rna转录前沿信息_dna和rna杂交过程774(2024年11月实时热点)
RNA提取与逆转录详细步骤解析 ꠥꌥ师整理,详细步骤,喂饭版。 包括核酸分析及电泳,聚合酶链式反应(PCR)等。 结果与意义分析 OD260/OD280比值在1.8-2.0为符合实验要求。 出现问题与解决办法 无RNA沉淀 勾浆不完全:基因组DNA分子仍然很大,沸液粘润。变性的蛋白质和基因组DNA一起形成絮状凝集物容易包裹RNA,使之不能有效地释放到溶液中。 沉淀不完全:从小于210动植物细胞、小于2m配动物组织、小于4m植物组织或RNA含量低的动植物组织中提取RNA时,勾体积太大,将造成RNA过分稀释而不能沉淀下来。当从这样的样品中提取RNA时,应按比例减少抽提溶液。 A260/A280比率小于1.65 分光度计测量前用水而不是用TE缓冲液稀释RNA样品。低离子强度和低pH溶液会增加280nm处的光吸收值。 样品匀浆化时所加的TRIZOL量太少。 匀浆化后样品没有在室温下放置5分钟。 分离的水样层中污染有苯酚层。 终RNA没有完全溶解。 RNA降解 从动物体取下的组织或细胞没有立即进行抽提或冰冻保存。 水溶液或试管污染有RNA酶。 考题 TRIZOL法提取RNA如何避免DNA污染? 凝胶有可能分辨范围广泛的DNA分子,制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。小片段的DNA电泳应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳以提高分辨率。 结果与意义分析 OD260值在1-R的比值18-2.0。因为蛋白质的吸光度值,如果溶液中有蛋白将会导致比值降低。所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA。 DNA电泳条带应该是整齐清晰,无拖尾或缺损的。变性胶电泳结果显示3条条带(28S、18s、和5s)为得到完整的RNA,且28s的亮度应为18s的两倍。 出现问题与解决办法 电泳条带模糊或弥散:更换电泳液、使用不含核酸酶的试剂、电泳后及时成像,电压适中。 思考题 用琼脂糖凝胶电泳分析核酸(DNA和RNA)有哪些影响因素? 实验器材应一次性使用(枪头、PCR管)。 注意操作环境,戴一次性手套。 严格PCR操作规程。 多次取样的试剂应分装。 设置阴性对照和阳性对照。 降低退火温度对反应有何影响? 循环次数是否越多越好?为什么? PCR技术可应用于哪些方面?举例?
表观组学与转录组学的奇妙世界 表观组学和转录组学是生物学领域的两大研究热点,它们分别关注基因表达和调控的可遗传变化以及RNA转录本的变化。 表观组学专注于在不改变DNA序列的情况下,通过表观遗传修饰(如甲基化、乙酰化等)来调控基因的表达和性状的变化。这种调控可以在不同的时间和环境条件下发生,从而影响生物体的生命活动。𑊊转录组学则主要研究RNA转录本的变化、转录调控以及与表观遗传学的联系。它主要关注基因表达的起始阶段,即RNA的合成和修饰过程。而表观组学则更侧重于基因表达的终末阶段,即RNA的翻译和修饰过程。 近年来,随着单细胞测序技术的发展,表观组学和转录组学逐渐结合起来,共同研究基因表达和调控的可遗传变化。这种联合研究不仅有助于我们更深入地理解生命的本质,还为疾病诊断和治疗提供了新的思路和方法。
「阳光信用超话」[月亮]「阳光信用」[微风]「熊猫守护者」 基因信息传递及调控基因信息传递 涉及遗传、变异、生长、分化等生命过程,与遗传性疾病、恶性肿瘤、代谢异常性疾病、免疫缺陷性疾病、心血管疾病等多种疾病的发病机制有关。遗传的主要物质基础是DNA,生物化学与分子生物学除进一步研究DNA的结构与功能外,更重要的是研究DNA复制、RNA转录、蛋白质生物合成等基因信息传递过程的机制及基因表达调控的规律。重组DNA技术、转基因动植物、基因敲除、新基因克隆、人类基因组计划及蛋白质组计划等将进一步推动生物化学的发展。
rt是什么意思 점CR(聚合酶链式反应):目的是扩增特定的DNA片段。通过DNA聚合酶在特定温度下循环(通常是95℃变性、55℃退火、72℃延伸)来复制目标DNA片段。应用场景包括基因克隆、DNA指纹图谱、病原体检测等。 RT-qPCR(逆转录定量聚合酶链式反应):目的是定量分析某个mRNA的表达水平。首先使用逆转录酶将RNA转录为cDNA,然后利用实时定量PCR技术进行扩增。通过加入荧光标记探针或染料,实时监测每个循环中扩增的DNA量。最终通过分析数据计算目的基因的表达量。 RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应):目的是从RNA模板扩增cDNA。首先使用逆转录酶将RNA转录为cDNA,然后利用DNA聚合酶进行PCR扩增。应用场景包括检测特定mRNA的表达、基因表达分析等。 qPCR(定量聚合酶链式反应):目的是定量分析DNA序列的拷贝数。在PCR基础上加入荧光标记探针或染料,实时监测每个循环中扩增的DNA量。技术包括使用SYBRGreen染料或TaqMan探针等。应用场景包括基因表达分析、病原体定量、遗传突变检测等。 通过这些技术的结合,可以实现对特定基因表达水平的精确测量和分析。
奥司他韦和玛巴洛沙韦:流感治疗新选择 流感季节来临,选择合适的抗病毒药物至关重要。目前市场上主要有两种流感特效药:奥司他韦和玛巴洛沙韦。 奥司他韦:神经氨酸酶抑制剂 奥司他韦通过抑制神经氨酸酶来阻止病毒的复制,对甲型和乙型流感都有效。 推荐剂量:成人和1岁以上儿童,每次75mg,每日2次,连续5天。预防流感时,每日1次即可。 注意事项:肾功能不全者需根据肾功能调整剂量,精神类不良反应如谵妄、幻觉等较高。 玛巴洛沙韦:RNA转录抑制剂 玛巴洛沙韦主要抑制流感病毒RNA转录所需的聚合酶性蛋白的内切酶,从而抑制病毒复制。 推荐剂量:成人、青少年和5岁以上儿童,单次口服40mg;体重≥80kg者,单次80mg。 注意事项:可能导致过敏反应,乳糖不耐受者慎用。研究表明,玛巴洛沙韦在抗流感退热方面比奥司他韦效果好,尤其对乙型流感感染。 药物效果比较 奥司他韦对H1N1和H5N1病毒具有耐药性,而玛巴洛沙韦在抗流感退热方面表现更佳。此外,玛巴洛沙韦还能缩短流感病程,降低住院率。 련柳駛𘤺作用 奥司他韦主要经肾排泄,肾功能不全者需调整剂量。玛巴洛沙韦目前尚无严重肝肾功能损伤的报道。 𐠥报蠥哺乳期妇女用药 奥司他韦在妊娠和哺乳期妇女中的用药数据较为充分,而玛巴洛沙韦的相关数据尚不清晰。 在选择抗病毒药物时,务必咨询医生,根据个人情况选择最适合的药物。袀⚕️颀⚕️
PCR家族揭秘:4种技术比拼 점CR(聚合酶链式反应):PCR的目的是扩增特定的DNA序列。它利用DNA聚合酶在特定温度下复制DNA片段。PCR的应用非常广泛,包括基因克隆、DNA指纹图谱和病原体检测等。 qPCR(定量PCR):qPCR的目的是定量分析DNA拷贝数。它在PCR的基础上加入荧光探针或染料,实时监测每个循环中扩增的DNA量。qPCR的技术包括使用SYBR Green染料或TaqMan探针等。它的应用包括基因表达分析、病原体定量和遗传突变检测。 RT-PCR(逆转录PCR):RT-PCR的目的是从RNA模板扩增cDNA。它首先使用逆转录酶将RNA转录为cDNA,然后利用DNA聚合酶进行PCR扩增。RT-PCR的应用包括检测特定mRNA的表达和基因表达分析等。 RT-qPCR(逆转录定量PCR):RT-qPCR的目的是定量分析RNA序列的表达水平。它结合了RT-PCR和qPCR的技术,先逆转录为cDNA,然后进行实时定量PCR。RT-qPCR的技术包括使用SYBR Green染料或TaqMan探针等,实时监测cDNA的扩增。它的应用包括miRNA表达分析和病原体RNA定量等。 PCR和qPCR主要用于DNA的分析,而RT-PCR和RT-qPCR则用于RNA的分析。不同PCR方法的主要优缺点如图三所示。
「松鼠」~关注并转发+@好友,寻找一位有缘人,快来参与抽奖吧~ 今天抽一本《生物信息学》,内容涵盖分子生物学数据库、序列结构与功能分析、基因表达与非编码RNA转录分析、蛋白质结构与功能、系统生物学、合成生物学,以及计算生物学等生物信息学中的重点问题
锌真的可以对抗流感和感冒吗? 锌参与了体内数百种基本的生物反应。它还有助于非常重要的细胞过程,如 DNA 复制、RNA 转录和细胞分裂。早在 70 年代,锌补充剂治疗普通感冒的功效就一直存在争议,来看看锌真的可以对抗流感和感冒吗?医视频的微博视频
「诺贝尔生理学或医学奖揭晓」最近这个诺奖给了发现miRNA的学者,从而引发人们对miRNA的关注,这个小RNA很早就在医疗界引起关注,我在2011年还在我们分子生物学吕有勇教授实验室从事过关于胃癌复发相关的miRNA的研究,研究结果发表在Annals of Oncology,可惜后续没有更多的科研经费使研究继续下去[黑线] 尽管我们现在对mi RNA已经很熟悉,但仍然有很多不解之谜,例如:人类到底有多少游离的、稳定的mi RNA?它们的功能有多少?是否在修复和控制RNA转录时诱发肿瘤产生?什么因素诱发它们工作?…… 如果大家感兴趣可以关注尹烨教授视频号,他给大家科普了mi RNA[赞]
分子实验中的RT到底是啥? 在分子生物学实验中,RT 这个缩写可是个大咖,全称是 Reverse Transcription,也就是我们常说的逆转录。简单来说,这个过程就是用 RNA 作为模板来合成 DNA,方向和转录过程正好相反,所以叫逆转录。这个反应需要一种叫逆转录酶的催化剂来帮忙。 RT 的应用可广泛了,主要用在逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和荧光定量 RT-PCR(RT-qPCR)中。这些技术不仅在科研上大放异彩,还在临床诊断、药物研发等方面有着重要的应用。 所以,下次看到 RT 这个缩写,你就知道它代表着逆转录啦!
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