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细胞系最新娱乐体验_细胞系是什么意思(2024年11月深度解析)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：话题更新日期：2024-11-27

细胞系

论文回顾：癌细胞中环状DNA变异的奥秘今天花了一个小时阅读一篇关于“癌细胞系中环状DNA变异的多样性”的论文。文章发表在某杂志上，据说审稿速度快，反馈快，在线发表也很快，但收稿范围较广。 𐟓š 论文内容：这篇文章主要研究癌细胞系中环状DNA（eccDNA）的变异情况。研究结果显示，不同样本间的eccDNA重复率极低，仅为0.1-0.3%。从癌细胞系高度活跃导致高度异质性的角度来看，这一解释是合理的。尽管这一发现可能会引起同行的不满，但这也从侧面证明了研究者的严谨性，他们只发表了研究结果，并没有因为研究结果不利于行业而隐瞒或删掉它。 𐟔젦–𙦳•与技术：文章中提到了一种名为Circle-Pure的技术，该技术在前人技术的基础上进行了优化改良，值得进一步研究。 𐟤” 其他思考：一个有趣的问题是，是否在RCA扩增过程中，eccDNA受到了很大影响？如果使用非扩增技术，是否可以提高重复率？这些问题值得进一步探讨。通过这次阅读，我不仅学到了新的研究方法和技术，还对科学研究和学术发表有了更深入的理解。

细胞转染实验：从基础到实践细胞转染实验是分子生物学研究中的一项关键技术，它允许我们将外源性的DNA、RNA或蛋白质引入真核或原核细胞，从而深入探讨基因功能、表达调控以及疾病机制。根据转染的方式和所使用的材料，细胞转染可以分为多种方法，包括物理方法（如电穿孔法、显微注射法）、化学方法（如磷酸钙共沉淀法、脂质体转染法）和生物方法（如病毒介导的转染）。脂质体转染法 𐟌𑊊脂质体转染法利用带正电的脂质体与带负电的核酸分子（DNA/RNA）通过静电作用形成复合物，然后通过脂质体的膜融合或细胞的内吞作用将核酸分子导入细胞。准备细胞：选择合适的细胞系，调整至对数生长期，铺板至适当的细胞密度。准备转染复合物：按照脂质体转染试剂说明书，将DNA/RNA与脂质体按一定比例混合，孵育形成转染复合物。转染：将转染复合物加入到含有细胞的培养基中，轻轻混匀。培养：将细胞置于适宜条件下培养，根据实验需求进行换液或处理。检测：通过荧光观察、Western Blot、qPCR等方法检测转染效率和基因表达情况。电穿孔法 ⚡ 电穿孔法利用短暂的高电压脉冲处理细胞，使细胞膜形成暂时性孔洞，从而使外源DNA/RNA进入细胞。准备细胞：将细胞悬浮在电穿孔缓冲液中，调整至合适的细胞密度。电穿孔：将细胞与DNA/RNA混合后，置于电穿孔杯中，施加一定强度的电脉冲。恢复培养：将处理后的细胞迅速转移至含有培养基的容器中，置于适宜条件下培养。病毒介导的转染 𐟦 病毒介导的转染利用经过基因改造的病毒（如逆转录病毒、腺病毒、慢病毒等）作为载体，将外源基因整合到宿主细胞基因组中或实现瞬时表达。病毒包装：在包装细胞内生产携带外源基因的病毒颗粒。病毒感染：将病毒颗粒加入到目标细胞中，使病毒感染细胞。培养：将感染后的细胞置于适宜条件下培养，使外源基因表达。注意事项 ⚠️ 选择合适的转染方法和条件，确保转染效率和细胞活性。注意实验安全，尤其是使用病毒介导的转染时。转染后应密切监测细胞状态，及时调整培养条件。根据实验需求选择合适的检测方法和时间点。通过这些步骤，我们可以更深入地了解细胞的内部机制，为生物学研究和药物开发提供有力支持。

重组蛋白两大细胞系起底，CHO与HEK293哪家强？「科研」「实验室」「重组蛋白」

成人急性淋巴细胞白血病有什么特点？成人急性淋巴细胞白血病占成人急性白血病的 25％左右，发病原因迄今未明，一般认为与以下因素有关： (1) 遗传易感性。先天性染色体异常患者发生白血病的风险增加。某些遗传性疾病患者、先天性疾病或获得性免疫缺陷患者，也是该病的易感人群。 (2) 辐射。 (3) 化学制剂如苯与急性淋巴细胞白血病的发生有关。 (4) 病毒。没有直接证据表明病毒能造成人类急性淋巴细胞白血病，但有证据提示某些病毒在淋巴系统肿瘤的病理过程中起作用。日本与加勒比海地区 HTLV-I 病毒的流行感染被认为是成人 T 细胞白血病 / 淋巴瘤的病因，EB 病毒是一种非洲地方性伯基特淋巴瘤的强致病因素。 B 细胞系急性淋巴细胞白血病（ALL）中普通细胞 ALL 是成人急性淋巴细胞白血病的主要亚型，占成人急性淋巴细胞白血病的 51％左右，早期 B 前细胞 ALL 约占 11％，前 B 细胞 ALL 约占 10％。成人患者多数预后不佳，虽然完全缓解率可达 75 ％～ 80％，但 3 ～ 5 年生存率仅为 28％～ 39％。 #国庆健康记#

mRNA差异显示：揭秘细胞特异 mRNA差异显示技术（DD-PCR）是一种结合了mRNA逆转录和PCR技术的RNA指纹图谱技术。每种细胞（包括同一组织细胞经过不同处理）都有其独特的基因表达谱，即特异的RNA指纹图谱。这些差异基因表达是细胞分化的基础，决定了细胞的发育和分化、细胞周期调节、细胞衰老和凋亡等生命过程。 mRNA DDR T-PCR技术是一种快速且有效的分离组织特异性表达基因的方法。其基本原理是从基因背景相同的两个或多个被比较的细胞系或组织中提取总RNA，逆转录成cDNA，然后用不同引物对进行PCR扩增。扩增时加入同位素标记的核苷酸，利用测序胶电泳技术分离PCR产物，经放射自显影即可找到差异表达的基因。

细胞标记必备：活细胞示踪剂使用指南最近发SCI论文真是越来越难了，没有几张亮眼的图片根本没法在一区发表。今天给大家介绍一个超级实用、操作简便的论文出图神器——活细胞示踪剂（论文里写作celltracker）。活细胞示踪剂可以用绿色荧光或红色荧光标记细胞，而且荧光能在七天内保持不淬灭。特别适合研究多种细胞共培养过程中，某种细胞的生长、分化和运动状态。比如你在水凝胶中培养细胞，但水凝胶透光率差看不清细胞，这时候就可以用示踪剂来标记观察。相比免疫荧光染色，操作步骤简单，成功率也高。新手也能一次成功！操作步骤我们用的是翌圣的CMFDA：用50ul DMEO溶解50ug CMFDA粉末，配成2mM的母液，然后存到-20度冰箱。使用时取出母液，放置五分钟化冻后，在离心机里离心3000转五分钟（这一步不能偷懒，不然母液会损失很多）。用DMEM或其他无血清培养基配置工作液。如果是细胞联系紧密的细胞系，比如HUVEC，工作液的比例是3ul母液+4ml DMEM。如果是细胞贴壁不牢（如231）或者细胞形态很长（如成纤维、成骨细胞），工作液比例是1ul母液+4ml DMEM。把配好的工作液加入T25细胞培养瓶中，37度孵育10分钟，镜下观察染色情况。孵育完成后用PBS清洗两遍，再37度孵育30分钟。注意事项工作液不要用PBS配，细胞会死很多。细胞最好长满一点再染色，活力会更好。工作液里母液浓度不要太高，孵育时间最好不要超过20分钟，不然细胞很容易挂掉（别问我为什么知道）。如果你在透光性不好的凝胶里养细胞，最好用共聚焦拍照。翌圣家还有一款红色的示踪剂，普通显微镜拍不到，只能用共聚焦拍。如果你有钱，也可以用赛默飞的产品，据说效果更好。最后提醒一下，活细胞示踪剂的结果不能代替免疫荧光的结果，如果需要做免疫荧光的朋友们不能偷懒哦！额外推荐我最近正在便宜出一些细胞，有HUVEC、231、HFOB1.19、HMCAF（人乳腺癌成纤维细胞），有需要的朋友可以联系我哦！希望这篇指南能帮到大家，祝大家科研顺利，论文多多！𐟒ꀀ

AGS人胃腺癌细胞培养全攻略𐟓–✨ 𐟔젧瑧 ”新手们，欢迎来到细胞培养的世界！今天，我们将带你一步步了解AGS人胃腺癌细胞的培养过程，让你的科研之旅更加顺畅。 𐟧ꠦ料与仪器准备： AGS人胃腺癌细胞系 DMEM高糖培养基羊血清青霉素/链霉素无菌PBS缓冲液 1% 波洛克霉素无菌离心管、细胞培养瓶、转移管、吸管、移液枪超净工作台 CO2培养箱倒置显微镜甲醇、乙醇、果糖、氯化钠、甲基红、尼龙网袋、培养皿等 𐟔堥ꌦ�ꤦ奕毼š 1️⃣ 细胞培养瓶消毒：把细胞培养瓶泡在70%乙醇或含0.1%甲醛的70%乙醇中20-30分钟，然后放在超净工作台内自然风干。不用时尽量保存在超净工作台内哦。 2️⃣ 培养基制备：DMEM高糖培养基里加10%羊血清和1%青霉素/链霉素，过滤后冷藏保存。用之前在37℃水浴中回温到室温。 3️⃣ 细胞解冻：从液氮罐里取出AGS细胞，迅速放入CO2培养箱，停留10-15分钟。然后室温下慢慢滴加3-5 mL DMEM高糖培养基，再加1%波洛克霉素，混匀。 4️⃣ 细胞培养：把细胞均匀铺在50ml细胞培养瓶里，加入10ml DMEM高糖培养基，PH值7.2-7.4，细胞密度0.2㗱06/mL。放在含5% CO2的37℃培养箱里培养，观察细胞贴附情况。 5️⃣ 细胞分裂和传代：当细胞密度达到60-70%时，用1%液体消化酶溶解细胞贴壁，离心后取上清90%，加1ml DMEM高糖培养基，细胞密度维持在0.2㗱06/mL。 6️⃣ 细胞数量计数：取出少量培养细胞，用比色计或倒置显微镜计数，为后续操作做准备。 7️⃣ 细胞冻存：用冻存液将有活力的细胞保存在液态氮中。 8️⃣ 细胞实验：根据实验需求，将细胞分别培养在不同的试验环境中进行检测。 𐟓 在实验过程中，记得严格把控细胞的密度和培养条件哦，这样才能保证实验结果的准确性。祝你科研顺利！𐟎‰

线粒体与多组学分析：探索未知的疾病机制 𐟔 在探索线粒体功能障碍的背后，科学家们发现了一种名为PYURF的蛋白质，它似乎在调节辅酶Q（CoQ）和线粒体复合物I（CI）的生物学过程中发挥着关键作用。𐟔슊𐟌🠥𝓐YURF被破坏时，许多患者会表现出CoQ或CI的缺失，尽管没有发现已知的CoQ和CI相关基因突变。通过分析不同细胞系中的CoQ水平，研究者发现，在缺失PYURF的细胞中，CoQ和复合物蛋白的下调最为显著。𐟓‰ 𐟓ˆ 代谢组学数据显示，PYURF敲除株中的二氢乳清酸水平提高，这表明PYURF可能通过某种方式桥接这些基本且相互关联的代谢过程。进一步的全蛋白组分析揭示了三种CoQ相关蛋白（C0Q3、C0Q5、C0Q7）和三种CI组装因子（AF3、AF5、AF8）的明显下降。𐟌€ 𐟔— 通过深入研究，研究者发现PYURF仅与AF5和COQ5两种蛋白互作，而这两种蛋白又与AF8及其他辅酶Q蛋白互作。PYURF结合AF5是通过稳定其结构来发挥作用。因此，研究者提议将PYURF重命名为NDUFAFQ，因为它通过相互连接的CI和CoQ通路结合并稳定SAM-MTS。𐟔銊𐟑𖠥œ襯𙤸€个出生患有代谢性酸中毒的儿童进行全外显子测序后，研究者发现，患者PYURF第二个外显子中的一个移码突变是唯一可能的遗传因素。在HAP1细胞中过表达PYURF突变，发现其效果等同于PYURF敲除株，因此认为该PYURF突变很可能就是致病因子。𐟒‰ 𐟔 通过MITOMICS数据库分析，研究者能够解析未知功能的线粒体蛋白的作用。这一研究思路为探索线粒体疾病的潜在治疗靶点提供了新的方向。𐟌Ÿ

科研新手找课题？用它！ 𐟎“ 科研新手们，是不是常常感到没有思路？别担心，这里有一个超级实用的科研网站推荐给你！𐟓– 𐟔 首先，你需要有一个大致的研究方向。比如，你想研究某种疾病、某种细胞类型（如nk-92细胞系）、某种表型（如耐药性、复发、过度生长、凋亡），或者某种药物（如Pembrolizumab，PD-1靶向药物）。将这些关键词逐个输入coremine数据库，你会得到与这些关键词相关的基因、蛋白质和药物信息。 𐟌𐠤𘾤𘪤𞋥퐯𜌥悦žœ你输入的关键词是nk-92细胞系、Methionine（氨基酸）和Pembrolizumab，你会发现与这些关键词相关的基因No1是met。虽然met与这三个关键词都有关联，但并没有文章同时报道这三个关键词。因此，met就是一个潜在的基因值得深入研究。 𐟔— 如何找到coremine数据库？只需在搜索引擎上输入“coremine”，点击界面右侧的“coremine medical”，进入注册界面。使用你的邮箱注册后，即可开始使用。输入关键词进行搜索，关键词可以逐个添加，也可以批量添加（特别是基因），点击右上角的“tools”，然后选择左侧的“file upload”。 𐟎‰ 这个网站不仅免费，而且操作简单，适合科研新手快速找到新的研究课题。赶快试试吧！

CellMinerCDB：药组学神器 CellMinerCDB是一个基于网络的资源平台，专门用于整合多种药理学和基因组分析数据，涵盖了最丰富的细胞系数据集。这个数据库支持基因组学和基因调控网络分析的数据查询，以及药物基因组学决定因素和药物特征的探索。 CellMinerCDB利用数据库中细胞系和药物的重叠来检查可重复性并扩展通路分析。文章强调了评估突变负担的复杂性，并证明了CellMinerCDB在选择具有可重复活性的药物方面的价值。此外，文章还扩展了SLFN11在药物反应中的主导作用，并提出了拓扑异构酶抑制剂和schweinfurtins的新反应决定因素和基因组特征。LIX1L作为一个与细胞迁移和侵袭性调控相关的基因，也在文章中得到了介绍。 CellMinerCDB在阐明基因表达决定因素（如DNA甲基化和拷贝数变异）方面也具有重要价值，为药物研究和开发提供了强有力的支持。

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