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无血清细胞冻存液新上映_无血清细胞冻存液怎么操作(2024年12月抢先看)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：导读更新日期：2024-12-02

无血清细胞冻存液

𐟧Š细胞冻存必备：新赛美冻存液 𐟔今天来聊聊新赛美的无血清细胞冻存液，这可是科研中的好帮手哦！𐟒ꊰŸ’𐤻𗦠𜤺𒦰‘，大约250元就能买到50ml，性价比超高！ 𐟓–而且，这款冻存液在科研界可是大名鼎鼎，你只需要在中国知网搜一下，相关的硕士论文数不胜数，就能证明它的实力啦！ 𐟧Š使用方法也很简单，遵循“慢冻快融”的原理，先放-80℃，一星期内再转移到液氮中冻存，轻松搞定！ 𐟒ᥦ‚果你也在做细胞冻存工作，不妨试试这款新赛美冻存液，相信你会爱上它的！𐟌Ÿ

无血清细胞冻存液：简化冻存，提升复苏率在细胞培养的世界里，细胞冻存液可是个关键角色。传统的冻存液通常包含培养基、血清和DMSO，但这些成分的复杂性和批次差异，让它在应用上有些局限性。更别提那繁琐的程序性降温了，真是费时费力。不过，幸好有李记生物的无血清非程序细胞冻存液（Cat：AC05L174）来拯救我们！这种冻存液不含血清，却含有甘氨酸、DMSO以及磷酸盐缓冲液等多种保护剂。这些成分能大大降低冰晶对细胞的损伤，从而提高细胞的复苏率和活力。使用这种无血清非程序细胞冻存液，操作起来简直不要太方便！再也不用担心复杂的血清成分和繁琐的降温步骤了。小L强烈推荐李记生物的这款细胞冻存液，高效、安全、稳定，简直是细胞培养界的超级英雄！𐟌Ÿ

𐟧Š无血清细胞冻存液大揭秘𐟔 𐟎‰想要找到一款便捷、高效的细胞冻存液吗？来看看雅酶的CellorLab无血清细胞冻存液吧！无需繁琐的分装步骤，更无需复杂的程序降温过程，直接-80℃冻存，轻松搞定！𐟎‰ 𐟓–该冻存液以无血清配方为基础，为细胞提供稳定的生存环境，确保细胞活性和复苏率。实验数据显示，使用CellorLab冻存液冻存的细胞，复苏率高达90%以上，甚至可达98%！𐟓ˆ 𐟒ᨀŒ且，这款冻存液还经过了严格的实验验证，适用于多种细胞系，包括但不限于MCF7、NCI-H23、HCCLM3、A549等。无论你是科研工作者还是实验室人员，都能找到适合你的细胞冻存方案。𐟌Ÿ 𐟎现在购买还有优惠活动哦！买1盒送50元京东卡，买3盒送1盒！这样的好康，你还在等什么？赶快行动吧！𐟏ƒ‍♀️𐟏ƒ‍♂️ 𐟔쥿릝娯•试雅酶的CellorLab无血清细胞冻存液，让你的细胞冻存更加便捷、高效！𐟒ꀀ

4T1小鼠乳腺癌细胞培养与传代全攻略 𐟔젧𛆨ƒž培养指南 𐟔슴T1细胞复苏步骤将含有1mL 4T1细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4mL培养基，混合均匀。在1000rpm条件下离心3分钟，弃去上清液，加入1-2mL培养基，轻轻吹匀。将所有4T1细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中，培养过夜。第三天换液并检查4T1细胞密度。 4T1细胞传代步骤当4T1细胞密度达到80%-90%时，进行传代培养。弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗4T1细胞1-2次。加入1mL消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），使消化液浸润所有细胞。将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟，观察细胞消化情况。若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将4T1细胞悬液按1:2比例分到新的含8mL培养基的新皿中或瓶中，置于培养箱中培养。 4T1细胞冻存步骤待4T1细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。以下以T25瓶为例：收集4T1细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000rpm条件下离心4分钟，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。根据4T1细胞数量对应加入无血清细胞冻存液，使细胞密度为5㗱06~1㗱07/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液。将冻存管放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。培养注意事项 𐟓‹ 该细胞生长速度快，细胞汇合度越高越难消化，建议分次消化。一次消化至有细胞移动漂浮时终止，再进行二次消化剩余的细胞，尽量消化成单颗细胞。细胞传代第二天有少量细胞团贴壁未展开为正常现象，继续培养细胞会展开。若在培养时出现细胞变圆现象，有可能是细胞密度过大，无法展开的原因，可通过降低传代密度来改善。推荐生长培养基为RPMI-1640+10% FBS+1% P/S。收货指南 𐟓抴T1细胞瓶到货后处理方案：验货：检查培养瓶上的标签、培养瓶完好性以及瓶口是否有漏液。处置：用75%酒精对培养瓶消毒后，放入37℃、5% CO2的培养箱静置培养2-4小时后进行显微观察、拍照，作为售后维权依据。注意：贴壁细胞在运输过程中发生细胞脱落是正常的，静置后可恢复贴壁。冻存管到货后处理方案：验货：检查包装的标签、包装内是否有干冰、冻存管完好性。处置：尽快复苏（见培养方法）或程序降温后转移至液氮中保存。

细胞冻存复苏，轻松搞定！细胞冻存与复苏是实验室中常见的操作，正确的步骤可以确保细胞的活力。以下是详细的操作步骤：冻存步骤准备冻存液：从冰箱中取出无血清非程序冻存液，待用。收集细胞：离心收集对数生长期的细胞。贴壁细胞需消化后离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min。重悬细胞：弃去上清液，加入适量无血清非程序冻存液，重悬细胞。分装细胞：将细胞悬液按照1~1.5mL/管的量分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记。长期保存：将冻存管直接移入-80℃冰箱中，24小时后转移至液氮长期保存。手动梯度降温配制冻存液：手动梯度降温需要先配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷。离心收集细胞：离心收集对数生长期的细胞。重悬细胞：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记。复苏步骤预热水浴锅：将水浴锅预热至37℃备用。准备离心管：准备15mL离心管，并向其中加入适量培养基待用。小贴士：离心管中加入2~9mL的培养基，比较难养的细胞，可适量增加培养基。取出细胞：将细胞冻存管从-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴锅。小贴士：如果冰箱或液氮距离水浴锅路途较远（步行超过1min），要把细胞先置于干冰上，再送至水浴锅。如果将细胞冻存管直接放在手上或口袋里，可能导致温度逐渐回升而产生冰晶损伤细胞。而将细胞冻存管装在PE手套中，是为了预防污染。快速融化：用力摇晃冻存管，使其在1分钟内融化。小贴士：这一步越快融化越好，最好能放计时器在旁边。如果1分钟内没有融化，可能是冻存液量偏多，或者摇晃力度不够。转移细胞：用纸巾擦拭水渍，转移至生物安全柜。用移液枪吸取细胞悬液，缓慢滴加到准备好的离心管中。小贴士：当同时复苏多管细胞时，注意不要弄混。离心处理：1200rpm离心3分钟。小贴士：离心是为了去除DMSO，对于DMSO敏感的细胞，必须离心；若复苏的细胞对DMSO不敏感，步骤6、步骤7可以省略，直接将培养基补足至10mL，接种至培养器皿中，第二天换液。观察细胞状态：复苏的细胞需要一段时间恢复状态，当复苏后的细胞密度低于80%时，48小时内不要换液，待细胞形态、生长速度等恢复正常，再进行传代等操作。（不要因为复苏后两三天细胞状态不好就丢弃，应耐心等待至少一周。）当然，复苏后细胞状态很好的情况下，可以提前开始实验。通过以上步骤，你可以轻松掌握细胞的冻存与复苏技术，确保实验的顺利进行。

𐟧Š冻存液优选：新赛美品牌解析𐟌Ÿ 𐟔 在寻找优质的冻存液吗？新赛美冻存液或许是你的不二之选！作为“十年老品牌”，它赢得了众多实验室的信赖和选择，成为细胞的“守护神”。𐟒ꊊ𐟔젦–𐨵›美冻存液以其卓越的性能和广泛的应用赢得了市场的认可。无论是无血清还是无动物蛋白的冻存需求，新赛美都能满足，且经过十年的市场验证，其冻存细胞株种类繁多，为实验室提供了更多的选择和可能性。𐟌𑊊𐟒ᠩ€‰择新赛美冻存液，就是选择了专业与信赖。让你的细胞在安全的环境中生长，为科研工作提供稳定的支持！𐟚€

细胞冻存与复苏：新手必读指南 𐟧Š𐟔劧𛆨ƒž冻存与复苏是细胞培养过程中的基本操作，对于实验室新手来说可能有些挑战。细胞冻存是将细胞保存在超低温环境中，使其进入“冬眠”状态，而复苏则是将这些细胞重新激活并恢复生长。以下是详细的操作步骤和注意事项。冻存原则：慢冻为王 ❄️ 细胞冻存的关键是“慢冻”，即让细胞在缓慢降温的条件下逐渐冷冻。快速冷冻会导致细胞受到冷冻损伤而死亡。冻存液中添加的保护剂（如DMSO、甘油）和冻存盒中的异丙醇，都能起到程序性降温的作用。 DMSO使用注意事项 𐟧ꊊDMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，延缓温度下降速度，减少细胞内冰晶的形成，从而起到保护细胞的作用。然而，DMSO溶于培养基时会释放大量热量，所以冻存液需提前配制，不能直接将DMSO加入含有细胞的培养基中，避免烫伤细胞。此外，DMSO属于致癌物质，使用时应戴好手套，规范操作。程序冻存液配方 𐟓 程序冻存液的成分一般包括基础培养基、胎牛血清和DMSO。血清比例为10%~90%，DMSO比例为5%~10%。根据经验，推荐配比为：55%基础培养基＋40%胎牛血清＋5%DMSO。对于难养的细胞，可以使用90%胎牛血清＋10%DMSO的配比。细胞冻存密度 𐟓Š 在冻存和复苏过程中，不可避免会损失部分细胞，所以冻存的密度不能太低。提高冻存密度有助于提升复苏存活率，推荐密度为100~300万细胞/mL。冻存操作方法 𐟛 ️ 方法一：使用程序冻存盒方法二：使用无血清非程序冻存液方法三：手动梯度降温细胞复苏：快速融化是关键 𐟌᯸ 复苏讲究“快融”，越快融化，细胞所受损伤就越小。以下是复苏的详细步骤：水浴锅预热至37℃备用。准备15mL离心管，并向其中加入适量培养基待用。将细胞冻存管从-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴锅。用力摇晃冻存管，使其在1分钟内融化。用纸巾擦拭水渍，转移至生物安全柜。用移液枪吸取细胞悬液，缓慢滴加到准备好的离心管中。 1200rpm离心3分钟。弃上清，用新鲜培养基重悬细胞，接种至新的无菌培养器皿中。通过这些步骤，你可以有效地保护你的细胞，并在需要时将它们复苏。希望这篇指南能帮助你顺利掌握细胞冻存与复苏的技术！

慢病毒包装全攻略：从细胞培养到病毒收集 𐟓– 细胞分盘：首先，用胰酶消化收集293T细胞，并将其接种到100mm的培养皿中（根据实验需求）。将细胞放入含有5%CO2的37℃细胞培养箱中培养8-24小时。当细胞贴壁且密度达到培养皿总面积的80%以上时，进行转染。 𐟧ꠥ‡†备质粒和脂质体：吸弃293T中的培养液，加入4ml新鲜完全培养基。然后，将目的质粒和包装质粒混合。在一个无菌的1.5ml EP管中，加入250⵬无血清DMEM，加入12ⵧ目的质粒、9ⵧ psPAX2和9ⵧ pmd2.G。在另一个EP管中，加入250⵬无血清DMEM和30⵬ lipo2000，静止5分钟后，将两管充分吹打混匀，静置15分钟。 𐟕𐯸 孵育：将500的混合液逐滴加入细胞培养皿中，确保均匀滴入培养皿的各个部分。轻轻摇动培养皿，使其混匀后，继续置于含有5%CO2的37℃细胞培养箱中孵育。 𐟌€ 换液：8-12小时后，加入10ml预热过的完全培养基，注意不要冲刷掉已经贴壁的细胞。加入完全培养基后，继续将细胞放置在细胞培养箱中孵育。 𐟧Š 收集病毒上清：转染后24小时和48小时左右，收集含有慢病毒的上清液放入离心管中。用1500rpm离心10分钟去除杂质，或者使用0.45um滤器过滤后分装冻存于-80℃。避免反复冻融。或者将离心或过滤后的上清液加入病毒浓缩管中浓缩后分装。 𐟦 病毒感染：将细胞平铺于35mm培养皿，12-24小时后换液，最佳密度为50%。加入收集的病毒上清液和适量polybrene进行培养。细胞长满后传代或检测表达。

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