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ph标准缓冲液在线播放_ph标准缓冲液怎么配置(2024年12月免费观看)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：导读更新日期：2024-11-30

ph标准缓冲液

如何测量和校正QC-pH值？𐟌᯸ 今天我们来聊聊pH值测量的一些基本知识，特别是关于QC-pH的部分。pH值的测量在药品研发和质量控制中非常重要，涉及到的样品包括工艺用水（如注射用水）、某些原辅料（如氢氧化钠）、注射液、口服液以及疫苗等。测量pH值通常使用pH计，操作过程与渗透压测量类似，需要先进行校正再进行实际测量。校正过程中需要用到标准缓冲液，这些缓冲液可以通过标准物质管理部门购买，或者按照特定方法自行配制。校正过程有两种主要方法，我们重点介绍其中一种。首先，需要准备三种不同的标准缓冲液。先用两种缓冲液进行自动校正，获取斜率和漂移值（设备上通常有对应的按钮，按照提示将电极放入对应的缓冲溶液中，设备会自动给出结果）。结果符合要求后，用第三种缓冲液进行验证。这个过程类似于样品检验，但已知“样品”的具体pH值，通过读取的pH值与已知值对比，符合要求则校正通过。例如，如果已知样品pH值大约在6.5左右，可以选择pH值为4.01和9.18（25℃时）的缓冲液进行自动校正，然后用pH值为6.86（25℃时）的缓冲液进行验证。验证通过后，再读取样品的实际pH值。需要注意的是，不同温度下的标准缓冲液的真实值有所不同。如果使用的pH计有温度补偿功能，可以忽略标准缓冲液的温度。如果没有温度补偿功能，应尽量将标准缓冲液的温度控制在室温，并用设备读取出来的pH值与读取出来的温度对应图三中的真实值进行对比确认。例如，用pH值为6.86（25℃时）的缓冲液进行验证，读数结果pH值为6.82，缓冲液温度为20.0℃，那么此时该缓冲液理论pH值为6.88，6.82-6.88＞0.05pH，则验证未通过。此外，还有一些注意事项，例如为了除去二氧化碳和温度对标准缓冲液配制和样品检测的影响。希望这些信息对大家有所帮助！如果有任何疑问或需要进一步解释的地方，欢迎在评论区留言。

仪器校准指南：标准溶液的使用方法 𐟓Š 仪器的校准方式多种多样，所需的条件也各不相同。有些仪器需要使用标准溶液来进行校准。接下来，我将为您介绍几种仪器的校准方法。 𐟌᯸ pH计：准备：准备一系列已知pH值的标准缓冲溶液，例如pH 4、7和10的缓冲液。这些标准溶液用于校准pH计。过程：清洁并干燥pH计的电极。将电极浸入第一种标准溶液中，等待读数稳定，然后根据仪器说明书调整pH计的校准值。重复上述步骤，使用其他标准溶液进行校准，观察pH计在不同pH值下能否准确读数。 𐟒砧”𕥯𜧎‡仪：准备：准备一种或多种具有已知电导率的标准溶液。过程：清洁电导率仪的电极。将电极浸入标准溶液中，等待读数稳定。根据仪器说明书，使用标准溶液的电导率值对电导率仪进行校准，观察是否在许可范围内。 𐟔젥ˆ†光光度计：准备：准备一种或多种具有特定吸光度值的标准溶液。过程：根据仪器说明书，设置分光光度计至适当的波长。使用标准溶液对分光光度计进行零点调整和斜率校准，观察是否符合要求。 𐟏�‰𒨰𑤻꯼š 准备：准备一种或多种具有已知成分和浓度的标准样品。过程：根据色谱仪的类型和样品特性，设置合适的色谱条件。使用标准样品对色谱仪进行校准，观察进样量、流速、温度等参数是否符合标准。在这些校准过程中，确保标准溶液的准确性和稳定性至关重要。同时，遵循仪器说明书和校准规范进行操作，以确保校准结果的准确性和可靠性。完成校准后，根据校准结果出具相应的校准证书，以证明仪器的准确性和可靠性。

pH计使用指南：正确校正与操作步骤嘿，朋友们！有没有遇到过pH计读数飘忽不定的情况？别担心，我们一起来解决这个问题吧！其实，只要按照正确的步骤来操作，就能避免很多麻烦。下面我来详细讲解一下pH计的使用方法和注意事项。了解pH计的工作原理 𐟌𑊊首先，我们先来了解一下pH计的工作原理。pH计实际上是利用原电池的工作原理来工作的。简单来说，就是由参比电极和指示电极构成一个原电池。参比电极的电极电位保持不变，而指示电极的电极电位会随着溶液pH值的变化而变化。为了将这个变化转化为pH值，我们需要用到标准缓冲溶液来进行标定。使用步骤 𐟓 打开后盖，装入一块电池。安装复合玻璃电极时要注意以下几点：复合电极的下端是易碎玻璃泡，使用和存放时要小心，防止碰撞。复合电极内有KCl饱和溶液作为传导介质，要随时观察液体是否充足。如果发现液体剩余少量，应及时补充。复合电极的仪器接口不能有污染或水珠。复合电极的连线不能强制性拉动，防止线路接头断裂。打开电源开关，并调到pH测量档。用温度计测量pH6.86标准液的温度，然后将pH计温度补偿旋钮调到所测的温度值下。用去离子水冲洗干净复合电极，并用滤纸擦干。将2~5mL的pH6.86标准溶液倒入已用水洗净并擦干的塑料烧杯中，洗涤烧杯和复合电极后倒掉，再加入20mL的pH6.86标准溶液于塑料烧杯中，将复合电极插入溶液中，用仪器定位旋钮调至读数6.86，直到稳定。注意以下几点：必须用pH6.86标准溶液调定位。调完后，不能再动定位旋钮。用去离子水洗净复合电极，用滤纸擦干，再用温度计测量pH4.00溶液的温度，并将仪器温度补偿旋钮调到所测的温度值下。将2~5mL的pH4.00标准溶液倒入另一个塑料烧杯中，洗涤烧杯和复合电极后倒掉，再加入20mL的pH4.00标准溶液，将复合电极插入溶液中，读数稳定后，再用斜率旋钮调至pH4.00。（PS：斜率钮调完后，不能再动！）用温度计测定待测液温度，并将仪器温度调至所测温度。将复合电极插入待测溶液中，读取pH值。注意以下几点：测定时温度不能过高，如超过40℃，测定结果将不准，需用烧杯取出并冷却。复合电极应避免和有机物接触，一旦接触或沾污，需用无水乙醇清洗干净。温馨提示 𐟌Ÿ 在使用前必须进行校准，即以上步骤4~8的操作。如果仪器不关机，可以连续测定，一旦关机就要进行校准。（PS：12小时内，即使不关机也必须校准一次）注意事项 𐟓‹ 一般情况下，pH计在连续使用时，每天要标定一次；一般在24小时内仪器不需要再标定。使用前要拉下pH计电极上端的橡皮套使其露出上端小孔。标定的缓冲溶液一般先用pH6.86的溶液，再用接近被测溶液pH值的缓冲液。如被测溶液为酸性时，应选pH4.00的缓冲液；如被测溶液为碱性时，则选pH9.18的缓冲液。测量时，电极的引入导线应保持静止，否则会引起测量不稳定。电极切忌浸泡在蒸馏水中。pH计所使用的电极如为新电极或长期未使用过的电极，则在使用前必须用蒸馏水进行数小时的浸泡，这样pH计电极的不对称电位可以被降低到稳定水平，从而降低电极的内阻。在进行pH值测量时，要保证电极的球泡完全进入到被测量介质内，这样才能获得更加准确的测量结果。使用时，要拿掉参比电解液加液口的橡皮塞，这样参比电解液就能够在重力的作用下，持续向被测量溶液渗透，避免造成读数不稳定。希望这些步骤和注意事项能帮到你！如果你还有其他问题或需要更多帮助，欢迎随时留言哦！𐟘Š

实验室设备使用，必看攻略！ ### 天平使用前检查水平泡：确保天平的水平泡在中间位置。药品称量：不要直接在天平上称量药品，特别是含结晶水的药品，要放入玻璃仪器中称量。使用称量纸时要对角折叠，换称不同药品时要清洁药匙，以免污染。精密天平：使用时关上两面的窗口读数。清零和清理：称量完毕后清零天平，清理内部及周围的药品，将用过的称量纸放入废纸篓，保持环境整洁。定期校准：定期使用标准砝码进行校准，如半年或一年，移动后也宜校准，校准方法参考说明书。酸度计标定：使用前需标定酸度计，一天只需标定一次。温度控制：待测溶液温度不要过高，加热后的溶液需冷却后测量pH。标准缓冲液：定期更换标准缓冲液，一般2-3个月。超声洗涤器清洗和装水：使用前将超声洗涤器洗干净，装上干净的自来水。设置时间和功率：设置好超声时间和功率，超声洗涤器在20℃以上才开始工作。盖好盖子：使用完毕后将盖子盖好。水浴锅检查水和水温：使用前检查水浴锅中的水是否充足和干净，设置使用温度，最高加热温度不得高于95℃。夜间使用：夜间使用时，加入足量的水并盖上封口盖。溶剂蒸干：溶剂蒸干时，将水浴加热的容器固定，以免液体蒸干后重量变轻导致翻转。使用磁力搅拌时随时检查搅拌情况，防止液体喷溅。关闭加热器：使用完毕后关闭加热器，避免干烧。通风橱有毒物质：涉及有毒或挥发性物质时请打开通风橱。窗户关闭：打开通风橱时关闭实验室窗户，防止气体通过窗口回到实验室。关闭通风橱：实验完毕后及时关闭通风橱，风机长时间运转会影响寿命。烘箱烘箱内物品：烘箱内不得烘干易燃易爆的物质，如含有乙醇、乙醚等的样品。玻璃器皿干燥：干燥玻璃器皿时，先将器皿中的水尽量除干，以免水淋下导致烘箱损坏，之后将口朝下放置，尽量放在下层。特定温度干燥：如需要特定温度干燥，请使用个人烘箱，并注明使用时间，防止其他同学影响实验。样品取出：样品干燥完毕后及时取出，烘箱一个半年做一次清理。

pH计使用与保养全攻略：从零到高手 𐟓– 首先，阅读仪器的使用说明书是必不可少的。接通电源，安装好电极。在小烧杯中加入pH值为7.0的标准缓冲液，将电极浸入，轻轻摇动烧杯，使溶液均匀。按照不同pH计的说明书操作，读取溶液的pH值，校对pH计，使其读数与标准缓冲液的pH7.0的实际值相同并稳定。然后，将电极从溶液中取出并用蒸馏水充分淋洗。接着，将小烧杯中的标准缓冲液换为pH4.01或0.01的标准缓冲液，重复上述步骤使其读数稳定。这样就完成了二重点校正。校正完毕后，用蒸馏水冲洗电极和烧杯。注意，校正后不要旋转定位调节器，否则需要重新校正。 𐟔砰H计的使用测量前，确保所测溶液的温度与标准缓冲液的温度相同。使用前必须调节温度调节器或斜率调节旋钮。先进的pH计在线路中安插有温度补偿系统，仪器经初次校正后，能自动调整温度变化。测量时，先用蒸馏水冲洗两电极，用滤纸轻轻吸干电极上残余的溶液，或用待测液洗电极。然后，将电极浸入盛有待测溶液的烧杯中，轻轻摇动烧杯，使溶液均匀。按下读数开关，指针所指的数值即为待测溶液的pH值。重复几次，直到数值不变。数字式pH计在约10秒内数值变化少于0.01pH值时，表明已达到稳定读数。测量完毕后，关闭电源，冲洗电极，玻璃电极要浸泡在蒸馏水中。 𐟛 ️ pH计的保养玻璃电极在初次使用前，必须在蒸馏水中浸泡一昼夜以上。平时也应浸泡在蒸馏水中以备随时使用。玻璃电极不要与强吸水溶剂接触太久，在强碱溶液中使用应尽快操作，用毕立即用水洗净。玻璃电极球泡膜很薄，不能与玻璃杯及硬物相碰。玻璃膜沾上油污时，应先用酒精，再用四氯化碳或乙醚，最后用酒精浸泡，再用蒸馏水洗净。如测定含蛋白质的溶液的pH时，电极表面被蛋白质污染，导致读数不可靠，也不稳定，出现误差，这时可将电极浸泡在稀HCl（0.1mol/L）中4-6分钟来矫正。电极清洗后只能用滤纸轻轻吸干，切勿用织物擦抹，这会使电极产生静电荷而导致读数错误。甘汞电极在使用时，注意电极内要充满氯化钾溶液，应无气泡，防止断路。应有少许氯化钾结晶存在，以使溶液保持饱和状态。使用时拨去电极上顶端的橡皮塞，从毛细管中流出少量的氯化钾溶液，使测定结果可靠。 𐟌᯸ pH测定的准确性取决于标准缓冲液的准确性。酸度计用的标准缓冲液，要求有较大的稳定性，较小的温度依赖性。

pH计校准步骤与注意事项详解 𐟛 ️ pH计校准所需工具和材料标准缓冲液：选择与待测溶液pH值接近的标准缓冲液。我国常用的标准缓冲液有3种，分别是：邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），pH 4.003，0.05M 混合磷酸盐（Na2HPO4），pH 6.864，0.025M 硼砂（Na2B4O7ⷱ0H2O），pH 9.182，0.01M 𐟓 标准缓冲液的配置方法邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液（pH 4）：精密称取在115Ⱶ℃干燥2～3小时的邻苯二甲酸氢钾10.12g，加水溶解并稀释至1000mL。磷酸盐标准缓冲液（pH 7）：精密称取在115Ⱶ℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠4.303g与磷酸二氢钾1.179g，加水溶解并稀释至1000mL。磷酸盐标准缓冲液（pH 6.8）：精密称取在115Ⱶ℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠3.533g与磷酸二氢钾3.387g，加水溶解并稀释至1000mL。硼砂标准缓冲液（pH 9）：精密称取硼砂3.80g（注意避免风化），加水溶解并稀释至1000mL，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免与空气中二氧化碳接触。 𐟔砰H计校准步骤校准前的准备：将实验室用的pH计仪器斜率调至最大。拨开电极上部的橡胶塞，使小孔露出。校准基准点：将电极从装蒸馏水的烧杯中取出，用滤纸吸干残留的蒸馏水。将电极放入装有混合磷酸盐的烧杯内，等待15分钟以上。调整仪器上的定位旋钮，使仪器显示6.86pH。清洗电极：将电极从装有混合磷酸盐的烧杯内取出，用蒸馏水洗净。将电极放入装有蒸馏水的烧杯内，等待3分钟左右。校准斜率：将电极从装蒸馏水的烧杯内取出，用滤纸吸干残留的蒸馏水。将电极放入装有邻苯二甲酸氢钾或硼砂的溶液中，等待15分钟以上。观察仪器显示是否为4.00或9.18pH。如果不是，调节仪器上的斜率旋钮，使仪器显示为4.00或9.18pH。三点校正：如果需要进行三点校正，将另一种溶液按上述步骤操作一遍即可。 𐟓Œ 注意事项在进行校正时，确保电极上的小孔露出，否则会产生负压，导致溶液不能正常进行离子交换，影响测量数据。校正过程中，使用滤纸吸干电极上的残留液体，避免影响测量结果。

DNA大小相同但电泳条带位置不同的原因 𐟌 在进行 DNA 电泳实验时，有时会发现 DNA 分子大小相同，但电泳条带位置却有所不同。这可能是由于以下原因： 1️⃣ 分子构象差异：即使 DNA 分子大小相同，它们的空间构象可能不同。例如，超螺旋的 DNA 分子比线性或环形 DNA 分子更加紧密，因此在电场中受到的阻力较小，迁移速度更快，导致在凝胶中的位置更靠前。 2️⃣ DNA 修饰：DNA 分子可能发生甲基化、磷酸化等修饰，这些修饰会改变 DNA 分子的电荷性质和空间结构，从而影响其在电场中的泳动速率。 3️⃣ 结合的其他分子：DNA 分子可能与其他蛋白质、金属离子或小分子化合物结合，这些结合物会增加 DNA 分子的质量和体积，改变其电荷分布，进而影响电泳迁移。 4️⃣ 凝胶的均匀度：如果制备的凝胶不均匀，存在局部孔径大小不一致的情况，相同大小的 DNA 分子在不同孔径区域的迁移速度会有差别，导致条带位置不同。 5️⃣ 电泳缓冲液：缓冲液的离子强度、pH 值等参数如果不一致，会影响 DNA 分子的解离状态和所带电荷，进而影响其在电场中的泳动速度。 𐟔 为了判断 DNA 大小相同但电泳条带位置不同的原因，可以通过以下几种方法：核酸构象分析：酶处理：使用能够特异性作用于不同构象 DNA 的酶进行处理，如拓扑异构酶。如果处理后电泳条带位置发生变化，可初步判断与构象有关。热变性实验：将样品进行加热处理，使 DNA 分子的二级结构打开，观察电泳条带的变化。如果加热后条带位置趋于一致，可能说明原始差异是由构象导致。检测 DNA 修饰：甲基化检测：使用甲基化特异性的抗体或化学检测方法，检测 DNA 是否存在甲基化修饰。其他修饰检测：针对可能的磷酸化等修饰，使用相应的检测试剂和方法进行检测。检测结合分子：蛋白酶处理：如果怀疑有蛋白质结合，使用蛋白酶处理样品后进行电泳，观察条带变化。金属离子螯合剂：加入金属离子螯合剂，去除可能结合的金属离子，观察电泳结果。凝胶检查：重复凝胶制备：重新制备凝胶，确保凝胶的浓度均匀、孔径一致，进行电泳对比实验，如果条带位置变化，说明原凝胶存在问题。缓冲液检查：更换缓冲液：使用标准缓冲液进行电泳，与原缓冲液的电泳结果对比，如果条带位置改变，说明缓冲液的离子强度或 pH 值等因素是影响因素之一。通过以上方法，可以更准确地确定 DNA 大小相同但电泳条带位置不同的原因。

pH计校准与使用全攻略 𐟌ˆ pH计的校准步骤打开仪器电源，将模式切换为pH。取出电极，清洗并擦干，放入pH值为1.68的标准缓冲液中。按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。将电极清洗干净，擦干，放入pH值为4.00的标准缓冲液中。再次按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。将电极洗干净，擦干，放入pH值为6.86的标准缓冲液中。按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。将电极洗干净，擦干，放入pH值为9.18的标准缓冲液中。按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。校准标准范围：斜率应在95%～105%之间。 𐟔젰H样品测定将电极洗干净，擦干，放入样品溶液中。按下Read键，等待读数稳定，仪器会自动读取。 𐟒砰H计电极的保存溶液：3mol/L的KCl溶液理由：保持电极的pH电势平衡。增加导电性。消除对电极的噪音反应。 𐟔„ pH计的原理 pH计用于测量溶液中的氢离子活度（即pH值），pH值是氢离子浓度的对数的负数。主要测量部件包括：玻璃电极：对pH敏感，其电位取决于周围溶液的pH值。参比电极：电位稳定，作为测量各种偏离电位的对照。电流计：将电位放大若干倍，放大的信号通过电表显示。将pH计的两个电极一起放入同一溶液中，就构成了一个原电池。 𐟌Š pH计电极为什么要浸泡？因为pH球泡是一种特殊的玻璃膜，在玻璃膜表面有一层很薄的水合凝胶层，只有在充分湿润的条件下H+离子有很好的响应。同时，玻璃电极经过浸泡可以使不对称电势大大下降并趋向稳定。 𐟧𜠧Ž𛧒ƒ球泡污染老化如何处理？将电极用0.1mol/L的稀盐酸浸泡清洗。或将电极下端浸泡在4%氰氟酸中3～5秒，用蒸馏水洗净。然后在氯化钾溶液中浸泡使其恢复。 𐟓Š pH计读数不稳定、跳动原因检查电极是否损坏或是否接触不良。查看玻璃球是否污染，如有机物的累积导致不灵敏。用饱和的KCl溶液浸泡探头，保持润湿状态。使用离子强度调节剂：如KCl，增加溶液离子强度及导电性。温度补偿：读数会受温度影响，需测定时进行温度补偿。

𐟌🰟Œ🩅𖦴𛦵‹定实验记录𐟌🰟Œ🊦1.9 𐟍ƒ𐟍ƒDNS法测定还原糖: 将粗酶液稀释一定倍数后，取3只比色管标号1,2,3，加入稀释的发酵液0.5ml，加入DNS试剂0.5ml混匀，沸水浴5min，冷却后加入4ml蒸馏水混匀，540nm处测OD值。 𐟍ƒ𐟍ƒ滤纸酶活力（FPase）的测定：取适量稀释的粗酶液0.5ml于试管中，加入1.5ml柠檬酸缓冲液（PH4.5、0.05mol/L），再加入滤纸条50mg，50℃水浴1h后取出，按DNS法测定还原糖。 𐟍ƒ𐟍ƒ葡萄糖标准液的测定：分别取葡萄糖标准液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1ml于15ml试管中，用蒸馏水补足至1.0ml，分别准确加入DNS试剂2ml，沸水浴加热2min，流水冷却，用水补足到15ml刻度。在540nm波长下测定吸光度。以葡萄糖含量（mg）为横坐标，光吸收值为纵坐标。图: 三组对峙实验图图一: E对C 图二: B对C 图三: A对C

大鼠2型糖尿病模型构建与鉴定全攻略大鼠2型糖尿病（T2DM）模型构建：造模前生理指标检测 𐟐튥𐆦‰€有SD大鼠过夜禁食（>12小时），隔天进行以下生理指标的检测：使用电子天平对每只大鼠进行称重，记录基础体重数据。使用血糖仪测定每只大鼠的空腹血糖（FBG）含量，记录基础血糖值。构建大鼠T2DM模型 𐟏劤𝿧”詫˜糖高脂饲料（含67.5%的常规饲料、10%猪油、20%蔗糖和2.5%胆固醇）喂养4周，然后更换成清洁级标准维持鼠料。将溶解于0.1 mM柠檬酸盐缓冲液（pH=4.2）的链脲佐菌素（STZ）按照20 mg/kg的剂量，左下腹腔注射，每天1次，持续3天。 STZ注射完毕即造模完成（记作0周），待造模1、2、4周后鉴定大鼠T2DM造模稳定情况。大鼠2型糖尿病（T2DM）模型鉴定 𐟔스𝓩‡水平监测 𐟓Š 待所有SD大鼠T2DM模型构建结束后，使用电子天平对每只大鼠进行称重，每周一次记录体重数据。空腹血糖（FBG）测定 𐟩𘊥𞅦‰€有SD大鼠T2DM模型构建结束后，使用血糖仪检测造模1、2、4周后大鼠的FBG，即尾尖采血测空腹血糖水平。口服葡萄糖耐量实验（OGTT） 𐟍‡ OGTT 实验检测造模1、2、4周后大鼠血糖水平，具体操作如下：检测前将所有实验大鼠禁食12小时，于OGTT检测当日称重并尾尖采血，测空腹血糖作为0分钟血糖。然后使用葡萄糖溶液灌胃（2 g/kg），在灌胃后30分钟、60分钟、120分钟测量大鼠血糖并记录。

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