活体成像最新视觉报道_活体成像荧光染料(2024年12月全程跟踪)
小动物活体成像技术:荧光素酶与体内发光 在生物学研究中,荧光素酶技术是一种强大的工具,它可以帮助我们可视化细胞和基因的活动。젥觚荧光素酶有两种:Luciferase 和 Renilla荧光素酶。它们的底物不同,前者使用D-luciferin,后者使用coelentarizine。两者的发光颜色也有所不同,Luciferase发出540-600nm的蓝光,而Renilla则发出460-540nm的绿光。Luciferase的光更容易穿透组织,而Renilla在体内的代谢速度较快。 能否通过组织切片观察到生物发光? 可以,但荧光素酶在体外的活性持续时间较短,大约只有几十分钟。 正常成体小鼠能否体内发光?是否需要裸鼠? 是的,成体小鼠和裸鼠、幼鼠及胚胎的区别主要在于对可见光的穿透性不同。成体小鼠的体内发光是可以观察到的,这正是这项技术的价值所在。可见光的穿透能力大约在3-4cm,因此大鼠也可以作为活体成像的动物,并且有很多关于大鼠的研究。 荧光素酶的发光强度与细胞数量是否成正比? 是的,荧光素酶的发光强度与标记的靶点数量,包括细胞、基因、细菌和病毒的数量成正比。密西根大学的Brian Ross在一篇文章中专门研究了这个问题,发现荧光素酶的发光强度与细胞数成正比关系,并且线性关系达到0.9以上。 荧光素酶发光的波长与体内穿透性的关系如何? 荧光素酶发出的光主要是偏红光,与绿色荧光蛋白(GFP)的绿光不同。荧光素酶的偏红光在体内的穿透性比绿光强近一百倍。因为光在哺乳动物组织内传播时会被散射和吸收,不同类型的细胞和组织吸收光子的特性并不一样。血红蛋白(hemoglobin)是造成体内可见光被吸收的主要因素,其在蓝绿光波段吸收大部分光子,但在红光波段吸收作用很小。因此,在偏红光区域,大量的光可以穿过组织和皮肤而被检测到。 𛀤用RFP而不是GFP来检测体内发光? 红光比绿光在体内的穿透性要强近一百倍。波长越长的荧光越容易透过组织,因此在条件允许的情况下,建议选择波长较长的荧光染料。
荧光蛋白07-可以做活体成像吗?哪种效果比较好?「汉恒生物」「科研」「荧光蛋白」#汉恒生物科技的微博视频
耶鲁大学医学院招募博士后/访问学者 耶鲁大学医学院的C实验室正在寻找一位充满活力的博士后或访问学者,专注于研究肺泡区组织再生的机制。我们的研究团队结合了全基因组组学、遗传小鼠模型、体内和体外活体成像、高级显微镜以及人类肺切片培养等多种技术,旨在发现基于上皮干细胞的肺部修复机制。 最新研究成果 我们开发了体内和体外完整肺组织的纵向延时成像技术,并发现肺泡干细胞在肺泡之间的迁移是修复所需的新细胞机制。目前,我们正在探索不同的信号和细胞-细胞相互作用如何调节这种机制,以及这些机制在疾病中的异常表现。 력责任 作为团队的一员,你将有机会学习到先进的成像技术、体内小鼠和人体组织平台、尖端的单细胞多组学方法、基于微流体的方法以及体内单细胞激光消融技术。你还将协助首席调查员进行研究,参与日常实验室操作,分析数据,准备手稿和演示文稿,并协助准备数字和文本以提交赠款。此外,还需要承担一些行政职责,如实验室安全、订购用品、设备维护以及数据库维护。 教育与资格 申请人应拥有或接近获得遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学或相关领域的博士学位。 验和能力 拥有鼠标遗传模型的实践经验 对肺上皮干细胞领域有浓厚兴趣 掌握基本的哺乳动物细胞/分子生物学技术 熟练应用2P和共聚焦显微镜 能够使用ImageJ、IMARIS等工具进行定量图像处理和分析 熟练使用R和Matlab等编程语言 在高影响力的科学期刊上发表研究结果,并出席国际会议 表现出高度的个人主动性和时间管理能力 能够有效地安排时间,以实现短期和长期目标 能够与他人合作,并具有出色的沟通技巧,能够保持准确和翔实的实验室笔记本,并创建和提供面对面的演示文稿。 我们期待你的加入,共同探索肺部修复的奥秘!
肺原位肿瘤模型构建的两种方法 在实验室中,我们成功建立了两种肺原位肿瘤模型,以下是详细的构建方法: 方法一:尾静脉注射接种肺转移模型 适用于小鼠黑色素瘤等易于观察的鼠源细胞,也适用于免疫相关的肺模型。 收集对数生长期的细胞,细胞液浓度应在5㗱0^5~1㗱0^6/ml之间。 ❄️ 操作过程中,细胞液应在冰上进行,以避免细胞聚球。 注射时,细胞液应缓慢推注,以减少肺栓塞的风险。 约一周后,模型即可形成。 ᠥ悦细胞中加入了LUC,可以通过活体成像进行观察。 本实验室的成功率超过90%。 方法二:胸腔原位注射接种模型 技术难度较高,对操作者的手法要求严格。 砩用于人源细胞裸鼠接种,也适用于鼠源细胞的大/小鼠模型。 收集对数生长期的肺肿瘤细胞,用2:1的N.S.:基质胶0℃液体制成细胞悬液,浓度不少于1㗱0^7/ml。 ꠥ,暴露胸腹部并固定于手术台上。 用微量注射器抽取制备好的细胞悬液,在小鼠仰卧位左侧4~5肋间穿刺接种。 穿刺深度以进入胸前后悬空感消失,略有阻力且轻微下压后有微微回弹感为宜。 推注完毕后,停留8~10秒,轻轻抽离注射器,并用消毒好的棉签轻轻按压注射位10秒。 将术后小鼠放入保温笼中复苏。 ᠥ悦细胞中加入了LUC,可以通过活体成像进行观察。 约7~10天后,模型即可形成。 本实验室的成功率在80~85%之间。 通过这两种方法,我们能够有效地构建鼠肺原位肿瘤模型,为肿瘤研究提供有力的支持。
《使用光片显微镜进行人类早期大脑类器官发育 的形态动力学研究》由于人脑类器官的尺寸较大,组织致密,发育缓慢,且在几周到几个月的发育过程中需要无菌成像条件,使得对人脑类器官的活体成像特别是长时间,面临巨大挑战。网页链接
「每日医题」「医学科普」T细胞杀伤肿瘤细胞,这个视频使用活体成像技术来观察小鼠T细胞杀死小鼠肿瘤细胞。总成像时间超过6小时,每20秒拍摄一张图片。每日医学资讯的微博视频
【Patterns 封面研究:类器官的深度学习网络】「CP封面」研究人员提出了一个创新的深度学习网络VONet,它能够利用极少量的共聚焦图像来重建类器官的三维结构。VONet的训练基于一个人工合成的虚拟类器官数据集,这个数据集包含了超过39,000个虚拟类器官。网页链接
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试剂 | 基础知识概述(部分): 英文名:Cyanine7 DBCO CAS:2253710-45-9 Molecular formula:C52H55ClN4O2 Molecular weight:803.49 规格标准:1mg、5mg、10mg 供应商:陕西新研博美生物科技有限公司 试剂 | 反应机理(部分): 反应活性:DBCO(二苯并环辛炔)部分具有良好的反应活性,可通过无铜点击化学(如应变促进的炔叠氮化物环加成反应,SPAAC)与叠氮化物结合,生成稳定的三唑结构 稳定性:在适当的储存条件下,Cyanine7 DBCO能够保持其荧光性能和反应活性。 生物体内活体成像:由于其近红外发射波长和较好的组织穿透性,Cyanine7 DBCO能够在生物体内实现深层组织成像,特别适用于活体小动物的成像研究等。 细胞内标记与成像:通过与带有Azide官能团的生物分子发生良好特异性的点击反应(叠氮化物反应),Cyanine7 DBCO可以在细胞内实现标记目标,用于研究细胞的结构、功能以及细胞内生物过程。 蛋白质标记与免疫染色:Cyanine7 DBCO可以与带有氨基官能团的蛋白质发生酰胺化反应,实现蛋白质的标记。它常用于免疫染色等蛋白质研究中,用于检测特定蛋白质的定位和表达水平。 生物传感与靶向标记:Cyanine7 DBCO还可以与特定的生物分子发生点击反应,实现生物分子的标记和传感,被应用于生物传感和靶向标记领域,用于检测生物分子的存在和变化。 试剂 | 细节注意(部分): 纯度标准95%+ 保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20Ⰳ 注意事项:仅用于科学研究
动物实验外包服务:从细胞到整体模型 动物实验外包服务涵盖多个方面,包括细胞功能实验、分子实验以及动物造模及病理切片等。以下是一些主要的实验类型和服务内容: 细胞功能实验 슧𛆨培养:在实验室条件下培养各种细胞,用于研究细胞生长、分化、凋亡等过程。 裸鼠皮下瘤:将肿瘤细胞注射到裸鼠皮下,观察肿瘤的形成和发展,评估抗肿瘤药物的效果。 小鼠皮下荷瘤:类似裸鼠皮下瘤,但使用普通小鼠,适用于更多类型的肿瘤研究。 克隆形成:通过克隆形成实验,研究细胞的增殖和分化能力。 划痕、迁移:观察细胞在受到外界刺激后的迁移和划痕愈合能力。 EDU、Tunel:检测细胞增殖和凋亡情况。 Transwell小室侵袭:评估细胞侵袭能力。 CCK8:用于细胞毒性测试。 免疫荧光:利用荧光标记的抗体检测细胞内的特定蛋白。 分子实验 슑PCR:实时荧光定量PCR,用于基因表达分析。 WB(蛋白):蛋白质印迹技术,用于检测特定蛋白的存在和表达水平。 动物造模及病理切片 튥觉馊术平台:提供SPF级大小鼠的饲养和动物实验研究,包括肿瘤类、心血管系统类、消化系统类、脑神经及行为学类、创伤感染类、骨科类、免疫系统类等多种疾病模型。 设备仪器:配备小动物活体成像仪、小动物核磁、Micro-CT、热成像仪等多种中大型动物实验仪器设备,确保动物实验的顺利进行。 微生物技术平台 微生物技术平台拥有资深技术团队,专注于抗菌相关实验,包括光催化抗菌、无菌检测、抑菌效果检测、菌种鉴定、菌株基因编辑等项目。 设备仪器:包括Avanti J-301超速离心机、显微CT、全自动脱水机、生物扫描电镜、生物透射电镜等高端设备,确保数据可靠。 通过这些服务,我们致力于为科研人员提供全面、专业的动物实验外包支持,助力科研项目的顺利进行。
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