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细胞核染色前沿信息_细胞核染色后什么颜色(2024年11月实时热点)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：教程更新日期：2024-11-28

细胞核染色

DAPI染色液推荐：哪家产品更适合你？ 𐟔 探索DAPI染色液的奥秘，为您的细胞染色需求找到最佳选择！DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐）是一种强大的蓝色荧光染料，能够与DNA中的A、T碱基结合，为细胞核染色提供卓越效果。 𐟒ᠤ𚆨磄API： DAPI染色液为即用型，可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm，与双链DNA结合后，最大激发波长变为364nm，最大发射波长为454nm。 DAPI的发射光为蓝色，与绿色荧光蛋白GFP或红色荧光染剂Texas Red的发射波长仅有少部分重叠，使得多重荧光染色成为可能。 𐟧ꠥꌦ�ꤧ🰯𜚊固定细胞或组织样品，适当洗涤去除固定剂。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量DAPI染色液覆盖样品；对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，并混匀。室温放置3-5分钟，吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。直接在荧光显微镜下观察或封片后观察，凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染或碎块状致密浓染。 𐟏… 选择最佳产品：在众多DAPI染色液品牌中，ZoFtic的CS301 10mL DAPI染色液以其卓越的染色效果和便利的使用方法脱颖而出。 𐟌Ÿ 细胞染色探针大全：细胞核荧光探针：DAPI、Hoechst 3342、PI、绿色活&死细胞核染料、红色活细胞核染料、EMA、EthD-I、SYTO 9Green、DRAQS、DRAQ7、Y啶橙细胞质荧光探针：CalceinAM、Calcein blue AM、BCECFAM、细胞质蓝色/绿色荧光探针、CFDA SE、CDCFDA SE、单溴二胺细胞膜荧光探针：DiO（绿色）、Dil（橙红色）、DID（红色）、DiR（紫红色）线粒体荧光探针：Orange CMTMRos（橙色）、Red CMXRos（红色）、MitoMaker Green、MitoSOXRed、罗丹明123、二氢罗丹明123、JC-1、JC10 溶酶体荧光探针：LysoView Blue、Green、Red荧光探针高尔基体荧光探针：NBD C6-Ceramide、BDP TR-Ceramide、GolgiTrackGreen 内质网荧光探针：DioC6(3)绿色细胞骨架荧光探针：ActinGreen488绿色、Red555红色氧敏感指示荧光探针：Tris(4,7-dipheny-1,10-phenanthroline)ruthenium(II) dichloride 离子探针：钙离子、氯离子、活性氧 𐟔 选择适合您的DAPI染色液，让您的细胞染色实验更加精准和高效！

𐟧쨋木精伊红染色法解析𐟔 𐟧你想了解苏木精伊红染色法吗？这是一种超酷的染色方法哦！ 𐟒᥎Ÿ理：苏木精（Hematoxylin）-伊红（Eosin）染色法，被大家亲切地称为HE染色法。这种染色法利用两种特殊的染料——碱性染料苏木素和酸性染料伊红，与细胞核和细胞质发生反应。𐟌ˆ通过这样的反应，细胞的微细结构会呈现出不同的颜色，从而在显微镜下形成清晰的细胞图像。 𐟧𞥮ž验用品：除了苏木精和伊红染液，你还需要准备固定液（如95%乙醇和冰丙酮）、稀盐酸乙醇溶液等。当然，还有培养瓶、盖玻片、载玻片等等，这些都是你的实验好帮手！𐟑 𐟔쥮ž验步骤： 1️⃣ 样品制备：从贴壁生长的细胞中获取样本，并调整细胞浓度至1㗱05/ml。然后，将细胞滴加到盖玻片上，培养一段时间后取出。 2️⃣ 样品固定：使用95%乙醇固定细胞20分钟，然后用PBS洗涤两次。 3️⃣ 染核：将细胞浸泡在苏木素染液中染色2-3分钟，然后用自来水洗涤。 4️⃣ 分色：如果细胞核染色过深，可以使用1%盐酸酒精溶液进行分色处理。 5️⃣ 染胞质：将细胞浸入伊红染液中染色1分钟，然后用自来水洗涤。 6️⃣ 封片：吹干或自然晾干细胞爬片后，使用中性树胶进行封片处理。 𐟎‰通过这一系列步骤，你可以清晰地观察到细胞的形态和结构哦！是不是超级神奇呢？✨

细胞HE染色全攻略：从原理到步骤 ### 一、实验原理 𐟌ˆ 苏木素-伊红染色法（HE染色法）是细胞学中最经典的染色方法之一。它利用两种染料——碱性染料苏木素和酸性染料伊红，分别与细胞核和细胞质发生化学反应，从而在光镜下清晰地呈现出细胞的微细结构。这个过程既有化学反应，也有物理作用。从化学反应来看，组织细胞内含有酸性物质和碱性物质。细胞的酸性物质与碱性染料的阳离子结合，而细胞核的碱性物质与酸性染料的阴离子结合。因此，酸性细胞核被碱性的苏木素染成蓝色，而碱性的胞浆被酸性染料伊红染成红色。从物理现象来看，主要有吸附和吸收之说。HE染色提供良好的核浆对比染色，是细胞化学染色最常用的一种方法。二、实验用品 𐟧ꊥ›𚥮š液：常用95%乙醇和冰丙酮苏木精染液：称取苏木精粉0.5g，铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中，然后取NaIO31g，水5ml，再加入甘油30ml和冰醋酸2ml，混合均匀，滤纸过滤，备用。伊红染液：称取0.5g水溶性伊红染液，溶于100ml蒸馏水中。稀盐酸乙醇溶液：用75%乙醇配制1%盐酸。系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。三、实验步骤 𐟔슦 𗥓制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1㗱05/ml，滴加于盖玻片上（置于6孔板中），培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可。

细胞骨架染色全攻略：从实验到结果细胞鬼笔环肽染色是一种非常重要的实验技术，用于观察和研究细胞骨架中微丝（主要由肌动蛋白组成）的分布。通过这种染色方法，研究者可以直观地了解细胞骨架的结构和动态变化，这对理解细胞的运动、形态维持和细胞分裂等过程至关重要。实验步骤详解样本准备：使用细胞爬片技术，在培养皿中让细胞贴壁生长，形成单层细胞。细胞固定：用PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞3次，每次5分钟，以去除培养基和其他杂质。然后，用4%多聚甲醛溶液室温固定细胞20分钟，这一步骤的目的是使细胞内的蛋白质保持其天然形态，防止在后续处理过程中发生变形或降解。清洗：再次用PBS清洗细胞3次，每次5分钟，以去除多聚甲醛残留。鬼笔环肽染色：取适量（如200）配置好的FITC（荧光素异硫氰酸酯）标记的鬼笔环肽工作液，覆盖在铺满细胞的爬片上。室温孵育30-60分钟，让鬼笔环肽充分结合到纤维状肌动蛋白上。再次清洗：用PBS清洗玻片3次，每次10分钟，以去除未结合的鬼笔环肽。细胞核染色：使用200 DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）染色液对细胞核进行染色，染色时间通常为10分钟。DAPI能够穿透细胞膜与细胞核中的DNA结合，发出蓝色荧光。最终清洗与封片：再次用PBS清洗3次，每次10分钟，以去除DAPI残留。吸去多余水分，加上荧光封片液，以防止荧光淬灭，并盖上盖玻片。观察与拍照：在荧光显微镜下观察染色结果，并拍摄照片。FITC标记的鬼笔环肽会发出绿色荧光，显示微丝在细胞中的分布；DAPI则发出蓝色荧光，标记细胞核的位置。染色示例通过细胞鬼笔环肽染色，研究者可以看到细胞骨架中微丝形成的网络结构，这些微丝在细胞内呈现出复杂的交织形态，对维持细胞形态、参与细胞运动等过程起着重要作用。同时，结合DAPI染色显示的细胞核位置，可以进一步分析微丝与细胞核之间的空间关系，为深入研究细胞骨架的功能提供重要线索。

DiO和DAPI染色时遇到的几个问题在进行DiO和DAPI染色时，我遇到了一些有趣的现象和疑问。首先，为什么在40x镜下观察时，DiO的荧光会迅速淬灭呢？𐟤”看着荧光逐渐消失，我不得不迅速调整焦距并拍照，以凸显其荧光。关于DiO染细胞膜的方法，我是先对活细胞进行染色（10umol/ml，15分钟），然后进行固定。在这个过程中，我没有进行通透处理。尽管如此，DAPI依然能够成功染色细胞核。然而，DAPI染出的细胞核效果有些出乎意料。𐟘𒦈‘发现DAPI和DiO的染色部分重叠，这让我有些困惑。为了减少这种重叠，我尝试通过调整对比度来解决。总的来说，这些染色实验中出现的现象和问题让我对荧光染色的复杂性和微妙性有了更深的理解。𐟔쥸Œ望这些经验能对其他研究者有所帮助。

𐟔짗…理学小课堂：HE染色法的奥秘𐟌ˆ 𐟌𑦊€术原理细胞核染色：苏木精是一种碱性天然染料，它能使细胞核着色。细胞核内的染色质主要由DNA组成，DNA的双螺旋结构中，磷酸基向外，使DNA带负电荷，呈酸性，容易与带正电荷的苏木精结合。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，因此细胞核被染成蓝色。细胞浆染色：细胞浆的主要成分是蛋白质，它是一种两性化合物。细胞浆的染色与pH值有关。当pH调到蛋白质的等电点（4.7-5.0）时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色。伊红Y是一种酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷结合，使细胞浆染色。细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织等被染成红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在HE染色中用0.5%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木精的醌型结构，使组织与色素分离而褪色。经苏木精染色后，必须用0.5%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。返蓝作用：分化之后，苏木精在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色，在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经0.5%盐酸乙醇分化后呈红色或粉红色，故分化之后，立即用水除去组织切片上的酸而终止分化，再用弱碱性水（0.2%氨水）使苏木精染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。 𐟔쥮ž验步骤脱蜡至水苏木素染色伊红染色脱水封片显微镜镜检

台盼蓝vs AO/PI，谁更胜一筹？细胞计数和状态判断是生物学研究中的重要环节，其中台盼蓝染色法和AO/PI染色法是两种常用的方法。以下是这两种方法的详细介绍： 𐟔 台盼蓝染色法台盼蓝：蓝灰色粉末，溶于水，微溶于乙醇，不溶于其他有机溶剂。它是一种细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，从而判断细胞是否存活。实验原理：活细胞胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使其无法进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。因此，细胞膜完整性丧失通常意味着细胞已经死亡。借助台盼蓝染色，可以快速区分活细胞和死细胞。染色浓度：一般成品试剂为0.4%的储存液，使用时需稀释10倍。优点：价格低廉。缺点：在PBMC分离过程中，红细胞可能残留，其大小与PBMC接近，台盼蓝法无法分辨红细胞与活的PBMC，可能导致浓度与活率差异；CHO细胞在培养过程中会产生细胞碎片和杂质，台盼蓝法无法准确区分。 𐟌ˆ AO/PI染色法 AO/PI：指吖啶橙（AO）和碘化丙啶（PI）的组合。吖啶橙（AO）：可以发出绿色荧光的DNA结合染料。碘化丙啶（PI）：可以发出红色荧光的DNA结合染料。染色原理：AO可以通过完整的细胞膜，嵌入所有细胞的细胞核，呈现绿色荧光；PI只能通过不完整的细胞膜，即死细胞的细胞膜，嵌入所有死细胞的细胞核，呈现红色荧光。当两种染料均存在于细胞核内时，在合适的AO、PI配比下，两种染料发生能量共振转移，死细胞在绿色通道下激发出红色荧光。染色浓度：一般都是买的成品试剂。优点：弥补了台盼蓝染色法的不足；由于AO和PI为DNA结合染料，可有效排除杂质以及红细胞的干扰，确保对样品进行准确计数。缺点：成品试剂的成本较台盼蓝高。通过以上介绍，可以看出台盼蓝染色法和AO/PI染色法各有优缺点，选择时需根据具体实验需求和条件来决定。

细胞凋亡和铁死亡的区别是什么？𐟤” 细胞凋亡和铁死亡是两种不同的细胞死亡方式，它们之间有一些关键区别。让我们一起来看看这些差异吧！发生机制 𐟌𑊧𛆨ƒž凋亡是一个基因调控的主动过程，通过一系列信号通路触发。而铁死亡则是一种铁依赖性的细胞死亡方式，主要由脂质过氧化驱动。它主要在二价铁离子或酯氧合酶的作用下，催化细胞膜上高表达的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化，从而诱导细胞死亡。此外，抗氧化体系谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达量降低也参与其中。形态学特征 𐟔 凋亡细胞的特征包括细胞皱缩，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞核染色质凝聚、边缘化，形成凋亡小体。而铁死亡则导致细胞线粒体变小，膜密度增高，嵴减少、消失，外膜破碎，但细胞核中的形态变化不明显。诱导因素 𐟌꯸ 细胞凋亡可以通过多种途径诱导，如外源性途径（配体与跨膜死亡受体结合）、内在途径（线粒体释放细胞色素c等）、内质网应激途径等。而铁死亡的诱导因素包括铁离子超载、某些小分子化合物（如erastin、RSL3等）、特定基因表达变化以及谷氨酰胺代谢异常等。生物化学特征 𐟧슥‡‹亡细胞的DNA会在特定核酸内切酶的作用下，被切割成有规律的片段。而铁死亡则表现为脂质过氧化增高、活性氧（ROS）升高以及一些特征基因发生变化。对机体的影响 𐟌Ÿ 细胞凋亡在正常生理情况下有助于维持细胞数量的平衡和组织器官的正常发育和功能稳定。而铁死亡与多种生理和病理过程相关，例如在肿瘤治疗方面具有潜在应用价值，其过度发生也可能与某些疾病的发生发展有关。这两种死亡方式在细胞死亡的调控网络中发挥着不同的作用，对它们的深入研究有助于更好地理解细胞生物学过程以及相关疾病的发生机制。

HE染色：揭秘细胞奥秘苏木精伊红染色法（HE染色）是一种广泛用于组织学和细胞学研究的技术。其原理基于不同细胞结构和染色剂的亲和力。苏木精染液呈碱性，能够与组织中的嗜碱性结构（如糖体、细胞核及细胞质中的核糖核酸）结合，形成蓝紫色的染色效果。而伊红染料则呈酸性，与组织的嗜酸性结构（如细胞内及细胞间的蛋白质）反应，产生粉红色的染色效果。在染色过程中，苏木精和伊红分别与组织和细胞的不同成分发生化学反应，通过化学键的结合使染料固定在特定位置上，从而实现对组织和细胞的染色。这种染色方法不仅使整个细胞组织的形态清晰可见，还有助于研究者更好地理解和分析细胞的内部结构和功能。

医学生必看！芯片避坑𐟚芰Ÿ” 在上海威奥公司购买了一张3400元的组织芯片，承诺的正式片完整性在90%以上，但实际收到的芯片中许多组织缺乏细胞核！甚至同一阵列的组织芯片染色结果相反！ 𐟧젨€师怀疑可能是染色不均的问题，因为使用的是徕卡bond全自动免疫组化染色机器，该机器有特定的染色边界和区域。上海威奥公司声称也使用徕卡机器，理应知道组织芯片应贴在徕卡识别的区域，但他们却随意贴在普通载玻片上。 𐟒砥Œ时，老师反馈他们的组织芯片经常出现漂片现象。更令人惊讶的是，售后服务竟然建议我们再买一张芯片！ 𐟚력Œ𛥭槔Ÿ们，购买组织芯片时请务必谨慎，避免重蹈覆辙！

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