rnai技术原理新上映_rnai的基本原理(2024年11月抢先看)
川大生物考研心得:从零到一的奋斗 ### 心得分享 生物化学: 知识点:生物化学这本书真的很重要!虽然每年的考题题型多样,但知识点是固定的。特别是生物化学反应、代谢路径图和原理,这些都是基础。你需要系统地串联这些知识点,所以自己总结和画图很重要。每天背一些名词解释也是个不错的选择。 扩展:每年都会有一些前沿知识,特别是和诺贝尔奖相关的内容,可以提前准备。如果没有提前准备,用书上的相关知识来回答也可以。 拔高:如果时间充裕,可以看看《分子生物学》。近几年实验和简答部分有一些延伸,比如RNAi、CRISPR-Cas9、双荧光素报告酶系统等技术原理。 资料推荐:《生物化学》第四版、《实用生物化学实验技术指导生物化学实验书》、《生物化学习题解析》。 普通生物学: 知识点:题型主要是选择、名词解释和问答。首先通读全书,对所有知识点有个整体概念。第二遍再梳理难点,总结真题中的名词解释和知识点归类。梳理时顺便整理名词解释,每天背一些。 扩展:考前最后两周,重点记忆常错的大题和名词解释。选择题中植物学占比挺大的,植物生物学也可以多看看。 相关资料:陈阅增《普通生物学》及其配套习题、林宏辉《植物生物学》、真题。 备考计划 我是八月份开始备考的,不过有的同学可能更早或更晚,甚至有九月开始的,这都没关系。重要的是每天的学习时间要保证。首先通读课本,标出重点或难点,然后逐个攻克,结合真题或习题巩固。 具体来说,在图书馆前3个小时用来看书或刷题,后一个小时用来复习之前的错题或啃一到两个难点。每天晚上用半小时回顾通路图或背几个名词解释。 心态调整 考研是一场一个人的战斗,但安排好自己的时间和日程很重要。不要听别人的进度,有人说看了几遍书了,可能一点都没学进去;有人可能才看完一遍,但已经很扎实了。每个人情况都不一样,相信自己。 小贴士 ኊ看书一定不要只重复看,要有系统的总结。特别是生物化学,要会串联知识点,不然太碎了。如果有本校的学长学姐可以问问,有同学之前就是报了一个校内专业课的辅导,效果蛮好的。如果自我监督略差或者梳理时有难度,也可以找学长学姐帮忙。 希望这些心得能帮到正在备考的你们!加油!ꀀ
一分钟搞懂基因过表达、敲低、敲除的区别 嘿,大家好!今天咱们来聊聊基因操作里的三个常见术语:过表达、敲低和敲除。别担心,只需要一分钟,你就能搞懂它们的区别啦! 基因过表达 基因过表达,简单来说,就是把一个基因插到一个表达载体里,然后把这个载体转染到目标细胞里。这样一来,细胞就会大量表达这个基因和它编码的蛋白质。常见的载体有哺乳动物载体(用于人、小鼠等哺乳动物细胞)、原核载体(用于大肠杆菌等原核生物)和慢病毒载体(比如HIV、FIV、SIV、EIA)。构建这些载体的方法包括设计目的基因片段和载体、连接元件(用酶切或gateway连接),然后通过病毒载体、电穿孔或转染试剂导入目标细胞。 基因敲低 基因敲低呢,主要是用抑制剂来抑制基因的表达。常见的方法有RNA干扰技术(RNAi)、CRISPR-Cas9技术和gene转染技术。比如,siRNA载体通过与目标mRNA互补结合序列,特异性地实现靶向mRNA降解。而CRISPR载体则包含CRISPR靶向序列和转录抑制子。构建这些载体的步骤包括设计干扰序列、合成和克隆、转化和筛选,最后通过病毒等途径导入目标细胞。 基因敲除 ✂️ 基因敲除则是用含有已知序列的小DNA片段与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,整合到受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术。常见的载体有CRISPR/Cas9载体和TALENs载体。CRISPR/Cas9载体通过Cas9核酸酶和sgRNA靶向序列精确定位并靶向基因DNA序列,然后引入双链断裂点,完成基因敲除。而TALENs载体则包含特异性核酸酶和nuclease binding domain,通过切割靶向基因DNA序列,完成敲除和编辑。构建这些载体的方法包括设计和选择靶点、载体插入、转化和验证,最后通过病毒载体、电穿孔等方法导入目标细胞。 总结 总的来说,基因过表达、敲低和敲除这三种技术在生物学研究中有着广泛的应用。了解它们的原理和构建方法,可以帮助你更好地设计和执行实验。希望这篇文章能让你在短时间内对它们有个清晰的认识!如果你有任何问题或需要进一步的解释,欢迎在评论区留言哦!
RNA干扰的技术原理和应用
当地时间10月7日,瑞典卡罗琳医学院宣布,将2024年诺贝尔生理学或医学奖授予科学家维克托ⷥ𘃧𝗦勒加里ⷩ𒁥䫦,表彰他们发现了微小RNA(microRNA)及其在转录后基因调控中的作用。两位获奖者将平分1100万瑞典克朗(约合863万元人民币)奖金。 10月7日,在瑞典斯德哥尔摩举行的2024年诺贝尔生理学或医学奖公布现场。(图源:新华社) 据悉,微小RNA是一类在基因调控中发挥关键作用的小型RNA分子。两位科学家的发现引入了一种新的基因调控原理,这对于多细胞生物至关重要,揭示了人类基因组编码超过一千种微小RNA。这一发现为理解生物体功能及其如何发育开辟了新的维度。 基因、RNA等学术名词离我们或许很遥远,但两位科学家的经历却吸引了不少人的兴趣。据了解,两位获奖者其实都算是“半路出家”,青年时期都不是研究基因领域的。 维克托ⷥ𘃧𝗦ﯼ图源:) 公开信息显示,维克托ⷥ𘃧𝗦磊于20世纪50年代的美国新罕布什尔州,从小受其父亲的影响,他喜爱阅读及动手制作一切他认为新奇的小玩意儿,因此长大之后,他想成为一名科学家。 20世纪60年代,美国阿波罗飞船登月成功,如同那个年代的很多年轻人一样,安布罗斯也想成为一名宇航员,直到1971年他进入麻省理工学院学习天文知识时,发现自己的物理算术能力一般。睡在他旁边的室友好几个晚上与他深夜讨论分子生物与基因组学,于是他把兴趣爱好又转移到了分子生物科学,继而在博士期间师从诺贝尔奖获得者戴维ⷥ𗴥𐔧摩,从事线虫相关的研究。 加里ⷩ𒁥䫦(图源:) 另一边,他的搭档鲁夫昆一开始也不是研究基因的。公开信息显示,鲁夫昆1952年出生于美国加州伯克利,父亲是土木工程师,母亲是家庭主妇,他们乐观开明,都很支持鲁夫肯对科学特别是空间科学方面的热情,并在他很小的时候给他买了望远镜和显微镜。 1973年,鲁夫昆从加州大学伯克利分校生物物理专业毕业,随后在俄勒冈州找到了一份工作。然后他又花了大约六个月的时间在南美各地旅行。 有一天,鲁夫昆偶然发现了一堆《美国科学杂志》。回忆当时的感受,鲁夫昆曾说道:“有时候,我会想念科学,所以我花了一天时间阅读那些杂志。”而当他看完这些杂志后,内心是如此地充实满足—— “哇,这太棒了。我想现在就回去。” 就这样,鲁夫昆回去后在加州大学旧金山分校担任核医学技术员,之后前往哈佛大学学习分子生物学。 1982年,鲁夫肯获得了哈佛大学博士学位,随后,1982年至1985年他在麻省理工学院做博士后研究,并于1985年成为麻省总医院和哈佛医学院的首席研究员,现为哈佛医学院的遗传学教授。 10月7日,在瑞典斯德哥尔摩举行的2024年诺贝尔生理学或医学奖公布现场。(图源:新华社) 1993年,安布罗斯和搭档鲁夫昆在Cell杂志上背靠背发表了他们对于lin-4(第一个miRNA)的研究成果。安布罗斯发现lin-4在线虫中存在(Lee et al., 1993),而鲁夫昆证实该miRNA通过与靶基因(lin-14)信使RNA结合抑制其翻译的调控机制(Wightman et al., 1993)。 安布罗斯的发现,开拓了科学家们对细胞内非编码RNA,也就是不参与编码蛋白质的RNA,生物学功能的认识。不过在当时,该研究成果并未被重视,直到2000年,第二个miRNA let-7被发现,人们终于开始意识到miRNA对基因调控具有普遍意义。 值得注意的是,2006年,诺贝尔生理或医学奖颁给了安德鲁ⷦ𐔥克雷格ⷦⅦᨥ蒎Ai领域作出的贡献。有学者认为,首次发现miRNA的安布罗斯理因应在诺贝尔奖的历史上留下名字,18年后,在诺贝尔奖的历史篇章中,这份遗憾终于被填补了
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