超速离心最新视觉报道_超速离心和差速离心(2024年12月全程跟踪)
贝克曼SW28转子:超速离心新选择 贝克曼(Beckman)的超速离心机水平转子SW28是一种高性能的离心设备,专为蛋白质、亚细胞颗粒和病毒等密度梯度分离而设计。찟 这款转子的最大转速可达28,000 rpm,最大离心力为141,000 x g,展现了卓越的分辨率和性能。ꊊSW28转子的容量为6 x 38.5 mL,适合多种实验需求。其转子材料为阳极氧化铝,桶体材料为钛和阳极氧化铝,确保了耐用性和稳定性。簟銊此外,SW28转子的k因数为246,表明其在高速离心过程中具有较高的离心效率。芊这款转子不仅适用于蛋白质和亚细胞颗粒的分离,还可用于测定蛋白的结构及分子量、蛋白与蛋白或小分子的相互作用等研究。찟찟슊贝克曼SW28转子是生命科学研究领域中不可或缺的重要设备,适用于多种复杂的生物样品分离和分析任务。쀀
上海富衡|血清外泌体去除之法:细胞培养 “纯净度” 的追求
细胞上清液蛋白浓缩7大方法,轻松搞定! 在实验室中,浓缩细胞上清液中的蛋白质是一个常见且重要的步骤。以下是几种常用的浓缩方法,帮助你轻松增加样品中蛋白质的浓度。 超滤浓缩 通过选择合适分子量截留的超滤膜,可以有效浓缩细胞上清液中的溶质。操作简单,但需注意膜的选择和操作条件的控制。 离心浓缩 ꊥ駔訶 速离心将细胞上清液中的溶质沉淀,然后去除上清液或进一步浓缩。适用于多种样品,但对样品处理和操作技巧要求较高。 冷冻干燥 ❄️ 将细胞上清液在低温下冷冻后,通过升华去除水分实现浓缩。适用于保护样品中的蛋白质等生物大分子,但操作复杂,需要专门设备。 透析袋浓缩法 ️ 将蛋白溶液放入透析袋中,通过吸水剂或高分子聚合物的作用,将水分从透析袋中去除,从而浓缩蛋白质溶液。 吹干浓缩法 芥白溶液装入透析袋内,通过电风扇吹干,简单但速度较慢。 凝胶浓缩法 使用孔径较小的凝胶粒子吸水后,通过离心除去多余水分,达到浓缩蛋白质的目的。 注意事项(主要针对超滤浓缩法) 选择合适的超滤管:根据细胞上清液中目标分子的分子量选择合适截留分子量的超滤管,通常截留分子量应不大于目标蛋白分子量的1/3。 样品准备:确保样品中无杂质,以防止堵塞超滤管或影响分离效果。 平衡和预冷:使用前,超滤管应加入适量的水或缓冲液,并在冰浴或冰箱中预冷,以保护滤膜并提高分离效率。 离心参数:设置适当的离心速度和时间,避免过高的离心力导致滤膜破损。离心机的加速度应调至最低档,以减小对膜的压力。 监测和防止漏液:在浓缩过程中,应定期检查超滤管是否漏液,可以通过加入染料溶液(如Bradford溶液)来检测。如果发现漏液,应重新开始超滤。 防止堵管:注意离心过程中是否发生蛋白沉淀,导致堵管。如果发生沉淀,应确定沉淀的原因并采取相应措施,如降低蛋白浓度或更换合适的缓冲液。 Buffer更换:如果需要更换缓冲液,应在总蛋白液浓缩至一定体积后,轻轻加入新的Buffer,并继续浓缩,以实现Buffer的更换。 清洗和维护:使用后,应按照制造商的建议清洗和维护超滤管,以确保其长期可靠性和避免交叉污染。 在选择具体的浓缩方法时,需要考虑样品的性质、所需浓缩倍数、蛋白质的稳定性以及实验的具体要求。在实际操作中,可能需要根据实验条件和目的调整浓缩方法。
증记生物EZ慢病毒浓缩液探秘 증记生物的EZ慢病毒浓缩液,一款能够快速浓缩慢病毒的神奇产品!无需繁琐的超滤或超速离心,只需简单孵育与离心,即可获得高浓缩的病毒液。 ꩫ浓缩比是它的亮点之一,最高可达240倍的浓缩比,意味着120mL的病毒上清液可以浓缩至仅500uL! 回收率高达92%,确保你的病毒资源得到最大程度的利用。 经过浓缩,病毒的滴度可提升至10^8或10^9,且活性更佳,转导效果更显著。 操作简便、快捷、安全,是科研工作者的得力助手!
tRNA:蛋白质合成的关键小分子 𑊨绠RNA(tRNA)是细胞中第二常见的 RNA 类型,大约占总 RNA 的 10-20%。由于其尺寸较小,无法通过超速离心沉淀,因此也被称为可溶性 RNA。 tRNA 的功能 튥訛白质合成过程中,tRNA 扮演着至关重要的角色。它作为衔接分子,将氨基酸连接到 mRNA 中特定的密码子上。tRNA 的氨酰化是蛋白质合成的第一步,并且每种 tRNA 都特定于一种氨基酸。在核糖体亚基的翻译过程中,tRNA 将氨基酸转移到生长的多肽链上。tRNA 具有三个结合位点:A、P 和 E,分别对应氨酰基、肽基和出口。特定 tRNA 对 mRNA 密码子的解码一直持续到多肽链的整个序列被翻译完毕。 tRNA 的结构 RNA 的二级结构呈三叶草形状,主要由三个发夹环组成。成熟的真核 tRNA 分子量约为 25000~30000,沉降系数为 3.8S,大约有 70-90 个核苷酸。tRNA 的主要成分包括: 受体臂:由 5'端和 3'端的 7-9 个核苷酸碱基配对而成。5'末端有一个磷酸基团,3'末端有特定序列的 CCA 或 CCA 尾巴。氨基酸连接到受体臂的 3' 羟基。 DHU循环:D 臂有一个 3-4 个碱基对的茎,它以一个称为 D 环的环结束,因为它通常含有二氢尿苷,一种修饰的核苷酸。 反密码子循环:它有一个 5 个碱基对的长茎。它有一个反密码子环,其中包含存在于 mRNA 上的与其携带的氨基酸互补的密码子(3 个核苷酸序列)。这些未配对的反密码子环碱基与 mRNA 密码子配对。每个密码子都由特定的 tRNA 识别。 T 回路:T 臂由一个 4-5 bp 的茎和一个含有假尿苷、修饰的尿苷的环组成。 可变循环:它存在于 T 环和反密码子环之间。它的大小从 3-21 个碱基不等。它有助于识别 tRNA 分子。 tRNA 的氨酰化或充电是翻译过程的第一步,由氨酰 tRNA 合成酶催化。通过这些复杂的结构和工作机制,tRNA 在蛋白质合成中发挥着至关重要的作用。
高密度脂蛋白胆固醇是什么意思 高密度脂蛋白胆固醇是一种对人体有益的胆固醇,是血液中密度最高、颗粒最小的脂蛋白。由多种物质组成,包括胆固醇、甘油三酯、磷脂和蛋白质等。具有抗动脉粥样硬化、降低游离胆固醇浓度和维持血脂平衡等重要作用。 1、高密度脂蛋白胆固醇的生理作用 抗动脉粥样硬化:高密度脂蛋白胆固醇具有独特的抗动脉粥样硬化的作用。可以将动脉粥样硬化血管壁内的胆固醇运输到肝脏内进行代谢清除,从而有效地降低了血管壁和末梢组织中滞留的多余胆固醇,有助于预防心血管疾病的发生。 降低游离胆固醇浓度:高密度脂蛋白胆固醇可以通过卵磷脂胆固醇酰基转移酶的作用,促进胆固醇的酯化过程,从而降低血浆中高密度脂蛋白里的游离胆固醇浓度。 维持血脂平衡:高密度脂蛋白胆固醇还有助于维持血脂之间的平衡,这一功能可以降低动脉粥样硬化的风险,是维护整体心血管健康的重要组成部分。 2、高密度脂蛋白胆固醇的测定方法 高密度脂蛋白胆固醇的测定方法有多种,其中最为准确的方法是利用超速离心技术分离出血中的高密度脂蛋白,然后再测定其中的胆固醇含量。此外,还可以通过其他生化方法进行测定,如电泳法、免疫化学法等。 3、高密度脂蛋白胆固醇的异常及影响因素 高密度脂蛋白胆固醇偏低:可能由不良生活方式、药物影响及疾病因素导致。 高密度脂蛋白胆固醇偏高:可能由遗传因素、体重管理不当、饮食习惯、运动习惯以及某些药物引起。 保持健康的高密度脂蛋白胆固醇水平对于维护心血管健康至关重要。高密度脂蛋白胆固醇水平越高,心血管疾病的发病率通常越低。通过合理的饮食、运动和生活方式调整,可以提高高密度脂蛋白胆固醇水平,维护心血管健康。 如何提高高密度脂蛋白胆固醇水平 增加富含单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的食物摄入,如坚果、鱼类、橄榄油等。多吃富含纤维的食物,如燕麦、全麦面包、豆类等,有助于降低低密度脂蛋白胆固醇水平,间接提升高密度脂蛋白胆固醇水平。控制糖分摄入,避免过多摄入甜食和高糖饮料。 定期进行有氧运动,如快走、慢跑、游泳等,每周至少150分钟,有助于提高高密度脂蛋白胆固醇水平。戒烟限酒,吸烟和过量饮酒都会降低高密度脂蛋白胆固醇水平。保持健康体重,通过合理饮食和运动控制体重在正常范围内。 在某些情况下,如果高密度脂蛋白胆固醇水平过低且无法通过饮食和生活方式调整来改善,医生可能会建议使用药物来提高高密度脂蛋白胆固醇水平。但药物治疗应在医生指导下进行,并遵循医生的建议。 「医学科普」「中医超话」「高密度脂蛋白胆固醇」
施一公团队揭示IgE激活FcI新机制 10月23日,西湖大学未来产业研究中心、生命科学学院和西湖实验室的施一公团队,以及深圳医学科学院的宿强团队合作,在《自然》(Nature)杂志上发表了一篇题为《IgE介导的高亲和力受体激活的分子机制》的研究论文。该研究首次报道了人源IgE高亲和力受体(FcI)的二聚化结构,并揭示了IgE结合诱导受体从二聚体转变为单体的过程,以及这种构象变化对受体激活的影响。 西湖大学的访问人员陈梦莹(已毕业的清华大学博士生)是本研究的唯一第一作者,施一公教授和宿强博士为共同通讯作者。IgE是过敏反应的核心免疫球蛋白,其与高亲和力受体FcI的相互作用至关重要。FcI由FcIFcIFcI成,其中责识别IgE,在受体激活后启动下游信号通路。FcI在肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面高表达,形成2四聚复合物。 过敏原诱导IgE结合的FcI发生交联,引起肥大细胞的脱颗粒反应,推动过敏性疾病的发生。靶向破坏IgE与FcI结合的药物被认为是有效的抗过敏治疗策略。尽管IgE与FcI的识别机制已被研究得较为清晰,但关于FcI的跨膜区的研究仍较为薄弱。 研究团队设计了一系列实验,结合生化、细胞和免疫等多种技术,揭示了FcI在生理状态下以二聚体形式存在。通过分析型超速离心(AUC)和非变性聚丙烯酰胺凝胶(Native-PAGE)分析,研究团队发现FcI复合物存在单体 (2) 和二聚体 [(2)2]两种状态。此外,荧光寿命成像显微镜-荧光共振能量转移(FLIM-FRET)技术也检测到了在细胞膜上FCERI之间距离很近,很有可能肩并肩地以二聚体的形式存在。 研究表明,IgE结合能够促使FcI从二聚体状态转变为单体形式。IgE的结合,像一把钥匙,成为打开二聚体的关键。从结构角度看,二聚化的FcI不利于下游信号的激活,而IgE结合的FcI则以单体形式存在,这种构象转变有助于暴露FcIFcI内段的ITAMs,从而更有效地激活下游信号通路。 研究团队构建了多种稳转细胞系,包括野生型 (WT-FcI)、组成型二聚体 (GCN4-FcI)和阴性对照 (DA-FcI)。利用流式细胞术、RNA测序(RNA-seq)、qPCR等多种实验手段,系统验证了不同状态下FcI激活效应的差异。最终,团队提出了IgE介导FcI复合物激活的工作模型,为理解IgE与FcI的相互作用及其在过敏反应中的作用提供了全新视角。 该研究得到了审稿人的高度评价,他们认为FcI二聚体的发现为IgE-FcI的功能研究提供了关键机制见解,并称赞此工作为未来抗过敏疗法研究奠定了重要基础。这一突破性发现,不仅为理解过敏性疾病的发病机制提供了新的视角,也为开发针对IgE-FcI相互作用的治疗策略提供了科学依据。 本研究获得了科技部、国家自然科学基金委、西湖教育基金会、西湖大学未来产业研究中心和西湖实验室的相关经费支持;同时得到了西湖大学未来产业研究中心生命原理技术平台、超级计算技术平台的技术支持。
诚邦CDL-T55:科研好帮手 如果你在实验室里搞科研,尤其是医疗卫生、放射免疫、生物制药或者血液制品分离提纯方面的工作,那么诚邦CDL-T55低速冷冻离心机绝对是你的好帮手。这款离心机最大容量能达到4x250ml,最高转速高达5500r/min,转速精度ⱱ0rpm,简直是实验室里的得力小助手。 精准控温,安全第一 诚邦CDL-T55采用的是进口高性能压缩机组,精准控温,无氟制冷剂R404a,完全没有污染。动态压缩机控制节能技术确保离心过程温度精准而稳定。更棒的是,它还有软刹车功能,能有效防止样品重悬。运行时误操作报警提示,不开启门盖确保人身安全,断电还配备应急开关。超温、超速、误操作、不平衡时故障码、声音提示并自动强制快速停机,确保使用者、样品与机器安全。 坚固耐用,抗造性强 ꊊ这款离心机的转子采用硬质氧化处理的7075-T6系统合金铝锻造,高强度安全转子,可121℃高压灭菌2小时以上。整机采用防爆高强度钢板结构设计,不锈钢离心腔冲压成型,耐腐蚀不易结霜。 微机控制,效率翻倍 𛊊诚邦CDL-T55采用微电脑控制,参数精准控制,工作效率提升。你可以直接设定工作程序、离心力、转速、离心时间、温度、升降速。双回路设计,制冷加热快,使用结束后一键除霜不留冷凝水,有效保护电机、电路。预制冷功能让你在待机状态下设置日期和时间进行自动预冷,提高工作效率。 多种模式,灵活选择 这款离心机有20种工作程序选择,可自由编程、调用其设定的工作参数,运行中可快速制冷,从室温21℃降至生物零度4℃时不到5分钟。多达15种加/减速档选择,可根据样品需求任意设定一组升降速。还有点动即瞬时离心功能,可自行设定启动计时、定速计时和冷冻机型定温启动计时(选配)三种方式可调。 总之,诚邦CDL-T55低速冷冻离心机真的是实验室里的得力小助手,安全、高效、灵活,绝对值得一试!
医学检验必看:生检实验方法全解析 大家好!今天我们来聊聊医学检验中的一些常见实验方法,特别是那些让你头疼的生检物质。别担心,我已经帮你整理好了,这样你就能轻松分辨出哪些是Trinder方法,哪些是普通方法啦~ 快来看看吧! 葡萄糖 (Glu) 葡萄糖的测定方法有很多,但最常用的两种是己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法(POD-GOD法)。这两种方法都很经典,大家一定要掌握哦! 甘油三酯 (TG) 甘油三酯的测定方法主要有GPO-POD法(磷酸甘油氧化酶法)。如果你想做更精确的测量,可以用同位素稀释质谱法。 胆固醇 (TC) 胆固醇的测定方法有胆固醇氧化酶法(COD-PAP法)。同样,如果你想更精确地测量,可以试试同位素稀释质谱法。 Trinder反应 Trinder反应主要用于血脂肪酶的测定,方法有比浊法和酶偶联法(546nm)。这两种方法都很灵敏,适合临床检测。 尿酸 尿酸的测定方法有尿酸酶-过氧化物酶法(520nm)。这个方法非常经典,大家一定要记住哦! 肌酐 (Cr) 肌酐的测定方法有肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸速率法(510nm)。后者需要一些特殊的仪器和试剂,但结果非常准确。 胆红素 胆红素的测定方法有胆红素氧化酶法(BOD-POD法)和重氮盐改良JG法。这些方法都很灵敏,适合临床检测。 总蛋白 (TP) 总蛋白的测定方法有双缩脲法和凯氏定氮法。双缩脲法最常用,结果也很可靠。 清蛋白 (Ab) 清蛋白的测定方法有染料结合法,常用的染料有溴甲酚绿和溴甲酚紫。这些方法都很灵敏,适合临床检测。 糖化血红蛋白 (HbA1c) 糖化血红蛋白的测定方法有离子交换层析微柱法和高效液相色谱法。这两种方法都很精确,适合糖尿病患者监测血糖控制情况。 脂蛋白 (LP) 脂蛋白的测定方法有琼脂糖凝胶电泳法和超速离心法。前者需要一些特殊的仪器和试剂,但结果非常准确。后者则适用于实验室研究。 血清脂蛋白 (Apo) 血清脂蛋白的测定方法有免疫透射比浊法和免疫散射比浊法。这两种方法都很灵敏,适合临床检测。 尿素 尿素的测定方法有二乙酸-显色法和豚酶波氏比色法(560nm)。这些方法都很经典,大家一定要记住哦! 肌酸激酶 (CK) 肌酸激酶的测定方法有免疫抑制法和速率法。这些方法都很灵敏,适合临床检测。 乳酸脱氢酶 (LDH) 乳酸脱氢酶的测定方法有免疫抑制法和速率法。这些方法都很经典,大家一定要记住哦! 血淀粉酶 血淀粉酶的测定方法有以天然淀粉为底物的测试方法和限定性底物法(450nm)。这些方法都很灵敏,适合临床检测。 胆汁酸 (TBA) 胆汁酸的测定方法有酶循环法。这种方法需要一些特殊的仪器和试剂,但结果非常准确。 血氨 血氨的测定方法有谷氨酸脱氢酶直接测定法(GLDIO)。这种方法需要一些特殊的仪器和试剂,但结果非常准确。 离子钙 离子钙的测定方法有离子选择电极法和同位素稀释质谱法。前者需要一些特殊的仪器和试剂,但结果非常准确。后者则适用于实验室研究。 血钙 血钙的测定方法有分光光度法和离子选择电极法(ISE)。这两种方法都很经典,大家一定要记住哦! 钠、钾 钠和钾的测定方法有火焰光度法和比色法。这两种方法都很经典,大家一定要记住哦! 血磷 血磷的测定方法有还原钼蓝法和连续检测法(340nm)。这两种方法都很灵敏,适合临床检测。 ALTIASTIALPIGGT ALT、AST、ALP、GGT等酶的测定方法有连续检测法(340nm)。这些方法都很经典,大家一定要记住哦! 希望这些总结能帮到你们!如果有任何问题或需要更多信息,欢迎随时留言哦!
透射电镜样本处理全攻略 透射电镜样本处理看起来可能有点复杂,但只要掌握了技巧,其实也不难。下面我来详细讲解一下各种样本的处理方法。 细胞样本处理 슥𝧚细胞(106个,密度不超过70%)首先需要弃去培养基,然后加入胰酶消化或者用细胞刮子刮下(贴壁细胞)。接着,加入2.5%的戊二醛电镜固定液,固定5分钟。用细胞刮子斜着朝一个方向一次性快速刮下细胞,千万别反复来回刮哦。 接下来,将细胞液吸入离心管内,用PBS清洗三次,然后放入离心机低速(1000rpm)离心3到5分钟,直到细胞成团(建议细胞团达到绿豆大小)。离心后弃去上清液。 然后,加入2.5%的戊二醛电镜固定液,吹散细胞团重悬,室温避光固定1小时。最后,将处理好的细胞转移到4℃环境保存。如果需要长时间运输,EP管中需加满固定液,并用-20℃冰袋保存,注意将样品与冰袋隔开(可用气泡膜),避免样品冷冻结冰。 组织样本处理 准备一个装有2.5%戊二醛电镜固定液的培养皿。用手术刀取下目标组织,并快速放入培养皿的固定液中。如果组织上残留过多血液或组织液,建议在切割前快速用0.1MPBS清洗三次。以上操作最好在2分钟内完成。 接下来,用锋利的刀片将组织切成1x1x1mm左右的小块,或者1mm㗱mm㗳mm的长条薄片(截面切勿大于1mm㗱mm,以免无法完全固定)。将修切好的小组织块转入1.5mL离心管中浸入戊二醛固定液中,室温避光固定1小时。最后,将处理好的组织转移到4℃环境保存。如果需要长时间运输,EP管中需加满固定液,并用-20℃冰袋保存,注意将样品与冰袋隔开(可用气泡膜),避免样品冷冻结冰。 外泌体样本处理 血浆样本:用EDTA抗凝管采集血液,如果不能第一时间处理,请于4℃临时保存(不得超过4小时)。将采集到的血液在4℃下1500g离心20分钟,去除血液中的细胞。取上清液,4℃下3000g离心15分钟,收集上清(血浆),-80℃保存。送样量一般为4mL。 血清样本:用EDTA抗凝管采集血液(a),如果不能第一时间处理,请于4℃临时保存(不得超过4小时)。将采集到的血液在4℃下1500g离心20分钟,去除血液中的细胞。取上清液,4℃下13000g离心2分钟,收集上清(血清),-80℃保存。送样量一般为超离4mL排阻+超滤1mL。 病毒样本处理 破碎组织细胞,粗离心去除细胞碎片取上清液。超速离心分离出病毒。用缓冲液(如PBS)悬浮病毒,体积至少50ul。远距离干冰冻存运输,近距离4℃保存运输。尽快滴片做负染后及时电镜观察拍照。(噬菌体4℃运输) 细菌样本处理 长于固体培养基的细菌:连带着培养基一起挑下细菌放于电镜固定液内室温避光固定30分钟,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输。在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。 悬浮细菌孢子等:离心收集细菌要肉眼可见细菌沉淀绿豆大小,弃培养基后加电镜固定液室温避光固定30分钟,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输。在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。 希望这些步骤能帮到你!处理电镜样本其实并不难,只要掌握了正确的方法和步骤,你也能轻松搞定!ꀀ
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