高效液相色谱权威发布_高效液相色谱检测(2024年12月精准访谈)
丙酮酸高效液相色谱检测全攻略 丙酮酸,这个听起来有点化学的名词,其实是生物细胞糖代谢的关键中间体。它是一种酸性较弱的有机酸,分子结构是CH3COCOOH,含有活化酮和羧基基团。你可能不知道,丙酮酸在化学、制药、食品、农业、生物等领域都有应用哦! 丙酮酸在糖代谢中可是个大忙人,通过乙酰CoA和三羧酸循环,它能把糖、脂肪、氨基酸互相转化。丙酮酸是糖酵解途径的最终产物,可以在细胞浆中还原为乳酸供能,或者进入线粒体氧化成乙酰CoA,再进入三羧酸循环,最终氧化成二氧化碳和水,完成葡萄糖的有氧代谢。它还能和氮化物、醛、卤化物、磷化物等反应,参与生物体的糖代谢,以及胶质、氨基酸、蛋白质等的合成和代谢。 要检测样本中的丙酮酸含量,最常用的方法是高效液相色谱(HPLC)。整个过程包括样品制备、色谱条件设置、标准曲线建立、样品测定和计算几个步骤。 样品准备 ꊩ斥 ,你得根据实验需要选择合适的生物样本,比如细胞提取物、组织匀浆或者体液等。然后对样本进行必要的预处理,比如离心、过滤或者稀释,目的是去除杂质并调整样本浓度。 色谱条件优化 在选择色谱柱时,要考虑丙酮酸的极性和分子量,选个适合的色谱柱类型。同时,优化流动相组成和流速,以获得最佳的分离效果和检测灵敏度。比如,可以用氨基柱,柱温30℃,乙腈-磷酸二氢钾(梯度洗脱)为流动相,流速1.0ml/min,紫外检测器,波长210nm等。 建立标准曲线 这一步很关键!用纯丙酮酸制备一系列不同浓度的标准溶液,通过高效液相色谱仪测定各标准溶液的峰面积或峰高。以丙酮酸浓度为横坐标,峰面积或峰高为纵坐标,绘制标准曲线。确保标准曲线具有良好的线性关系,以便后续样品中丙酮酸含量的准确计算。具体操作是准确称取丙酮酸标准品,按要求的溶剂配制5,10,20,50,100,200ug/ml的标准溶液,根据测定的色谱峰面积,对应浓度,制作标准曲线,并计算回归方程和回收率。 样品测定和计算 后一步,把预处理好的样品注入高效液相色谱仪中,记录丙酮酸的色谱峰。根据标准曲线和样品中丙酮酸的色谱峰面积,计算样品中丙酮酸的含量。 通过这些步骤,你就能准确检测出样本中的丙酮酸含量啦!是不是觉得化学也没那么枯燥呢?
高效液相色谱在科研中的高效应用 在科研领域,高效液相色谱(HPLC)是一种广泛使用的分析技术,尤其在药物、食品、环境等领域的检测中发挥着重要作用。𑰟𗊊 常见的HPLC色谱鬼峰包括: 微小的波浪状峰。 向下的负峰或倒峰。 峰的尾部始终牵着一个小峰。 拖尾峰。 前沿峰。 出峰后,基线下移,向右下方走。 젦〦ṧ多个领域,如植物激素、多酚、黄酮类化合物、氨基酸、维生素、有机酸、脂肪酸、中药材成分、植物色素、糖代谢、生物碱、皂苷等。在科研服务中,HPLC技术提供了精确的定量和定性分析,为科研人员提供了有力的支持。찟
高效液相色谱(HPLC)原理与类型详解 高效液相色谱(HPLC)是一种基于液相色谱法原理的分析技术,通过液相与固相间的相互作用来分离和分析混合物中的化合物。它利用样品在流动相中的溶解度、吸附性、分配系数等性质进行分离,并通过检测分离后的成分来定量分析。 𑠥쥎理 HPLC利用高压下的液体作为流动相,通过颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术,实现对混合物中各组分的分离。这种方法高效、快速,适用于各种复杂样品的分离和分析。 类型 HPLC有多种类型,适用于不同类型的化合物: 正相高效液相色谱:固定相是极性的,流动相是非极性的,适用于亲水性化合物。 反相高效液相色谱:固定相是非极性的,流动相是极性的,适用于疏水性化合物。 离子交换色谱法:固定相含有离子基团,流动相为缓冲液,用于分离阴离子和阳离子。 体积排阻色谱法:根据分子大小分离,适用于大分子分析。 亲和层析:利用特异性结合,用于生物大分子纯化。 亲水作用色谱法:固定相极性但亲水,适用于极性化合物。 手性色谱法:用于对映体分离,特别在医药领域重要。 超临界流体色谱:使用超临界二氧化碳作为流动相,适用于非极性和中等极性化合物。 优点与缺点 优点: 分离效率高 选择性好 检测灵敏度高 操作自动化 应用范围广 缺点: 分析成本高 仪器价格及日常维护费用贵 分析时间一般比气相色谱长 HPLC是一种高效、快速的分析技术,广泛应用于各种化学和生物样品的分析。通过不同类型的色谱柱和检测方法,可以实现对复杂样品的精确分离和定量分析。
高效液相色谱柱品牌大比拼,你用过哪家? 在高效液相色谱分析中,选择合适的色谱柱至关重要。以下是一些常见的进口和国产高效液相色谱柱品牌,供大家参考: 进口品牌 Waters沃特世 (美国,1958年):历史悠久,技术成熟。 Agilent安捷伦 (美国,1999年):在学术和工业界广泛应用。 Thermofisher赛默飞世尔 (美国,1956年):提供多种选择。 SHIMADZU岛津 (日本,1875年):以高稳定性和可靠性著称。 HITACHI日立高新 (日本,1910年):提供多种色谱柱类型。 PerkinElmer铂金埃尔默 (美国,1937年):在化学分析领域有深厚的底蕴。 Metrohm瑞士万通:提供高精度的色谱柱。 TOSOH日本东曹:以高质量和高效能著称。 Amersham安玛西亚 (美国):在生物化学分析中有广泛应用。 Restek瑞斯泰克 (美国):提供多种色谱柱选择。 Supelco默克 (德国):在化学分析领域有广泛的应用。 国产品牌 谟𓊦旭 (上海,2003年):在学术和工业界广泛应用。 恒谱生 (深圳,2019年):提供多种色谱柱类型。 依利特 (大连,2000年):以高稳定性和可靠性著称。 迪马 (北京,1993年):提供多种色谱柱选择。 伍丰仪器 (上海,1998年):在化学分析领域有深厚的基础。 诺析 (上海,2017年):提供高质量的色谱柱。 中科安泰 (兰州,2002年):在生物化学分析中有广泛应用。 选择合适的色谱柱不仅能提高分析效率,还能保证数据的准确性。希望这些信息能帮助你做出更好的选择!
#上百度遇见科学#牛磺酸含量测定:科普小课堂 1. 了解牛磺酸:牛磺酸是一种天然氨基酸,对维持人体健康有重要作用。 2. 测定意义:合理控制食品中牛磺酸含量,有助于保障食品安全和消费者健康。 3. 测定方法:通过专业实验室检测,采用高效液相色谱法等先进技术,确保结果准确可靠。 选择优质食品,牛磺酸含量,让我们共同守护健康。点赞,获取更多科普知识!
《高效液相色谱法检测半胱氨酸含量检测》半胱氨酸是一种含硫的非必需氨基酸,在生物体内扮演着多重关键角色。网页链接
HPLC压力低?5步解决! ✨高效液相色谱(HPLC)压力不足?别担心,这里有一份专业的排查指南! 在HPLC分析中,压力低比压力高更让人头疼。今天,我们将一步步教你如何排查问题,让HPLC重新恢复正常!ꊊ1️⃣ 检查泵与排空阀 确保泵已正确启动,并设置了适当的泵流速。 检查排空阀是否关闭,如果未关闭,压力自然会降低。 2️⃣ 寻找漏液源头 抩个检查接头是否拧紧,不要放过任何一个细节。 检查密封圈是否老化,及时更换。 3️⃣ 检查流动相与管路 犧ᮨ瓶中是否有足够的流动相,及时补充。 检查管路中是否有小气泡,排气确保流动相畅通无阻。 如果过滤头堵塞,及时清洗或更换。 4️⃣ 调整流速 检查流速设置是否正确,调整到合适的流速,压力问题可能会得到解决。 5️⃣ 更换色谱柱 슧ᮨ𑧚选择是否正确,不合适或老化的色谱柱会影响压力。 如果确认是色谱柱问题,果断更换。 经过这些步骤的排查和调整,HPLC的压力问题应该能够得到解决。实验中遇到问题不要慌,一步步来总能找到解决办法!ꊊ[星]生活小记 昨天买到了老面馒头,特意炒了肉抹菜,一口气吃了两个馒头,想着带中午吃。结果到了中午才发现菜带了,馒头没带。下午吃了半袋饼干总算不饿了。 最近天气好奇怪,工作日都是大太阳,一到周末就下雨篸。真想去晒晒太阳啊。 祝你今天也是快乐的一天!
高效液相色谱仪出峰时间变化原因探讨 在使用高效液相色谱仪进行样品分析时,发现同一个样品在不同时间段的出峰时间发生了变化,这可能是由于多种原因导致的。首先,可能是由于仪器本身的稳定性问题,尽管这种可能性较小,因为仪器通常在长时间运行后仍能保持相对稳定。其次,样品处理过程中可能存在差异,例如样品浓度、溶剂选择或色谱柱条件的变化,这些都可能影响出峰时间。此外,实验环境的变化,如温度、湿度或气压的波动,也可能对出峰时间产生影响。最后,如果之前有冻存样品,解冻过程中可能存在样品不均匀或溶剂交换不完全的问题,这也可能导致出峰时间的变化。 在这种情况下,建议首先检查仪器设置和样品处理流程,确保所有条件与之前一致。如果问题依旧存在,可能需要进一步检查仪器性能或考虑实验环境的影响。通过这些步骤,可以更准确地确定出峰时间变化的原因,并采取相应的措施来解决问题。
高效液相色谱法计算含量:外标法详解 在高效液相色谱法中,外标法是一种常用的定量方法。下面我们将详细讲解如何通过外标法计算样品中的含量。 供试品与对照品进样体积相同的情况 1️⃣ 对照品溶液的配制 首先,精密称取对照品B 10.25mg(已知含量为99.5%),然后将其置于100ml的量瓶中,用流动相稀释至刻度,得到对照品溶液。 2️⃣ 供试品溶液的配制 对于供试品,假设其B的标示量为20mg/ml。精密移取该产品0.5ml,并将其置于100ml的量瓶中,用流动相稀释至刻度,得到供试品溶液。 3️⃣ 进样与测量 精密吸取对照品和供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪中。测得对照品峰面积为1540,供试品峰面积为1500。 4️⃣ 含量计算 根据峰面积比例,可以计算出供试品中B的含量。具体计算公式为:含量 = (供试品峰面积 / 对照品峰面积) 对照品含量 标示量。 供试品与对照品进样体积不同的情况 1️⃣ 对照品溶液的配制 同样,精密称取对照品B 10.25mg,置于100ml的量瓶中,用流动相稀释至刻度。 2️⃣ 供试品溶液的配制 精密吸取对照品溶液10ul、供试品溶液20ul,注入液相色谱仪中。测得对照品峰面积为1540,供试品峰面积为1500。 3️⃣ 含量计算 在这种情况下,需要根据进样体积的比例来计算含量。具体计算公式为:含量 = (供试品峰面积 / 对照品峰面积) (对照品进样体积 / 供试品进样体积) 对照品含量 标示量。 通过以上步骤,我们就可以准确地计算出样品中B的含量。希望这些信息对您有所帮助!
药学专业必看!常见英文缩写大集合 这周上三天班,感觉时间过得飞快,转眼间又到了周五。今天给大家整理了一些药学药企常见的英文缩写,帮你告别工作中的哑谜,看看有没有你之前不知道的吧! 质量管理相关[握手R] QC(Quality Control):质量控制 QA(Quality Assurance):质量保证 GMP(Good Manufacturing Practice):药品生产质量管理规范 GLP(Good Laboratory Practice):药物非临床研究质量管理规范 分析方法相关[加油R] HPLC(High Performance Liquid Chromatography):高效液相色谱法 GC(Gas Chromatography):气相色谱法 UV(Ultraviolet):紫外分光光度法 IR(Infrared):红外分光光度法 NMR(Nuclear Magnetic Resonance):核磁共振 TLC(Thin Layer Chromatography):薄层色谱法 MS(Mass Spectrometry):质谱法 药典及规范相关[耶R] USP(United States Pharmacopeia):美国药典 EP(European Pharmacopoeia):欧洲药典 BP(British Pharmacopoeia):英国药典 ICH(International Conference on Harmonization):国际人用药品注册技术协调会 其他[鼓掌R] SOP(Standard Operating Procedure):标准操作规程 COA(Certificate of Analysis):分析证书 RT(Room Temperature):室温 LOD(Limit of Detection):检测限 LOQ(Limit of Quantitation):定量限 RSD(Relative Standard Deviation):相对标准偏差 API(Active Pharmaceutical Ingredient):活性药物成分 BSE(Bovine Spongiform Encephalopathy):牛海绵状脑病 CTD(Common Technical Document):通用技术文件 EDQM(European Directorate for the Quality of Medicines):欧洲药品质量管理局 OOS(Out of Specification):超出标准 OOT(Out of Trend):超出趋势 如果还有不清楚的,欢迎大家在评论区或群里交流,如果对的话我再出一期总结。 生活小贴士[举手R] 今天给大家安利一个解压的好习惯——梳头。听说每天梳头一百下可以按摩头部,疏解压力,健康长寿。于是我开始有事没事就梳一梳,时间长了居然有点上瘾,头发也没以前那么油了。什么样的梳子不重要,重要的是经常梳。
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