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流式细胞仪前沿信息_流式细胞仪国产排名前10厂家(2024年12月实时热点)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：教程更新日期：2024-12-01

流式细胞仪

流式细胞术实验全攻略：从准备到分析流式细胞技术是一种利用流式细胞仪进行单细胞定量分析和分选的方法。它结合了单克隆抗体、免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高科技手段，能够从单细胞水平区分异质性细胞群体。检测对象包括悬浮细胞、贴壁细胞、从实体组织分离的单细胞悬液以及其他生物颗粒。 𐟔 细胞表面染色步骤样本准备采集全血或组织（如脾、淋巴结、胸腺和骨髓），用细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）制成单细胞悬液。对于体外刺激的细胞，直接将刺激后的细胞悬浮在细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）中，然后进行下一步。加满细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS），300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。红细胞裂解如需裂解红细胞（如脾脏），将10x红细胞裂解液（ACK buffer）用去离子水稀释到1x，放置到室温。将细胞重悬于3mL的1x ACK buffer中，室温孵育2-3分钟。如不需要裂解红细胞，直接进入下一步。加入10mL细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）终止红细胞裂解，300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。重复洗涤一次，加满细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）至15mL，300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。细胞计数，用细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）将细胞制成1x107/mL悬液。将100细胞悬液加入2mL EP管中备用。封闭Fc受体封闭Fc受体能减少染色过程中的非特异性染色。在小鼠中，纯化的CD16/CD32单抗能和FcⅢ/Ⅱ结合，封闭非特异性染色，使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入0.5-1纯的抗小鼠CD16/32单克隆抗体，室温孵育10分钟。对于人和大鼠，可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化Ig或者相同来源血清进行阻断，或者用商业化的Fc受体阻断剂。细胞染色按照说明书的推荐用量加入荧光标记的抗体，混匀后置于4℃，避光孵育30分钟。加入适量细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）重悬细胞，300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。加入0.2 mL细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）重悬细胞，用流式细胞仪进行检测和分析。通过以上步骤，你可以有效地从单细胞水平区分异质性细胞群体，检测各种细胞类型。希望这篇攻略能帮助你顺利完成流式细胞术实验！

大型评选活动｜我最喜欢的品牌之国产流式细胞仪

线粒体膜电位检测实验全攻略线粒体是细胞中非常重要的细胞器，它们负责生成ATP，促进能量转换，还参与细胞凋亡。线粒体在呼吸过程中会产生一种电化学势能，这种势能储存在线粒体内膜上，形成线粒体膜电位（MMP）。正常的MMP是细胞正常生理功能的基础。实验流程： 1. 细胞染色悬浮细胞细胞铺板：在6孔板中，每孔用1mL培养基重悬100万细胞。根据细胞类型选择合适的密度进行铺板。设置阳性对照：用CCCP处理细胞，然后在细胞培养箱中37℃孵育5分钟。 JC-1染色：加入适量JC-1，在细胞培养箱中37℃孵育15分钟。离心：孵育结束后，400g 4℃离心3~4分钟，弃上清。洗涤：用1㗐BS洗涤2次，400g 4℃离心3~4分钟。结果检测：用500的PBS重悬细胞，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计或流式细胞仪分析（绿色荧光：Ex/Em=510/527nm；红色荧光：Ex/Em=585/590nm）。贴壁细胞若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞，可先对贴壁细胞进行消化、收集，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。若用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测：直接参考悬浮细胞实验步骤方法即可。注意事项： CCCP是一种线粒体电子传递链抑制剂，对人体有害，实验过程中一定要穿实验服并戴一次性手套操作，注意小心防护。 JC-1是光敏感性的，所有染色步骤的操作过程中避免强光接触；未用完的储存液，避光保存，并避免反复冻融。 JC-1染色完成后，应立即进行后续的结果分析，以减少各种可能的误差。通过这些步骤，你可以轻松检测线粒体膜电位，了解细胞能量转换的情况。

揭秘细胞凋亡！Annexin V染色 𐟔 细胞凋亡的早期，细胞膜表面会出现破损，导致磷脂腺丝氨酸（PS）从细胞内膜翻转到外膜。这一过程发生在DNA片段化之前，因此检测PS的表达可以反映早期的细胞凋亡。 𐟒᠁nnexin V是一种相对分子质量为35,000的CaⲢ𚤾赖性磷脂结合蛋白，对PS有很高的亲和力。它能够与暴露在细胞外的PS结合，从而标记出早期凋亡的细胞。 𐟌ˆ 通常，Annexin V被标记上荧光染料FITC，而碘化丙啶（PI）则用于区分凋亡和坏死细胞。PI的膜通透性较差，因此只能标记坏死的细胞。 𐟓Š 在流式细胞仪的检测结果中，Annexin V-FITC（+）和PI（-）的细胞为凋亡细胞，而Annexin V-FITC（+）和PI（+）的细胞则为坏死细胞。 𐟔젩€š过这种染色方法，科学家们能够精确地监测和区分细胞的凋亡和坏死状态，为研究细胞生物学和疾病机制提供了有力工具。

流式细胞术：单细胞分析的利器 𐟌€ 流式细胞术（Flow Cytometry）是一种强大的技术，它利用激光和荧光检测器来快速、多参数、定量地分析单个细胞。简单来说，就是让细胞在流动状态下通过激光检测器，从而获取关于细胞的各种信息。流式细胞仪的组成和工作原理 𐟔슦𖲦𕁧𓻧𛟯𜚨🙤𘪧𓻧𛟦供动力，让单个细胞在鞘液的包裹下流动，并通过激光检测器。光学系统：细胞结合荧光染料后，经过激光激发，产生散射光信号和荧光信号。电子系统：将光学信号转换为电子信号，进行后续分析。散射光信号：主要有前向角散射光（FSC）和侧向角散射光（SSC）。FSC表示细胞的相对大小，而SSC则反映细胞的颗粒度，比如细胞器多少和细胞表面粗糙程度。荧光信号：通过荧光标记的单克隆抗体对样本进行染色，荧光信号可以反映抗原的表达量。表达量越高，结合的荧光素偶联抗体越多，荧光信号就越强。多色流式细胞术的荧光染料搭配原则及注意事项 𐟌ˆ 选择最亮的荧光染料：根据机器配置选择亮度最高的染料。平衡抗原表达量和染料荧光强度：确保抗原表达量和染料荧光强度之间的平衡。减少光谱重叠：让荧光染料的光谱重叠达到最小，减少信号干扰。保持细胞活性和状态：流式细胞仪不仅能检测细胞表面的荧光，还能探测细胞内的荧光。因此，检测细胞表面的分子时，要保证细胞的活性，并尽可能保持细胞静止。避免串联染料带来的假阳性：串联荧光染料会产生非放射性的能量转移，导致荧光淬灭和敏化。合理选择染料可以减少这种干扰。流式细胞术不仅在基础研究中广泛应用，还在临床诊断、药物研发等方面发挥重要作用。掌握这项技术的基本原理和操作技巧，将有助于更好地理解和应用这项强大的工具。

活性氧ROS检测：荧光探针法详解 𐟌ˆ 活性氧（ROS）是细胞内产生的一类具有氧化活性的物质，包括过氧化氢和超氧阴离子等。在正常生理条件下，ROS会产生，但当其产生过多或清除不足时，会对细胞造成氧化应激，可能导致细胞损伤和疾病。 𐟔 检测原理 DCFH-DA荧光探针法是目前广泛用于检测细胞内ROS的方法。DCFH-DA（二氯荧光黄双乙酸盐）是一种可指示的探针，本身不具有荧光，但可以自由穿过细胞膜。一旦进入细胞，它会被细胞内的酯酶水解成DCFH。由于DCFH无法穿过细胞膜，因此荧光探针会在细胞内积聚。细胞内的ROS能够氧化无荧光的DCFH，生成有荧光的DCF，且荧光强度与ROS水平成正比。通过荧光显微镜、流式细胞仪或激光共聚焦显微镜等设备，在最大激发波长480nm和最大发射波长525nm下检测荧光信号。 𐟓 检测步骤使用DCFH-DA荧光探针法检测ROS的具体步骤如下：将DCFH-DA探针加入到细胞培养基中，使其自由穿过细胞膜。在指定时间后，用荧光显微镜、流式细胞仪或激光共聚焦显微镜等设备检测细胞的荧光信号。通过分析荧光信号的强度，可以确定细胞内ROS的水平。通过以上步骤，可以有效地检测细胞内ROS的水平，从而评估细胞的氧化应激状态。

如何在BD流式细胞仪上自动调补偿 𐟌ˆ 流式细胞仪的自动补偿功能对于新手和需要检测多种颜色的实验来说，简直是救星！虽然机器的补偿结果还需要我们检查和微调，但比起从零开始调，这方便太多了。𐟘… 准备工作 𐟓‹ 首先，你需要准备几样东西：未染色的管（unstained tube）、单阳管（single-positive tube）和实验管（experimental tube）。细胞密度要在10^5到10^6cells/ml之间，体积大概是200到300ul。开始实验 𐟚€ 新建一个实验，在Cytometer下选择荧光通道，然后在Worksheet下画图。接下来，上实验管，调整FSC和SSC以及所有荧光通道的电压，确保目标细胞在图中间且被圈对，阴性细胞数量在10^3以下，阳性细胞在10^3到10^5之间。创建补偿控制 𐟔犩€‰中实验，右击，选择Compensation Setup，然后创建补偿控制（create compensation controls）。勾选“include separate unstained control tube”，检查一下单阳管和荧光通道是否对应，然后点击OK。记录补偿控制 𐟓 打开Compensation Controls窗口，挨个上样并记录。计算补偿 𐟧†次选中实验，右击，选择Compensation Setup，然后选择Calculate Compensation，最后链接并保存。完成设置 𐟌Ÿ 这个时候，实验里就已经有补偿了。在Worksheet中点击Global Worksheets，它就会回到我们实时的数据中。小贴士 𐟒ከ™𝧄𖨇ꥊ訡奁🥊Ÿ能很方便，但有时候还是需要手动微调一下，特别是对于复杂的实验。所以，别忘了检查和调整哦！希望这些步骤能帮到你，让你的流式细胞仪实验更加顺利！𐟚€

北京共享实验室上线，助力医健企业创新发展 𐟓⠥Œ—京的医疗健康企业注意啦！海淀区最新推出的共享实验室，为创新者提供了一个低成本、高效率的科研环境。这里配备了化学分子实验室和细胞实验室，满足各种实验需求。 𐟔젥ꌥ–𝩽全，包括超纯水仪、水浴锅、PCR仪、QPCR仪等，还有生物安全柜、超声清洗机、酶标仪、化学发光成像仪等高端设备。 𐟌᯸ 实验室还提供了CO2培养箱、通风橱、离心机、PH计、倒置显微镜等，甚至还有温控储藏间和超微量紫外分光光度计等精密仪器。 𐟚€ 此外，实验室还支持多种气体供应，如CO2、N2、O2等，以及混匀仪、鼓风干燥箱、流式细胞仪等设备，满足不同实验需求。 𐟒ᠥˆ駔訿™些共享资源，企业可以大大降低创业成本，专注于研发和创新。快来体验一下吧！

SCI实验仪器英文名称大全，快来学习吧！在日常实验中，我们使用的仪器通常显示中文名称，但在阅读外文文献时，却只能看到它们的英文名称。如果你能熟悉这些仪器的英文表达，阅读和理解文献将变得更加容易。今天我们来学习一些常见实验仪器的中英文名称吧！ ♦️ 通风柜：Fume hood ♦️ 冷冻干燥机：Freeze dryer ♦️ 流式细胞仪：Flow cytometer ♦️ 低温恒温器：Cryostat ♦️ 质谱仪：Mass spectrometer ♦️ 测序仪：Sequencer ♦️ 酶标仪：Microplate reader ♦️ 高通量进样器：High throughput sampler ♦️ 免疫分析仪：Immunoassay analyzer 掌握这些仪器的英文名称，不仅能帮助你更好地理解文献，还能在国际学术交流中更加自信。加油吧！𐟒ꀀ

英文名称：APF，Aminophenyl Fluorescein 中文名称：氨基苯基荧光素 CAS号：359010-70-1 分子式：C26H17NO5 分子量：423.42 规格：5mg，10mg，25mg 纯度：≥95% 外观性状：无色至淡黄色液体稳定性：-20℃以下冰冻、干燥、避光。溶解条性：溶于部分有机溶液。注意事项：避免频繁解冻，现配现用，保持干燥，避光。 APF是一种荧光探针，具有选择性和剂量依赖性地检测活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）中某些物种的能力，它高度抗自氧化，能够在复杂的生物环境中保持稳定性。APF本身无荧光，但与羟基自由基、过氧亚硝基阴离子或次氯酸阴离子等活性氧物质反应后，会产生强绿色荧光（激发波长/发射波长约为490/515nm）。APF可用于荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪等仪器，对细胞或组织中的活性氧进行实时成像和检测。

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