正超螺旋最新视觉报道_正超螺旋名词解释(2024年12月全程跟踪)
考研冲刺!DNA新知,政经突破 距离25考研仅剩129天,时间紧迫,任务艰巨! 上午时光:在科室里,我忙碌地填写首页,十点被预定为一个包皮手术帮忙,十二点又被预定一个药品推广活动。尽管如此,我还是抽空复习了小基因,虽然有些内容还不太熟悉,尤其是滚动的肺癌部分需要多加注意。上午的时间虽然效率不高,但至少没有浪费。 午餐时间:医院的职工吃饭总是很积极,十一点就已经有人在排队了。虽然我拖到十二点才吃饭,但下午的时间更加宝贵,我决定好好利用。 下午探索:带教老师说不用来,但我决定自己来,因为带教的班好像是24小时的。我帮写首页,有机会上手术,虽然工作不轻松,但能体谅我们的辛苦。 DNA合成的新认识:今天对DNA合成的理解有了新的突破。正超螺旋和负超螺旋的概念让我眼前一亮。简单来说,正超螺旋就像顺着拧毛巾,越来越紧,空间很挤,不容易解链;而负超螺旋则是反着来,方便解链。拓扑异构酶II从正变为负,让DNA变得松弛。这些新知识让我对DNA有了更深的理解。 第二节课:原核VS真核。理顺了原装的数据线,充电快,使用时间长。罗马数字酶VS希腊字母﹥22真核的D环复制VS噬菌体的滚环复制。端粒、细胞永生化、RNA+逆转录酶+协同蛋白,这些概念让我对生物学有了更全面的认识。 ᠥ作练习:练习了字,虽然老师讲得不多,但我还是觉得有必要。毕竟,字写得不好会压分。 政治学习:政治经济学让我对资本有了新的认识。资本果然不可取,不知道以后怎么发展。考研这条路也不容易。 阅读理解:最后做了一篇阅读,结尾部分让我对“intellect”和“intelligence”有了新的理解。虽然不认识这两个词,但写对了。果然,写对和读懂是两回事! ꠥ 油:时间紧迫,任务艰巨,但我会努力加油,争取在考研中取得好成绩。祝大家好运,身体健康,注意安全!
彗星实验:探索DNA损伤的神奇方法 彗星实验,听起来有点科幻,但其实它是一种非常实用的科研方法。由Ostling等于1984年首次提出,这个方法通过检测DNA链的损伤来评估遗传毒性。简单来说,它能够有效地告诉你细胞中的DNA是否受到了损伤,以及损伤的严重程度。 基本原理 当细胞受到各种内源性和外源性因素的攻击时,DNA链可能会断裂。这些断裂会破坏细胞的超螺旋结构,导致细胞膜、核膜等膜结构受损。在细胞裂解液的作用下,细胞内的蛋白质、RNA等成分会扩散到电解液中,而核DNA由于分子量太大,无法进入凝胶而留在原位。 在中性条件下,DNA片段可以进入凝胶并发生迁移。而在碱性电解质的作用下,DNA会解螺旋,损伤的DNA断链和片段会被释放出来。由于这些DNA的分子量小且碱变性为单链,所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极迁移,形成“彗星”状图像。未受损伤的DNA则保持球形。 实验方法 ꊊ现在市面上已经有较为成熟的彗星实验分析试剂盒,但你也可以自行配置梯度凝胶。实验的大致流程如下: 样品处理:培养细胞,诱导凋亡,然后消化细胞,用PBS洗2次,并制成单细胞悬液,细胞浓度为2X105个/ml。 制备第一层胶:取200ml 0.5%常温熔点胶(45C左右),加盖盖玻片,4C固化10min。 制备第二层胶:轻轻地去除盖玻片,取50 1%低熔点胶(37C)和50细胞悬液混匀后滴加在第一层胶上,加盖盖玻片,4C固化10min。 制备第三层胶:小心去除盖玻片;取75 0.5%低熔点胶(37C)滴加在第二层胶上,加盖盖玻片,4C固化10min。 裂解:裂解去掉盖玻片,将凝胶浸人预冷的碱性裂解液内(临用前加10%DMAO,1%Triton X-100),4C裂解1h。 漂洗:取出玻片,用PBS缓冲液漂洗3次后置于水平电泳槽内,加人碱性的电泳缓冲液(pH 10),没过玻片约2~3mm,放置20min。 电泳:以电压25V,电流300mA,电泳20min。 漂洗:取出玻片,用PBS(pH 7.5)漂洗后,置于中和液2次,每次15min。 染色:染色胶上滴加50 EB,加盖盖玻片,染色10min。 阅片:荧光显微镜下观察并拍照片。 通过这些步骤,你就能看到细胞的“彗星”图像,进而判断细胞的DNA损伤情况。这个方法不仅灵敏度高,而且操作相对简单,是科研工作中非常有用的工具。
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