细胞凋亡最新视觉报道_细胞凋亡的概念(2024年12月全程跟踪)
所以我说:诱导T淋巴细胞集体凋亡,进行免疫重置,是治愈艾滋病的关键方法(清除病毒库)。配合其他抗感染方法,维持一段时间的T细胞凋亡期。
annexin v-apc 细胞凋亡,这个生物学领域的热门话题,一直是科研人员关注的焦点。而Annexin-V/PI双染法,则是一种非常有效的检测细胞早期和晚期凋亡的方法。 首先,让我们来了解一下这两种染料的神奇之处。Annexin-V是一种对磷脂酰丝氨酸(PS)有高度亲和力的蛋白,而PS在正常细胞中位于细胞膜内侧。当细胞开始凋亡时,PS会翻转到细胞膜外侧,这时Annexin-V就能特异性地结合它,从而检测到早期凋亡的发生。另一方面,PI(丙啶碘)是一种能够结合DNA的荧光染料。但它有个特点,只有在细胞膜完整性受损时才能进入细胞。因此,通过PI的染色,我们可以检测到晚期凋亡或坏死的细胞。 通过同时使用Annexin-V和PI染色,我们可以将细胞分为四种类型:健康细胞(Annexin-V和PI都阴性);早期凋亡细胞(Annexin-V阳性,PI阴性);晚期凋亡或坏死细胞(Annexin-V和PI都阳性);以及一些特殊类型的凋亡细胞(Annexin-V阴性,PI阳性)。 接下来是实验步骤的部分: 细胞收集:首先,我们需要将培养皿中的细胞收集起来。如果是非贴壁细胞,可以直接通过离心来收集;如果是贴壁细胞,需要用胰酶-EDTA溶液处理后才能收集。 细胞洗涤:用无血清的PBS或其他适当的缓冲液洗涤细胞,去除可能影响实验结果的因素,如培养基中的血清、细胞因子等。 细胞悬浮:用Annexin-V结合缓冲液将细胞悬浮,细胞浓度通常调整为1x10^6细胞/ml。 加入Annexin-V:向每个样品中加入5 Annexin-V,轻轻混匀后在室温下避光孵育15分钟。注意不要将样品孵育过长时间,以免影响结果。 加入PI:孵育结束后,向每个样品中加入10 PI,轻轻混匀后在室温下避光孵育5分钟。 流式细胞分析:立即在流式细胞仪中分析样品,不要将样品存放过长时间以免影响结果。 在实验过程中,可能会遇到一些常见问题,如细胞凋亡率偏低或偏高,荧光信号弱等。针对这些问题,我们可以尝试调整实验条件,如增加诱导凋亡的药物浓度或处理时间,或者改善实验操作,如减少细胞离心的力度和时间,使用更温和的细胞收集方法等。犊通过这些步骤和注意事项,我们可以更准确地检测细胞的凋亡情况,从而更好地理解细胞生命的奥秘。
TUNEL染色常见问题及解决方法 TUNEL染色是一种常用的细胞凋亡检测方法,但在实际操作中可能会遇到一些常见问题。以下是一些常见的挑战及其解决方案: 荧光信号弱或缺失 样本处理不当 切片太厚:适当将切片切薄一点,便于染色。 脱蜡和水化不充分:脱蜡先用60℃ 20分钟,再用二甲苯两次5-10分钟。 Proteinase K孵育时间过短:优化孵育时间,4um左右的片子孵育10分钟,30um左右的片子孵育30分钟。 Proteinase K浓度过低:蛋白酶K一般工作液浓度为20 ug/mL。 切片不新鲜:使用新鲜切片。 染色操作不当 染色时间过短:一般37℃孵育60分钟,可以根据凋亡损伤程度延长至2小时。 TdT酶或荧光素/酶标记的dUTP浓度过低:适当提高浓度。 TdT酶失活:TUNEL反应液临用前配制,短时间在冰上保存。不宜长期保存,会导致TdT酶失活。 样本干燥:加上TUNEL反应液后,请盖上盖玻片/保鲜膜/湿盒中进行,保证样本均匀染色,又可防止反应液干燥。 非特异性染色(假阳性高) 样本处理不当 使用酸性或碱性固定液:使用pH中性的固定液固定组织或细胞。 固定液浓度过高:使用4%多聚甲醛溶液(溶于PBS)。 固定时间过长:控制固定时间在4℃放置25分钟。 蛋白酶K处理时间过长:适当缩短处理时间。 蛋白酶K浓度过大:适当调整蛋白酶K溶液浓度,一般工作液浓度为20ug/ml。 染色操作不当 TUNEL染色时间过长:一般是37℃孵育60分钟,可以根据凋亡损伤程度,可长至2小时。 未充分清洗样本:染色后PBS清洗次数可增加到5次,来避免切片的非特异性染色。 荧光背景强 样本操作不当 TUNEL染色时间过长:染色时间适当,一般是37℃孵育60分钟,避免串色。 TUNEL染色液浓度过大:增大稀释倍数,优化浓度。 PBS未充分清洗样本:TUNEL反应后增加PBS清洗次数,避免切片样本残留染料。 荧光检测操作不当 曝光时间过长:可以微调,但是不需要大调。 通过以上方法,可以有效解决TUNEL染色中常见的问题,获得更准确和可靠的结果。
铁死亡指标揭秘,助力SCI发表! 铁死亡是一种铁依赖性的细胞程序性死亡方式,与细胞凋亡和细胞自噬不同。它依赖于铁介导的氧化损伤,铁积累的增加,自由基的产生,以及脂肪酸供应与脂质过氧化物的增加。这些因素是诱导铁死亡的关键。铁死亡的研究热度一直居高不下,深入了解其机制和影响因素对于疾病的发生和发展具有重要意义。 以下是一些铁死亡检测的关键指标: 亚铁离子检测 ️ 活性氧ROS检测 脂质过氧化物检测 𑧔肽代谢检测 𞊥灧细胞表型检测 铁死亡相关蛋白表达检测 슊这些指标可以帮助我们更好地理解铁死亡的机制和影响因素,从而在SCI文章发表中提供有力支持。
细胞凋亡与硫化氢:H2S的双重角色揭秘 凋亡缺陷小鼠的 H2S 水平变化 通过醋酸铅形成试验,我们发现雌性 MRL/lpr 和 Bim−/− 小鼠的血液中 H2S 浓度显著降低。这一现象在肝脏中同样存在,而肺、脾、肾等器官则未显示明显变化。进一步分析表明,这些小鼠的 PBMC(外周血单核细胞)中凋亡细胞和 H2S 水平均有所下降。 STS 与 Z-VAD 对 H2S 浓度的影响 STS(磺基丙酸)处理显著提高了 MRL/lpr 小鼠的血液和肝脏中的 H2S 浓度,而 Z-VAD(一种凋亡抑制剂)则抑制了这一过程。在 PBMC 中,STS 促进细胞凋亡和 H2S 的生成,而 Z-VAD 则减轻了这种效果。 젥亡细胞体外释放 H2S 通过体外实验,我们发现凋亡诱导(如 STS 和 UV 处理)后,不同细胞上清液中的 H2S 浓度显著增加。而添加 Z-VAD 则降低了 H2S 的浓度。这一结果表明,凋亡过程中会释放 H2S,且其浓度受到凋亡抑制剂的影响。 H2S 通过 Sep15/STAT1/STAT3 信号轴抑制 Th17 细胞分化 当 STAT1 被 siRNA 敲低时,H2S 未能抑制 Th17 细胞中的 p-STAT3 表达。这一发现表明,H2S 通过 Sep15/STAT1/STAT3 信号轴抑制 Th17 细胞的分化作用。 H2S 在 apoV 介导的 SLE 治疗中的重要性 通过蛋白质印迹和免疫荧光法评估,我们发现 apoV 中 CBS、CSE 和 3-MST 的表达。H2S 微电极显示 apoV 产生 H2S,而 HA 和 PAG 处理则抑制了 H2S 的生成。此外,apoV 抑制 IgG 在脾脏和皮肤中的沉积,而 CBS−/− 和 CSE−/− 的功能受损。 这些研究结果揭示了凋亡与 H2S 的复杂关系,以及 H2S 在细胞凋亡和免疫调节中的重要作用。
基础细胞实验全攻略,科研新手必看! 基础细胞实验是科研工作中常用的一种方法,主要用于研究细胞的结构、功能和相互作用。以下是几种常见的细胞实验: 细胞培养 𑊧𛆨培养是将细胞从体内环境中分离出来,在体外条件下进行培养。这个过程包括细胞的收集、培养基的准备和培养器具的消毒等步骤。通过细胞培养,可以研究细胞的生长、增殖和分化等特性。 免疫染色 芥 疫染色是使用抗体对细胞进行特异性标记的方法。染色剂与抗体结合后,可以在显微镜下观察到特定蛋白质或细胞组分的位置和表达水平。常见的免疫染色方法有免疫荧光染色和免疫组织化学染色。 显微镜观察 显微镜是观察细胞形态和结构的重要工具。通过放大细胞样品,可以观察到细胞器、细胞结构和细胞内的生物分子等。传统的光学显微镜和电子显微镜是常用的显微镜类型。 细胞凋亡检测 细胞凋亡是一种程序性的细胞死亡形式。通过染色剂或特定抗体标记细胞中发生凋亡的特征,如核染色质凝聚、膜破裂等,可以检测细胞凋亡的发生。 细胞增殖和迁移实验 这些实验主要用于研究细胞的增殖和迁移能力。通过使用增殖指示剂(如MTT、CCK-8)或迁移指示剂(如Transwell等),可以评估细胞的增殖速率和迁移能力。 RNA和蛋白质分析 슩过提取细胞中的RNA和蛋白质,可以进行进一步的分析,如逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blotting等。这些方法可以研究细胞中基因的表达水平以及蛋白质的功能和相互作用。 以上仅是基础细胞实验中的一些常见方法和技术。具体选择哪种实验方法取决于研究问题和目标。科学家们通过这些实验方法,可以深入了解细胞的生理、病理和分子机制,为疾病治疗和药物研发提供重要的基础。
细胞凋亡、自噬、坏死和焦亡的区别详解 细胞的命运并非黑白分明,而是有多种选择。让我们从细胞死亡的角度,深入了解凋亡、自噬、坏死和焦亡这四种不同的细胞命运。掌握这些知识,揭开细胞生存的奥秘! 凋亡(Apoptosis) 凋亡是一种受控的细胞死亡方式,通过激活一系列酶类,导致细胞内部发生变化。最终,细胞体积缩小,DNA裂解,形成类似“食面包”的凝固结构。 自噬(Autophagy)️ 自噬是细胞自身将受损或不需要的细胞器、蛋白质包裹在自噬体内,然后运送至溶酶体进行降解的过程。这是一种细胞自我保护和更新的机制。 坏死(Necrosis) 坏死是一种非受控的细胞死亡方式,通常由外部因素引起,如缺氧、毒物作用等。坏死细胞的形态和功能会发生显著变化,可能导致炎症反应。 焦亡(Pyroptosis)劧椺ᦘ露种程序性细胞死亡方式,通常由细胞内炎症小体激活引发。细胞最终破裂,释放细胞内容物,导致周围组织的炎症反应。 通过了解这些不同的细胞死亡方式,我们可以更深入地理解细胞的生与死,以及它们在生物体内的复杂作用。
「今天要来点生物学吗?」 通过显微镜拍摄的濒死细胞。这是细胞凋亡(细胞自毁程序)过程中细胞核(蓝色)和高尔基体(黄色)中的 DNA 发生的变化。物理芝士数学酱的微博视频
酷塑治疗躺着都能瘦? 答案是:是的! 只需要大概一小时就能让脂肪细胞凋亡的神奇项目。「酷塑冷冻减脂」「酷塑减脂」
HPV 持续感染和整合类似于打开表观遗传调控的大门,影响细胞增殖、宿主免疫反应和细胞凋亡,在各种类型的HPV相关癌症中观察到细胞基因组异常甲基化,尤其是宫颈癌鳞癌中,大多数都是HPV依赖性的「小桔灯网」小桔灯网的微博视频
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