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rubisco酶新上映_rubisco酶存在场所(2024年11月抢先看)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：导读更新日期：2024-11-26

rubisco酶

暗适应时间对叶绿素荧光测量的影响 𐟌🊥œ訿›行叶绿素荧光测量时，暗适应是一个关键步骤，通常与QA再氧化有关。然而，暗适应的过程相当复杂，许多因素会影响后续的荧光测量结果。在暗适应的叶片中，一些酶会失活，以防止不必要的反应。这些酶包括Rubisco和其他四种硫氧还蛋白依赖型酶（D-果糖1，6-二磷酸酶、磷酸核酮糖激酶、景天庚酮糖-1，7-二磷酸酶和ATP合酶），以及FNR。这些酶在光下处于激活状态，但在从明转暗后会逐渐失去活性。例如，在植物体内条件下，Rubisco失活的半衰期为2-4分钟；而FNR的失活程度因物种而异：豌豆叶片需要约15分钟才能完全失活，一些松树则需要1小时。一旦这些酶失活，它们必须先被再次激活，才能诱导稳定的光合作用，这会影响荧光诱导动力学过程。因此，暗适应的时间长度取决于我们想要获得的信息。如果我们的目标是研究调节和与光抑制相关的过程，那么15分钟的暗适应时间（至少对于豌豆等植物而言）足以让FNR再次失活。然而，如果你对叶片或其他光合生物对某种处理的长期适应反应感兴趣，那么可能需要更长的暗适应时间，以便让调节过程和光抑制等过程也能恢复。

内参孵育时间几小时在进行Western blot（WB）实验时，选择合适的内参蛋白至关重要。内参蛋白可以帮助校正样品之间的变异和负载量的差异，从而准确比较目标蛋白的表达水平。以下是一些选择内参蛋白的依据：样本来源和稳定性 𐟌🰟› 确定研究样本的来源（动物或植物）及其稳定性要求。根据样本来源选择合适的内参蛋白：动物样本 actin：广泛表达的内参蛋白，稳定性好。 GAPDH：糖酵解途径中的酶，稳定性好。 Tubulin：细胞骨架的主要组成部分，稳定性好。植物样本 Rubisco：光合作用中的关键酶，稳定性好。 Actin：植物中也存在，稳定性好。 GAPDH：在植物细胞中广泛表达，稳定性好。基本表达水平 𐟓Š𐟔⊩€‰择在所研究样品中基本表达水平稳定的蛋白作为内参。这些蛋白通常是细胞基本生理功能所必需的，如GAPDH、actin、Tubulin等。确保内参蛋白的表达水平在不同实验条件下保持稳定。细胞定位 𐟓𐟔 选择在所研究细胞类型中广泛表达且定位稳定的蛋白作为内参。这可以减少不同细胞类型之间的变异，并确保内参蛋白在不同细胞或组织中的表达水平相对稳定。与目标蛋白无关 𐟚밟Žᮤ🝩€‰择的内参蛋白与研究的目标蛋白无关，以避免相互干扰。选择与目标蛋白无关的蛋白作为内参，如GAPDH。验证内参蛋白 𐟔찟“ˆ 在选择内参蛋白之前，最好进行一些初步实验和验证。可以通过WB实验或其他方法检测内参蛋白的表达水平，并确保其在不同实验条件下保持稳定。文献支持 𐟓š𐟔 查阅文献了解其他研究中使用的内参蛋白和抗体，及其在特定研究领域的可靠性和稳定性。根据文献建议选择合适的内参抗体。通过以上步骤，你可以更好地选择适合你实验的内参蛋白，从而提高实验的准确性和可靠性。

cam植物在光合作用中，CO2的固定是卡尔文循环的第一步。在这个过程中，CO2与五碳分子RUBP（核酮糖-1,5-二磷酸）结合，生成3-磷酸甘油酸。催化这一反应的酶是Rubisco，也称为RuBP羧化酶。 Rubisco可能是生物界中催化效率最低的酶之一：一般的酶每秒能结合上千个底物分子，而它每秒只能结合大约3个底物。正因为如此，Rubisco占叶绿体蛋白质质量的50%，是地球上最丰富的蛋白质之一。认识到Rubisco与CO2亲和力很低这一事实非常重要。例如，Rubisco除了能与CO2结合催化C5羧化，还能与O2结合催化C5的氧化。因此，当O2浓度升高时，由于与CO2亲和力低，Rubisco会消耗O2进行光呼吸。 C3、C4、CAM植物在进化上的分化也是由于Rubisco与CO2亲和力低导致的。一般植物中，进入卡尔文循环的CO2被固定成3碳分子，这些植物被称为C3植物。处于炎热干燥条件下的植物，会关闭气孔以避免过多的水分流失。这导致叶子中CO2水平急剧下降，从而有利于光呼吸。为避免这种情况，部分植物会将CO2的吸收和固定安排在两个场所进行：先在叶肉细胞中吸收CO2，再将CO2“泵”入束鞘细胞进行固定。束鞘细胞被这些专门的叶肉细胞包围，不受空气影响，这为Rubisco提供了高浓度的CO2，从而大大减少了光呼吸。在这个过程中，由于CO2先被固定为C4分子，这样的植物也叫C4植物。C4植物按位置分离光合作用，而CAM植物在时间上分离光合作用。 CAM代表景天酸代谢。CAM光合作用在大多数沙漠环境中的肉质植物中普遍存在，包括仙人掌。CAM植物在晚上将CO2固定在一个4碳分子中，这时它们可以保持气孔开放而不会损失太多水分。4碳分子储存在叶肉细胞的大液泡中，直到第二天白天，4碳分子将CO2释放到同一个细胞内的卡尔文循环中。这同样为Rubisco提供了高浓度的CO2。可以说，从光呼吸到C4、CAM植物，这一系列结果追根到底都是由Rubisco与CO2的亲和力太低导致的。

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