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活性氧检测试剂盒新上映_活性氧检测试剂盒碧云天(2024年12月抢先看)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：导读更新日期：2024-11-29

活性氧检测试剂盒

活性氧检测试剂盒的原理

索莱宝ros试剂盒 𐟓œ 碧云天ROS试剂盒说明书摘要：碧云天ROS试剂盒用于检测细胞内活性氧（ROS）的水平。试剂盒包含DCFH-DA探针和活性氧阳性对照。操作步骤包括探针装载、细胞刺激和荧光检测。 𐟔젥ꌦ�ꤨ令磯𜚊探针装载：对于短时间刺激（2小时内），先装载探针，后进行细胞刺激。对于长时间刺激（6小时以上），先用药物刺激细胞，后装载探针。原位装载：用无血清培养液稀释DCFH-DA至10微摩尔/升。去除细胞培养液，加入稀释好的DCFH-DA，覆盖细胞。 37℃孵育20分钟，洗涤细胞三次，去除未进入细胞内的DCFH-DA。收集细胞后装载：将细胞悬浮于稀释好的DCFH-DA中，细胞浓度为一百万至两千万/毫升。 37℃孵育20分钟，每隔3-5分钟颠倒混匀，洗涤细胞二次。直接进行药物刺激或等分后刺激，通常20-30分钟后活性氧阳性对照显著提高活性氧水平。 𐟓 注意事项：探针装载后需洗净残余探针，否则背景较高。激发波长和发射波长的扫描确认探针装载情况。尽量缩短探针装载后到测定的时间，减少误差。使用适合荧光检测的黑板或白板进行检测。 𐟚렦𓨦„事项：本产品仅供专业人员用于科学研究，不得用于临床诊断或治疗。使用前请穿实验服并戴一次性手套。 𐟓栥Œ…装清单： DCFH-DA（10mM）0.1ml 活性氧阳性对照（50mg/ml）1ml 说明书1份 𐟌᯸ 保存条件： -20℃保存，有效期一年。 𐟔砦“作步骤验证：按照说明书提供的操作步骤进行实验，确保每个步骤都按照要求执行。如果在操作过程中遇到问题，可以参考说明书中的详细说明或咨询技术支持。

𐟔婀Ÿ成！极简Ros活性氧检测教程 𐟓š科研小课堂开课啦！今天教大家一个极简版的Ros活性氧检测方法，只需3分钟，让你轻松掌握！ 1️⃣ 首先，收集处于对数生长期的细胞，以50000/孔的密度接种于6孔板中，培养24小时。 2️⃣ 接着，按照实验需求，用不同浓度的药物处理细胞，或者设置空白对照组，再继续培养。 3️⃣ 然后，去掉细胞培养液，加入用无血清培养液稀释好的DFE探针（浓度按试剂盒说明来，通常是10umol/L）。在37Ⰳ、5%CO2的培养箱里孵育40分钟。 4️⃣ 之后，用PBS洗涤细胞2-3次，如果细胞贴壁情况好，洗三次后背景会更干净哦。 5️⃣ 最后，立刻在荧光显微镜下观察并拍摄细胞图像。（或者用500ulpbs悬浮细胞后进行流式检测） 𐟒ᥰ贴士：如果药物处理时间较短（2小时以内），可以先用荧光染料标记细胞，然后再用药物刺激哦。 𐟎‰恭喜大家，现在你已经掌握了极简版的Ros活性氧检测方法！快去试试吧！

𐟧ꦴ𛦀禰璏S检测操作指南 𐟔젱. 提前开启超净台紫外消毒30分钟，同时将完全培养基溶液放置至室温。 𐟒蠲. 关闭紫外后，开启吹风2-3分钟，用酒精擦拭桌面进行清洁。 𐟧꠳. 用1mL 0.25%胰酶消化细胞，轻柔摇晃使胰酶覆盖全部细胞，约10秒后吸弃胰酶。镜下观察细胞变圆开始脱落，加入1mL完全培养基终止消化。 𐟔⠴. 将细胞悬液转移至1.5mL EP管中，吹打混匀后取10加至细胞计数板上计数。将(5X105个/孔)细胞接种在6孔板中。 𐟌᯸ 5. 将培养板置于37℃，5% CO2培养箱中预培养24小时。 𐟔젶. 弃去原培养基，加入1mL新鲜无血清培养基，再加入1 DHE探针（根据试剂盒说明添加），轻轻混匀后在培养箱内避光孵育30分钟。同时准备一管不加探针标记的作为阴性对照。 𐟚🠷. 吸弃探针，加入1ml PBS清洗两次，用胰酶消化制备成单细胞悬液，完全培养基终止消化后转移至1.5mL EP管中。离心后弃上清，加入1mL PBS重悬，再次离心后弃PBS，加入500 PBS重悬细胞。 𐟓Š 8. 将细胞悬液转移至流式上样管中，在激发波长535nm，发射波长610nm附近测定细胞内活性氧水平。 𐟔堹. 清理超净台台面及细胞房，开启超净台紫外消毒灭菌。 𐟒ᥰ贴士：推荐使用碧云天试剂盒进行检测哦！

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