发现更多有趣的东西呢!
哈佛生物信息学课:跨学科融合 𑠧物信息学是一个迅速发展的领域,吸引了科学家和公众的广泛关注。它结合了生物学、计算机科学、信息技术、数学和统计学等多个学科的理论,用于分析和解读生物数据。 哈佛大学的《计算机生物与生物信息学》课程由经验丰富的资深教授David K. Gifford和Pardis Sabeti共同教授。这门课程将帮助你全面掌握计算生物学的基础知识,包括关键的序列比对、蛋白质结构预测以及基因表达数据分析等技术。这些技术和方法对于深入理解和有效应用生物信息学至关重要。 《Advances in Bioinformatics》这本书涵盖了从基础到高级的多个生物信息学主题,包括数据挖掘和分析、计算进化生物学、蛋白质分析、计算疫苗和药物设计等。此外,还涉及计算基因组学、代谢组学、DNA测序和NGS、microRNA、基因到基因组分析、生物计算、神经网络分析、人工智能、大数据分析和软计算等许多相关主题。
alphafold3使用教程 在2020年,AlphaFold 2的发布引起了科研界的轰动。如今,经过两年的精心研发,DeepMind和Isomorphic Labs的合作团队在2024年5月8日共同发表了Nature文章《Accurate structure prediction of biomolecular interactions with AlphaFold 3》,正式宣布了AlphaFold 3的诞生。 AlphaFold 3依然依赖于深度学习和神经网络技术,通过多序列比对和已知蛋白质结构的输入,精确模拟蛋白质在自然条件下的构型。与AlphaFold 2相比,AlphaFold 3不仅提高了蛋白结构预测的稳定性,还加入了蛋白翻译后修饰(PTM)、核酸以及离子与蛋白之间形成复合体的分析。 在实际应用中,我发现AlphaFold 3的用户界面非常友好,只需输入FASTA格式的蛋白或核酸序列即可进行蛋白结构预测。每天有10个token,可以预测10次(每日更新),响应速度大约在3-5分钟。 尽管AlphaFold 3在蛋白结构预测上有了显著提升,但它在处理蛋白翻译后修饰(PTM)和离子种类方面仍有局限性。例如,泛素化修饰并未包含在内,离子种类也相对较少,其他一些分子如氨基酸也不在考虑之列。 总的来说,AlphaFold 3作为一个科研工具,虽然有其局限性,但它的免费使用对于基础研究人员来说无疑是一个巨大的帮助。对于那些需要进行蛋白质结构预测的科研人员来说,它可能是一个非常有用的工具。
转录组测序分析必备软件推荐 大家好!今天我们来聊聊转录组测序分析的上游处理,从原始数据到生成count文件的整个流程。 质量控制:首先,我们使用FastQC来评估高通量测序数据的质量。这个工具可以帮助我们了解质量评分分布、GC含量以及序列长度分布等关键信息。 序列比对:接下来,我们使用HISAT2来进行基因序列的比对。HISAT2是一个高效且准确的比对软件,特别适合处理RNA-Seq数据,支持基因组和转录组索引。 定量分析:最后一步是使用featureCounts来生成表达矩阵。这个工具能够定量分析基因、外显子、基因体等的表达水平,需要BAM/SAM格式的比对信息和GTF/GFF格式的注释文件。 关键要点: FastQC:评估原始测序数据质量。 HISAT2:高效基因序列比对软件。 featureCounts:定量分析,生成表达矩阵。 下期预告:在接下来的学习中,我们将深入探讨转录组的差异分析,敬请期待!
你掌握制作进化树的技巧了吗?𓊱️⃣ 首先,打开NCBI网站,进入核酸blast页面。将菌种测序的结果序列复制到搜索框中,并勾选典型序列选项,然后点击blast。等待结果页面出现后,选择序列时要注意以下几点:避免选择同菌属的序列,否则进化树会显得不太美观;选择partial sequence而不是complete sequence;选择10-20个序列就足够了,不需要太多;将保存的文件扩展名改为fas,并确保菌种测序的seq文件也改为fas格式。 2️⃣ 接下来,打开fas文件,进入mega界面。我习惯使用ctrl+I快捷键插入NCBI下载的同源序列和一个外源序列,然后点击w进行序列比对。将比对结果保存后,返回mega主页面,点击neighbor按钮,系统会自动生成进化树。 3️⃣ 最后,检查生成的进化树是否符合预期,并进行必要的调整和优化。确保选择的序列和比对参数都是正确的,以获得最准确的进化树结果。
MEGA软件序列比对与系统发育树构建指南 嘿,大家好!今天我们来聊聊如何用MEGA软件进行序列比对,这可是构建系统发育树之前的重要步骤哦!𓊧쬤𘀦建新文件 首先,打开MEGA软件,创建一个新文件。这个文件将是你的工作区,所有后续的操作都将在这里进行。 第二步:整理序列文件 夸来,把你需要比对的所有序列整理到一个文本文件中。每个序列的第一行应该是“>序列名称”,这样MEGA才能正确识别它们。 第三步:复制粘贴序列 把你整理好的序列复制粘贴到MEGA的新文件中。这一步很重要,因为MEGA需要这些序列来进行比对。 第四步:进行比对 在MEGA中,选择Alignment选项进行序列比对。这个过程可能会花费一些时间,具体取决于你的序列数量和长度。 第五步:删除不匹配的序列 ️ 由于测序过程中可能会产生一些不准确的序列,所以你需要删除那些首尾比对不上的部分。这样可以提高后续分析的准确性。 第六步:保存比对结果 𞊦后,把比对好的序列文件以MEGA格式保存。这个文件将是构建系统发育树的基础数据。 小贴士 ከ本:MEGA7 注意:确保你的序列文件格式正确,否则MEGA可能无法正确读取。 希望这篇指南能帮到你!如果你有任何问题,欢迎在评论区留言哦!
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