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1640培养基在线播放(2024年12月免费观看)

内容来源:麦吉窗影视所属栏目:导读更新日期:2024-11-30

1640培养基

RPMI-1640:细胞优选培养基 RPMI-1640培养基是一种广泛使用的细胞培养基,最初设计用于淋巴细胞的培养,但现在已经应用于多种正常细胞和癌细胞的培养,尤其适合悬浮细胞的培养。它是一种最常用的培养基之一,含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和无机盐,但不含有蛋白质或生长因子。根据细胞类型,用户需要添加5-10%的血清或无血清添加物以确保最佳的培养效果。 产品特点 𐟌Ÿ 过滤除菌:通过0.1 滤膜过滤除菌,确保无菌状态,pH值在7.0-7.4之间。 营养丰富:含有11.1 mM D-葡萄糖和2.05 mM L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,提供细胞所需的稳定营养。 酚红指示剂:内含酚红指示剂,便于监测培养基的pH变化。 稳定的添加剂:L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是一种稳定的细胞培养添加剂,在水溶液中不自发降解,通过细胞分泌的肽酶缓慢降解释放谷氨酰胺。 储存与注意事项 𐟓 储存条件:常温运输,2~8℃避光保存,有效期12个月。 注意事项:避免冷冻:冷冻结冰可能导致营养物质沉淀,影响培养效果。 无菌操作:使用时需注意无菌操作,避免污染。 冷藏存放:不要将培养基贴紧冰箱内壁,以防局部温度过低导致培养基结冰。 RPMI-1640培养基以其稳定的营养成分和无菌状态,成为细胞培养领域的优选选择。正确的储存和使用方法能够确保最佳的培养效果,为科研和实验提供可靠的保障。

巨噬细胞趋化实验,一文搞定! 最近刚刚完成了一次Transwell实验,验证了巨噬细胞的趋化功能,感觉收获颇丰,决定分享一下我的经验,希望能帮到大家。 PMA诱导THP1极化 𐟧ꊩ斥…ˆ,用DMSO溶解PMA,稀释到100ug/ml,然后直接加到培养基里,使PMA的终浓度为100ng/ml。接着,将THP1细胞离心后用含有PMA的培养基重悬并计数。在24孔板的上室加入含有20w THP1的细胞悬液300ul,下室加入含有PMA的培养基600ul,诱导24小时直到细胞贴壁。 肿瘤细胞点板 𐟏  将肿瘤细胞消化重悬后进行计数,24孔板每孔加入含有2w细胞的细胞悬液,摇匀后放置在培养箱24小时再进行后续处理。 Transwell实验 𐟚犥𘥼ƒ肿瘤细胞培养基,更换为THP1培养用的完全培养基600ul。将诱导好的THP1小室轻轻放入,上室加入无血清1640培养基300ul,培养箱中放置24小时后固定染色。 注意事项 ⚠️ PMA用DMSO而不是培养基溶解,否则会导致PMA析出而影响诱导效果。 如果下室的肿瘤细胞需要进行其他处理(比如敲低或过表),最好在六孔板中处理之后再点板,因为肿瘤细胞本身的数量和活力会对实验结果产生很大影响。 具体细胞数需要根据自己的细胞状态进行调整,这里仅供参考。 以上就是我的实验流程和一些小贴士,欢迎大家补充和讨论!希望我的经验能帮到你们,祝大家实验顺利!

细胞迁移与侵袭实验全攻略 细胞迁移与侵袭实验是一种研究细胞行为的强大工具。通过将Transwel小室放入培养板中,可以模拟细胞在不同环境下的迁移和侵袭行为。以下是详细的实验步骤和注意事项: 𐟧ꠦ料准备 显微镜:可拍照显微镜 Transwel小室:孔径8um,未包被胶的(Coste和Corning公司的也常用) 24孔板:与购买的Transwel小室相配套 培养基:DMEM(含1%胎牛血清)和1640培养基 完全培养基:DMEM和1640完全培养基(可加至20%血清) 无菌PBS、棉签、胰酶、甲醇、结晶紫染液(0.1% (g/ml) PBS结晶紫) 𐟔砥ꌦ�ꤊ基质胶铺板 使用BD公司的Matrigel,按1:8的比例稀释,包被Transwel小室底部膜的上室面,置于37℃30分钟使Matrigel聚合成凝胶。使用前进行基底膜水化。 制备细胞悬液 让细胞撤血清饥饿12-24小时,进一步去除血清的影响(这一步不是必须的)。 消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用PBS洗1-2遍,用含BSA的无血清培养基重悬,调整细胞密度至5x105/ml。 接种细胞 取100细胞悬液加入Transwel小室。 24孔板下室一般加入600含20%血清的培养基。特别注意下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了。在种板时要特别留心,一旦出现气泡,要将小室提起,去除气泡,再将小室放进培养板。 培养细胞 常规培养12-48小时(主要依细胞侵袭能力而定),24小时较常见。时间点的选择除了要考虑到细胞的侵袭力外,处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。 结果统计 直接计数法:贴壁细胞计数,所谓的“贴”是指细胞穿过膜后,可以附着在膜的下室侧而不会掉到下室里面去。通过给细胞染色可在镜下计数细胞。 取出Transwel小室,弃去孔中培养液,用无钙的PBS洗2遍,用甲醇固定30分钟,将小室适当风干。0.1%结晶紫染色20分钟,用棉签轻轻去掉上层未迁移细胞,用PBS洗3遍。400倍显微镜下随机五人视野观察细胞,记数。 通过以上步骤,你可以观察到细胞的迁移和侵袭行为,并对其进行定量分析。

细胞培养基的选择指南 𐟌𑊧𛆨ƒž培养基是细胞生长和繁殖的基础,它们为细胞提供必要的营养和生长环境。通常,培养基包含碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水。以下是几种常见的培养基类型及其特点: DMEM 𐟧슄ulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)是最常用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。它主要用于快速生长的细胞,分为低糖(1000mg/L)和高糖(4500mg/L)两种。DMEM含有更高浓度的NaHCO3,需要用10%的CO₂来平衡,也可以在较低CO₂浓度下使用。DMEM-高糖适合高密度悬浮细胞培养,而DMEM-低糖则适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞。 MEM 𐟌𑊍EM(Minimal Essential Medium)是最基本的培养基,最初设计用于培养HeLa细胞和部分哺乳类成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,适合多种细胞单层生长。以MEM为基础,Stanner利用Earle's Balanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)进一步配制成MEM-Alpha培养基,可广泛用于哺乳动物细胞的培养。 RPMI-1640 𐟧𔊒PMI-1640的营养成分相对简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽,广泛应用于许多种正常细胞和肿瘤细胞、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞、杂交瘤细胞的培养。其他如K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等也可使用RPMI-1640培养基。 DMEM/F12 𐟌🊆12培养基成分丰富,含有多种微量元素,与DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基,作为无血清培养基的基础。这种培养基适用于多种细胞的生长和繁殖。 选择合适的培养基对于细胞的生长和实验的成功至关重要。希望这些信息能帮助你更好地选择适合你的细胞培养基!

𐟔쥎Ÿ代细胞质粒转染实录𐟒‰ 𐟔探索原代大鼠主动脉平滑肌细胞的质粒转染之旅开始啦!𐟎‰ 在这场实验中,我们使用了Lipofect5000转染试剂,将GFP质粒注入第3代原代细胞中。𐟒– 让我们一起来看看转染后的真实反馈图吧! 𐟓ˆ转染条件如下: - 试剂:Lipofect5000 - 质粒:GFP - 细胞代数:第3代 - 转染密度:85% - 培养基:1640培养基+10%胎牛血清(无抗生素) 𐟒᧻过24小时的荧光观察,我们发现转染阳性率高达80%以上!这真是令人兴奋的结果!𐟎‰ 想要了解更多关于质粒转染的实验细节?快来咨询我们吧!𐟓ž 𐟔쥎Ÿ代细胞质粒转染,我们用事实和数据说话!𐟒ꀀ

吉布科1640:细胞优选 作为一名科研人员𐟔쯼Œ细胞培养是日常实验的必需品。最近,实验室尝试了Gibco的RPMI 1640培养基(货号11875093),效果令人满意!这款培养基专为哺乳动物细胞设计,适用于多种细胞系,尤其在免疫学和肿瘤研究中备受青睐。 首先,它的营养成分非常均衡,包含细胞生长所需的氨基酸、维生素、无机盐和葡萄糖。无论是原代培养还是长期培养,细胞状态都非常稳定,生长良好𐟌𑣀‚此外,根据实验需求,还可以添加L-谷氨酰胺或其他补充剂,灵活性很高。 值得一提的是,Gibco这个品牌的质量一直非常可靠,批次之间的稳定性非常好,每次培养的细胞状态都很一致。对于需要高重复性的实验,这一点非常重要!强烈推荐给需要高质量细胞培养基的科研伙伴们!

华晨阳RPMI-1640细胞培养基在药物研发中发挥了什么作用?

细胞培养的那些坑,你踩过几个? 养细胞这事儿,真不是一般人能搞定的。有人说,细胞培养就像是在玩俄罗斯方块,稍有不慎,你的“细胞方块”就会堆错位置,然后整个系统就崩溃了。今天咱们就来聊聊那些让人心累的细胞培养细节。 细胞复苏与保存:步步惊心 𐟧Š➡️𐟔劊刚复苏的细胞特别脆弱,需要你小心翼翼地呵护。为了不让它们莫名其妙地挂掉,你得先搞清楚每种细胞的习性。细胞复苏和保存这两个步骤看似简单,但实际操作起来却是一步一个坑。 选择合适的培养液:四大金刚 𐟒‰ 不同的细胞需要不同的培养液。培养基里的“四大金刚”——MEM、DMEM、1640、F-12,基本上能覆盖90%以上的细胞培养需求。MEM是老大,能力全面,应用最广泛。DMEM则是老二,浓度高,分为高糖型和低糖型。1640中规中矩,营养成分简单,适合养淋巴细胞。而F-12则常用于支持某些特定细胞的生长。 细胞生长空间:密度是关键 𐟌𑊊细胞生长的空间密度是细胞培养的关键。你不能让细胞瓶里的细胞拥挤得无法呼吸,也不能让它们太孤单。细胞接种前,需要通过细胞计数来调整浓度。这个步骤很关键,做不好就会让细胞“孤独死”。 贴壁细胞形态不好怎么办? 𐟤” 当培养的贴壁细胞形态不好时,可以在传代时先倒掉旧的培养基,加入新的培养基洗涤一次,然后用滴管吸走。接着再加入新的培养基,沿着瓶底轻轻吹打一遍,再吸走。这时再进行正式的消化和吹打。把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内,置于培养箱里培养,按时间点观察细胞贴壁情况。找到完美的形态为止。 培养基量:摸索中前行 𐟧ꊊ至于在培养瓶中加入多少培养基量,这需要你自己摸索。对于生长快的细胞,加少一点培养基会让细胞形态更好,但要注意换液时间的把握。 总结 细胞培养真的是一门手艺活儿,需要你不断摸索和尝试。每一个细节都可能影响到实验结果。希望这些小技巧能帮到你,让你的细胞培养之路更加顺畅!

合成培养基常见问题解答 𐟌𑊥ˆ成培养基在细胞培养中扮演着至关重要的角色,但使用过程中可能会遇到一些常见问题。以下是关于合成培养基的一些关键理化性质和选择合适培养基的指导。 𐟌᯸ 理化性质 pH:大多数合成培养基的pH值在7.2~7.4之间。随着细胞数量的增加和代谢活动的加强,二氧化碳不断释放,培养液会变酸,pH值会发生变化。通常使用酚红作为pH指示剂。 缓冲能力:细胞培养基通常采用NaHCO3-CO2缓冲系统,因此细胞代谢产生的CO2是造成培养液pH波动的主要物质。 渗透压:大多数哺乳动物细胞的适宜渗透压在260~320 mOsm/kg的范围内。 温度:过高温度可能导致营养成分的降解或破坏,影响培养基的pH、离子强度和电解常数pKa。 𐟔 如何选择合适的培养基? MEM培养基:适用于各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养,是最基本且适用范围最广的细胞培养基。 RPMI-1640培养基:广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞以及杂交瘤细胞的培养。 DMEM培养基:适用于许多哺乳动物细胞培养。低糖型适用于依赖性贴壁细胞,特别适合生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞;高糖型适合高密度悬浮细胞培养。 DMEM/F-12培养基:将DMEM与F12按照1:1混合,营养成分丰富,适用于多种哺乳动物细胞的生长,包括MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠成纤维细胞。 McCoy's 5A培养基:含有还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖,广泛用于多种类型的原代细胞的培养,如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。 Ham's F-12K培养基:在Ham's F-12的基础上提高了氨基酸和丙酮酸的浓度,降低了葡萄糖的用量,并修改了盐的成分和含量。最初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。 IMDM培养基:用于培养红细胞前体细胞和巨噬细胞。在DMEM的基础上添加了硒、HEPES、丙酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素,营养非常丰富,适合快速增殖和高密度细胞培养。 Medium199培养基:含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶以及其他的维生素。最初用于鸡胚成纤维细胞的培养,现已广泛应用于各种动物细胞的培养,包括一些非哺乳类动物细胞。 了解这些信息可以帮助你更好地选择和使用合成培养基,确保细胞培养的成功。

B16-F10细胞培养全攻略 𐟔젧𛆨ƒž基本信息 英文名称:B16-F10 中文名称:小鼠皮肤黑色素瘤细胞 种属:鼠源 组织来源:皮肤 品系:C57BL/6J 疾病:黑色素瘤 𐟌𑠧”Ÿ长特性与细胞形态 生长特性:贴壁生长 细胞形态:梭形细胞样;上皮细胞样 𐟔„ 传代与换液 传代比例:1:2 ~ 1:4 换液频率:2~3次/周 倍增时间:48-72h 𐟧ꠥŸ𙥅𛤽“系与条件 培养体系:DMEM(高糖)+10%FBS+1%P/S 培养条件:5%CO2;37 ℃ ❄️ 冻存条件 冻存液:Biochannel细胞冻存液 程序降温:液氮长期保存 𐟌Ÿ 细胞培养特点 DMEM(含1.5g/L NaHCO3)培养基中生长良好,大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培养基培养细胞时需要提高CO2浓度(7%-10%)。 推荐的基础培养基是DMEM(高糖)培养基。 DMEM培养的B16-F10细胞会分泌较多黑色素,而1640培养基则较少。可根据实验需求尝试更换培养体系,更换时建议留种。 更换为DMEM培养液时,请确保血清和培养液质量,否则可能导致细胞不长、生长缓慢以及黑色素大量分泌。 𐟤” 常见问题解答 收货时细胞出现伪足或碎片较多怎么办? 受到运输影响,悬浮细胞会短暂性出现形态改变,如伪足等。通过传代培养,1周左右可以恢复正常。一些细胞在运输途中死亡而产生碎片,通过传代离心可以去除。 培养过程中细胞发生贴壁怎么办? 少量细胞贴壁属于正常情况,将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,需排查培养箱设置、培养基成分,以及培养器皿是否异常。 培养过程中细胞发生聚团怎么办? 少量细胞聚团,呈葡萄串状,属于正常现象,特别是细胞密度较低时。更换血清品牌或增大血清比例(不超过20%)有助于解决聚团问题。不建议将聚团的细胞吹散,等待密度高时,会自己分散开。 培养基里一定要加巯基乙醇吗? 巯基乙醇是一种常用的培养补充剂,有抗氧化的作用,可减少氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过大但需要维持时,可适当增加巯基乙醇的比例(不超过标准量的1.5倍)。

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