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绿色荧光蛋白权威发布_绿色荧光蛋白发光原理(2024年11月精准访谈)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：观点更新日期：2024-11-28

绿色荧光蛋白

RALF1&FERONIA，如何促根？ 𐟌𑠥œ覤物生长过程中，根细胞的生长和分裂至关重要。近期，科学家们发现了一种名为RALF1和FERONIA的分子，它们在调节根细胞生长中起到了关键作用。 𐟔 实验结果显示，在稳态条件下，FER-GFP（绿色荧光蛋白标记的FERONIA）与细胞膜染色剂FM4-64共定位，表明FER-GFP在细胞膜上分布。此外，FER-GFP还与TGN标记蛋白VHA-a1-mRFP、Golgi标记蛋白MEMB12-mCherry以及晚期内质体标记蛋白ARA7-RFP共定位，这些结果暗示了FER-GFP在细胞内的动态分布。 𐟌🠥𝓦‹Ÿ南芥幼苗根部用BFA（一种囊泡运输抑制剂）和CHX（一种蛋白合成抑制剂）处理后，FER-GFP与FM4-64共定位于BFA聚合体中，这表明FER-GFP可能参与了囊泡运输的过程。同时，FER-GFP与TGN标记蛋白VHA-a1-mRFP在BFA聚合体中的共定位进一步支持了这一观点。 𐟌𑠨🛤𘀦�š„研究发现，在RALF1处理3小时后，FER-GFP与TGN标记蛋白VHA-a1-mRFP、高尔基标记蛋白MEMB12-mCherry以及晚期内质体标记蛋白ARA7-RFP的共定位发生了变化。这些结果提示我们，RALF1可能通过与FERONIA的相互作用，调节了细胞内囊泡运输和细胞生长。 𐟌🠦�䖯𜌐IN2-GFP（绿色荧光蛋白标记的PIN2）在RALF1处理后，其荧光在PM（质膜）上的分布发生了变化。处理后的PIN2-GFP内化到液泡中，这表明RALF1可能通过影响PIN2的定位和功能，进一步调节根细胞的生长。 𐟓… 这项研究发表在《Development》杂志上，为我们理解植物根细胞生长的分子机制提供了新的视角。未来的研究将进一步探讨RALF1与FERONIA的相互作用如何精确地调节植物根细胞的生长和分裂。

你见过会发光的鱼吗？科学家将水母的绿色荧光蛋白基因插入鲤鱼的DNA中，创造出了发光的鱼。

质粒构建时如何选择合适的蛋白标签？𐟤” 蛋白标签是一种在DNA体外重组技术中常用的工具，它们与目的蛋白融合表达，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。那么，在质粒构建时，我们应该如何选择合适的蛋白标签呢？以下是一些常用的蛋白标签及其应用场景： 6xHis标签 𐟐Ÿ 6xHis标签可以插入目的蛋白的C末端或N末端，主要用于重组蛋白的分离纯化。这种标签在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化时非常有用。常见的带有6XHis的载体有pET-28a(+)、pET-28b、pET-22b(+)、pcDNA3.1(+)_myc-hisA、pACYC-duet1等。 Flag标签蛋白 𐟚銆lag标签蛋白广泛应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等领域。常见的带有Flag标签的载体有pESC-His、pFLAG-CMV2、pENTR4-FLAG等。 C-Myc标签 𐟦 C-Myc标签是一个含11个氨基酸的小标签，这11个氨基酸作为抗原表位表达在不同的蛋白质框架中仍可识别其相应抗体。C-Myc标签已成功应用在Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中，可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。常见的载体有pCMV-MYC、pcDNA3.1(+)_myc-hisA、pCMV-RFP-C-Myc、pCMV-Myc等。 eGFP/eCFP/eYFP/mCherry标签 𐟌ˆ 这些标签分别是增强型绿色荧光蛋白、增强型黄绿色荧光蛋白、增强型黄绿色荧光蛋白和单体红色荧光蛋白，具有不同的激发波长发射波长，均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。常见的带有eGFP的载体有pEGFP-N1、pEGFP-C1、pcDNA3.1-EGFP、pIRES-EGFP等。 SUMO标签 𐟌€ SUMO标签蛋白是一种小分子泛素样修饰蛋白，研究发现SUMO可以作为重组蛋白表达的融合标签和分子伴侣，不但可以进一步提高融合蛋白的表达量，且具有抗蛋白酶水解以及促进靶蛋白正确折叠，提高重组蛋白可溶性等功能。SUMO标签也常用于和其他标签一起应用，作为特异酶切水解位点。常见的带有SUMO标签的载体有pET-SUMO、pET28a-SUMO等。在选择蛋白标签时，应根据实验的具体目的和需求来决定。希望这些信息能帮助你在质粒构建时做出最佳选择！

钱学森侄子钱永健拿下诺贝尔奖后直言: 我是美国科学家”。 2008年，钱永健因发现和研究改造了绿色荧光蛋白获得诺贝尔化学奖。当时美国华人，包括国内网友都很自豪，觉得这也是中国的骄傲，毕竟钱永健身上流淌得是中国人的血。然而，钱永健自己并不那么认为，面对记者的采访时他说了这样一段话：我是真正的美国科学家，我不认为一个人的血统，就能证明他的身份，我是一个正统的美国人。这段话传开后，舆论一片哗然，网友批判说：“虽然你接受的是美国教育，但别忘了你的祖先是中国人，而你的父亲还是钱学森的父亲供养出去的”学森的父亲供养出去的” 对于外界的微词，钱永健本人从不回应，甚至觉得这些批判和自己毫无关系。 #人物故事 #历史 #真实事件 #钱永健 #我要上热门#

英文名：Amino Phalloidin 中文名：氨基鬼笔环肽供应商：陕西新研博美生物科技规格：5mg，10mg，25mg 纯度：≥95% 溶解性：溶于水或部分有机溶剂稳定性：稳定性较好，但需注意避免频繁解冻，保持干燥、避光和避氧气的环境。氨基修饰的鬼笔环肽（Amino-phalloidin），生物活性类似于未标记的鬼笔环肽，但包含=氨基官能团，用于偶联反应。Amino Phalloidin是一种细胞生物学工具，属于毒素类小分子，能够高度特异性地与细胞内的肌动蛋白纤维（F-actin）结合，从而用于标记和可视化细胞骨架中的这些关键结构。在细胞生物学研究中，Amino Phalloidin通过荧光标记（如绿色荧光蛋白GFP或其他荧光染料）后，被广泛用于观察细胞形态变化、细胞运动、细胞骨架重排等过程，为理解细胞功能、细胞分化提供了重要的实验手段。其高亲和力和低细胞毒性使得Amino Phalloidin成为研究细胞骨架不可或缺的工具之一。

英文名称：FM4-64 中文名称：苯乙烯基染料 CAS号：162112-35-8 分子式：C30H45Br2N3 分子量：607.51 Emission (Em)：634 Excitation (Ex)：558 规格：5mg，10mg，25mg 纯度：≥95% 外观性状：灰色至深灰色固体稳定性：-20℃以下冰冻、干燥、避光。溶解条性：溶于水，溶于大部分有机溶液。注意事项：避免频繁解冻，现配现用，保持干燥，避光。生物染色： FM4-64能够选择性地用红色荧光对酵母菌液泡膜进行染色，广泛用于观察液泡细胞器形态和动力学。它还可以与质膜及内膜细胞器进行特异性结合并发出高强度荧光，是研究活体动物胞吞作用、胞吐作用、囊泡运输和细胞器组织的重要工具。膜穿透剂与荧光探针： FM4-64可以用作一种膜穿透剂，穿透细胞膜进入细胞内部，为研究细胞内运输、能量转换等过程提供便利。同时，它还可以作为膜电位荧光探针，用于观察和分析细胞膜的电位变化。研究应用：在植物和真菌细胞的研究中，FM4-64通常优于其他类似染料（如FM1-43），因为它具有更高的亮度、更大的对比度、更高的光稳定性，并且其红移发射便于与绿色荧光蛋白（GFP）同时使用。 FM4-64在体外实验中还显示负电荷脂质富集的特性，可能与局部磷脂合成有关。

基因功能研究中的报告基因技术全解析报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。通过将报告基因的编码序列与基因表达调节序列融合形成嵌合基因，或与其他目的基因融合，在调控序列的控制下进行表达，从而利用其表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。 𐟌Ÿ GFP报告基因绿色荧光蛋白（GFP）是一种存在于腔肠动物体内的生物发光蛋白，是目前应用最广泛的发光蛋白之一。GFP可作为报告基因用于检测基因表达或调控，或作为融合标签来检测蛋白质分子的定位、迁移、构象变化以及分子间的相互作用，或靶向标记某些细胞器。用395nm的紫外线和475nm的蓝光激发，GFP可在508nm处自行发射绿色荧光，无需辅助因子和底物。 𐟌Ÿ 荧光素酶报告基因系统荧光素酶的种类很多，其中应用较为广泛的是萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase，FLUC）和海肾荧光素酶（Renilla luciferase，RLUC）。 𐟌Ÿ GUS报告基因 GUS（葡萄糖醛酸酶）的组织化学法检测：这种酶与5-溴-4-氯-3-吲哚-葡萄糖苷酸（X-Gluc）一起孵育时，会将X-Gluc代谢为蓝色产物。 GUS的分光光度法检测：GUS能与底物4-甲基伞型酮-葡萄糖醛酸苷（MUG）反应并产生荧光物质4-甲基伞型酮（MU），MU的激发波长为365nm、发射波长为456nm，可由分光光度计或酶标仪测出。 𐟌Ÿ LacZ 基因 LacZ基因编码大肠杆菌水解酶半乳糖苷酶（galactosidase，gal），gal可将无色化合物X-gal切割成半乳糖和深蓝色物质5-溴-4-靛蓝，其作为报告系统被广泛应用于细菌、酵母、哺乳动物细胞中。蓝白斑筛选是一种利用此报告系统来筛选重组子的方法。使用可编码gal ‰‡段的菌株作为宿主，使用可编码gal ‰‡段的质粒作为空载，其多克隆位点（MCS）位于编码‚𝩓𞧚„区域内，因而当空载转入宿主菌中，‰‡段和‰‡段互补形成具有酶活性的gal，在加入X-gal的培养基上，菌斑呈蓝色，而由于目的基因的插入会破坏‰‡段，不能形成具有酶活性的gal，因而重组子呈现白色。

𐟧쨍祅‰蛋白图谱大揭秘！𐟔 𐟒ᨍ祅‰蛋白，你听说过吗？它可是生物学研究的一大神器哦！𐟔쩀š过荧光蛋白，我们可以像魔法一样观测到细胞的活动，标记表达蛋白，甚至进行深入的蛋白质组学实验。𐟧 𐟒š说到荧光蛋白，不得不提的就是绿色荧光蛋白GFP。这种神奇的蛋白质是在1962年由日本科学家下村修发现的，它像一颗绿色的宝石，在真核生物中熠熠生辉。 𐟒ᨀŒeGFP呢？它是增强型绿色荧光蛋白，比GFP更亮、更稳定！在真核表达系统中，eGFP的表达效率超高，让你的实验结果更加清晰、准确。 𐟒›还有eYFP和eCFP，它们分别是增强型黄绿色和青色荧光蛋白。它们的出现，让生物学研究更加丰富多彩，为科学家们提供了更多的研究手段和视角。 𐟚€现在，你是不是对荧光蛋白有了更深入的了解呢？这些荧光蛋白就像一个个小小的探针，帮助我们揭示了生物学的奥秘。如果你对质粒图谱解析感兴趣，不妨继续关注我们的系列教程哦！𐟌Ÿ

爱德华多ⷥᨌ诼š转基因艺术的先驱爱德华多ⷥᨌ诼ˆEduardo Kac）是一位将基因作为艺术媒介的先锋艺术家。他在1997年提出了“生物艺术”（Bio Art）一词，并试图定义一种全新的艺术形式。1998年，他又引入了“转基因艺术”（transgenic art）的概念。在这之后的三年里，他以每年创作一件新作品的速度，完成了“转基因三部曲”，其中最著名的作品是2000年的《绿色荧光蛋白兔》（GFP Bunny）。 2000年，在法国科学家的帮助下，一只名为“阿尔巴”的兔子诞生了。阿尔巴的体内被转入了绿色荧光蛋白，因此能在特定光段下发出绿色荧光。绿色荧光蛋白是一种由约238个氨基酸组成的蛋白质，最早提取于水母之中。艺术家希望将阿尔巴带回芝加哥的家中，与其共同生活，但出于某些考虑，阿尔巴所诞生的机构并没有实现这一要求。因此，卡茨开展了一系列公共介入活动，试图引起巴黎市民的关注并争取到阿尔巴的抚养权。他制作了一系列海报，七种海报上有七个法语词：艺术、媒体、科学、伦理（道德）、宗教、自然和家庭，分别指涉与此事件有关的各种元素。此事进一步引起媒体的广泛报道，并引发了关于阿尔巴作为转基因生物是否能被认为艺术、它的存在是否合法、人与神的关系是否在新的世纪需要被改写、基因操作的伦理问题、转基因生物是否能为自己争取权利等一系列讨论。卡茨还设置了一个网站，全球的网民都能实名或者匿名留下对于此事的看法。现在看来，这无异是一份对于2000年左右全球对于生物/艺术/伦理等问题看法的文献。这一作品在科学家帮助下得以实现，也成为了科学界的一个事件。 2008年，三位科学家——日本科学家下村修、美国科学家马丁ⷦŸ奰”菲和钱永健分享了当年的诺贝尔化学奖，得奖原因正是发现和改造了绿色荧光蛋白。在得奖致辞时，科学家将阿尔巴的图像作为案例与大家分享。在这里，一个奇妙的闭环得以完成：阿尔巴因为技术而出现，又成为了这一技术最为知名的图像符号而回到了技术本身所处的语境中。科学与艺术的关系，在这一个圆中，完成了相互消解、相互理解、相互成就的过程，从而形成一个复杂的沉淀，反映出来自人性、技术、社会等多种因素交织纠缠的过程，而阿尔巴的故事也在继续书写。

𐟐Ÿ✨ 荧光斗鱼：转基因之美 𐟤” 你是否听说过荧光斗鱼？这种貌似稀有的鱼类，其实是一种转基因的杰作哦！𐟘𐟌ˆ 早在1999年，新加坡国立大学的科学家们从水母中提取出了绿色荧光蛋白（GFP），并将其巧妙地注入到了斑马鱼体内。他们的初衷是希望创造出一种能在有毒环境中发光的鱼类，以监测水污染。𐟒犊𐟔젥Ž来，科学家们又进一步改良，通过添加来自海洋珊瑚的基因和黄橙色荧光基因，最终成功培育出了能发出红光的荧光斗鱼！𐟎‰ 𐟐 值得注意的是，虽然荧光斗鱼看起来非常迷人，但它们并非自然品种，而是完全经过基因改编的。这一过程类似于将水母的绿色荧光蛋白“移植”到了斗鱼的身上。𐟒‰ 𐟌𔠥œ観𐥛𝯼Œ当地对繁殖荧光斗鱼持抵制态度，因为这样做可能会对原生斗鱼生态系统造成基因污染。然而，在国内，由于泰斗是外来物种，因此繁殖荧光斗鱼并未受到类似限制。𐟚늊𐟌Ÿ 总的来说，荧光斗鱼不仅是一种美丽的观赏鱼，更是科学家们利用转基因技术创造出的奇迹。现在你对这种特殊的鱼类有了更深入的了解吧！✨

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