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内容来源：麦吉窗影视所属栏目：导读更新日期：2024-12-02

lb培养基配方

𐟧젥ꌥ🅥䇯𜚧”˜油保菌与复苏全攻略 𐟧슱️⃣ 甘油的准备浓度要求：甘油浓度通常为20%~30%。由于菌液中含有水分，我们通常配置50%的甘油。配置方法：例如，要配置100ml的50%甘油，需加入50ml甘油和50ml超纯水。然后，将其放入灭菌锅，在121度下高压灭菌20分钟。 2️⃣ 保菌步骤准备工作：在超净台中准备好50%甘油、菌液、2ml离心管和2ml枪头，并全程打开酒精灯。混合：在2ml离心管中加入1ml菌液和1ml 50%甘油（1:1比例）。标记：保菌后，务必在离心管上写明菌液名称、抗性和保菌时间。保存：将保好的菌液放入-80度冰箱保存。 3️⃣ 菌液复苏复苏配方：在5ml LB培养基中加入抗性，再加入200ul保好的菌液，摇过夜即可复苏。

实验室常用缓冲液和培养基配方大全 ✅核酸电泳相关试剂和缓冲液配方 TAE MOPS 溴乙锭琼脂糖凝胶 Loading buffer ✅核酸蛋白质杂交相关试剂和杂交液配方 SSC SSPE 磷酸盐buffer Salmon DNA DNA变性缓冲液预杂交液、杂交液膜转移缓冲液 TBST buffer 封闭缓冲液 ✅实验室常用培养基配方 Ampicillin氨苄 IPTG LB培养基 TB培养基 SOB培养基 SOC培养基 YT培养基 NZCYM培养基 NZYM培养基 NZM培养基一般固体培养基

导师没教？必备培养基配方！ 𐟔 实验室里，有些培养基配方导师可能觉得你该知道，但实际没教给你。这里为你整理了一份必备培养基配方清单，收藏就是学会了！ 𐟓 配方清单： Ampicillin (100 mg/ml) IPTG (24 mg/ml) X-Gal (20 mg/ml) LB 培养基 LB/Amp 培养基 TB 培养基 TB/Amp 培养基 SOB 培养基 SOC 培养基 2㗙T 培养基 㗢roth NZCYM 培养基 NZYM 培养基 NZM 培养基一般固体培养基的配制 LB/Amp/X-Gal/IPTG 平板培养基 𐟏ž️ 实验室日常，科研探索，研究生和博士生的日常工作中，这些培养基配方都是必备知识。掌握这些配方，让你的实验更加得心应手！

𐟍𒌂肉汤培养基制作指南𐟧슰Ÿ”쌂培养基，全称Luria-Bertani Medium，是微生物学实验室的明星培养基！它特别适合培养大肠杆菌等常见菌种哦。 𐟥㥮ƒ的名字来源于lysogeny broth，意为“溶源肉汤”，最初是用来研究溶源性噬菌体与宿主的关系的。 𐟓配方来啦： - Tryptone（胰蛋白胨）10g/L，提供氮源和氨基酸。 - Yeast Extract（酵母膏）5g/L，提供氮源、维生素、生长因子和少量碳源。 - Sodium Chloride（氯化钠）10g/L，维持渗透压平衡和细胞稳定。 𐟒ጂ培养基可以做成液体或固体形式哦： - 液体LB培养基适合细菌大量扩增和表达外源基因。 - 固体LB培养基则是在液体基础上加了琼脂，用于菌落培养、筛选和计数。 𐟒‰想要筛选特定菌种？没问题！在LB培养基中加入抗生素如氨苄青霉素，就能筛选出携带抗性基因的转化子啦。加入伊红美蓝还能鉴定大肠杆菌等菌种呢！

如何配置LB固体培养基：详细步骤指南 𐟌𑠩…置LB固体培养基的步骤如下： 1️⃣ **准备材料**𐟓：所需材料包括胰蛋白胨（Tryptone）、酵母提取物（Yeast Extract）、氯化钠（NaCl）、琼脂粉（Agar）和无菌水。此外，还需要抗生素（如氨苄青霉素，Amp）用于筛选含有特定质粒的细菌。 2️⃣ **配制培养基**𐟔：通常的配方是每升培养基中加入10g胰蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠和15g琼脂粉。将这些成分混合在1000ml超纯水中，摇晃混匀。 3️⃣ **高压灭菌**𐟔导š尽快将配制好的培养基进行高压灭菌，通常在121℃下灭菌15-20分钟。 4️⃣ **冷却培养基**❄️ ：灭菌后，等待培养基冷却，以便在加入抗生素时不会因温度过高而使其失活。时间和条件允许时可以将培养基置于55-60℃的水浴中冷却，避免培养基提前凝固。 5️⃣ **加入抗生素**𐟒Š ：在培养基冷却到适当温度后，加入抗生素溶液，并充分混匀。常用抗生素：卡那霉素（Kan）50/mL；氨苄青霉素（Amp）100/mL。 6️⃣ **倒平板**𐟎›️：将混匀的培养基倒入无菌的培养皿中，一般每皿倒入10-15毫升。将平板盖好，放在超净台等待凝固。 7️⃣ **储存**𐟧Š：将凝固的平板存放于4℃，一个月内使用。 𐟓 注意事项： 𐟔젭 所有操作应在无菌条件下进行，以避免细菌污染。 𐟛᯸ - 琼脂平板的制备过程中，应确保培养基和操作环境的无菌性。 𐟒ᠭ 抗生素的加入应在培养基冷却到适宜温度后进行，以防止高温破坏抗生素的活性。 𐟌€ - 倒平板时，应确保培养基均匀分布在培养皿底部，避免气泡的产生。

烟草叶片Co-IP实验，一文搞定！嘿，大家好！今天我要和大家分享一下如何在烟草叶片中进行瞬时表达和免疫共沉淀（Co-IP）实验的详细步骤。这个实验流程真的是相当复杂，但只要按照步骤来，其实也没那么难。准备好了吗？Let's go！材料和试剂 𐟛’ 首先，你需要准备一些材料和试剂。以下是你需要的东西：烟草种子：选那种生长在22℃下四周龄左右的烟草。农杆菌菌株：已经转入双元载体的农杆菌，比如pCAMBIA1300、pBIN19等，靶基因带有蛋白标签，这里以3㗆LAG标签为例。乙酰丁香酮（Sigma-Aldrich，目录号：D134406）：诱导剂。 MES（pH5.6）（Sigma-Aldrich，目录号：M8250）：调节pH值。蛋白酶抑制剂（Roche，目录号：04693132001）：防止蛋白降解。 NP-40（Fluka，目录号：74385）：用于提取蛋白。诱导培养基：具体配方见图二。侵染培养液：具体配方见图三。提取缓冲液：和诱导培养基、侵染培养液一样。 TBS：和提取缓冲液一样。 4㗓DS：和提取缓冲液一样。设备 𐟔犦Ž夸‹来是需要的设备： Anti-FLAG珠（Sigma-Aldrich，目录号：A2220）：用于免疫沉淀。 3㗆LAG多肽（Sigma-Aldrich，目录号：F3290）：用于检测FLAG标签的蛋白。蛋白G琼脂糖珠（GE，目录号：17-0618-01）：用于免疫沉淀。农杆菌培养用的试管、摇床等。离心机。 1mL注射器。实验步骤 𐟓 好了，材料和设备都准备好了，接下来就是实验步骤啦！准备工作：首先，选生长在22℃（16h光照/8h黑暗）四周龄左右的烟草。将带有3㗆LAG标签的农杆菌菌株在3mL含有相应抗生素的LB液体培养基中28℃、200rpm过夜培养。诱导培养基准备：将LB培养基中的农杆菌接种到诱导培养基中（过夜培养物按1/100稀释，或者培养8h的培养物按1/25稀释）。可以在早上准备好后当晚进行侵染，或者在晚上准备好后第二天早上做侵染。农杆菌培养：28℃、200rpm培养8-12小时，使农杆菌细胞处于对数生长期，OD=0.6-0.8。离心：将农杆菌培养物在50mL离心管中以3200㗧的速度离心10分钟。侵染培养液准备：准备好侵染培养液，在5-10mL的侵染培养液中重悬农杆菌沉淀。重悬农杆菌：使农杆菌重悬液的OD=0.1-0.3，每片叶子准备1mL重悬液即可。如果你想表达两种及以上蛋白，将每种农杆菌调好OD后混合即可。对于不同的质粒，推荐先进行预实验，通过调节OD值来控制蛋白的表达量，例如用更高OD的农杆菌来表达低丰度蛋白，用更低OD的农杆菌来表达高丰度的蛋白。小结 𐟓 好了，这就是整个实验的详细流程啦！希望对大家有所帮助。免疫共沉淀实验虽然复杂，但只要按照步骤来，其实也没那么难。祝大家实验顺利！如果有任何问题，欢迎留言讨论哦！

𐟔젧 ”究生必备：高效配方大集合 𐟧ꊰŸŽ😥œ覉‹动配试剂？这些配方帮你轻松搞定！ 50X TAE DNA Gel Running Buffer 𐟌Š 242g Tris 37.2g Na2EDTA.2H20 加ddH20至800mL 57.1mL CH3COOH 用5M NaOH调pH至8.3 6X DNA loading sample buffer 𐟓报Š 40g sucrose至50mL ddH20中加入2mL 1% BPB solution 定容至100mL SDS Gel Running Buffer 𐟧슱0x 1L: 24.2g Tris Base 144.135g Glycine 10g SDS Transfer Buffer 𐟓‘ 10X 1L: 30.3g Tris Base 144.135g Glycine 用时取80mL稀释至800mL，加入200mL甲醇或乙醇（推荐乙醇，减少毒性） LB液体培养基 𐟌𞊸00mL: 8g Bacto-trypton 4g Bacto-yeast extract 8g NaCl 加ddH20至800mL 固体培养基：再加12g Bacto-Agar PBS Buffer 𐟒犱0X 1L: 80g NaCl 2g KCl 35.8g Na2HPO4.12H20 2.4g KH2PO4 PB Buffer 𐟌🊱X 1L: 58g Na2HPO4.12H20 5.9g Na2HPO4.2H20 TBST溶液 𐟧𔊸g NaCl 0.2g KCl 3g Tris-base 加800mL ddH20，用HCl调至pH7.4，定容至1L，加1mL吐温

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