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液体培养基前沿信息_液体培养基怎么配(2024年12月实时热点)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：教程更新日期：2024-11-29

液体培养基

测MIC秘籍！轻松搞定 𐟧젦 𗥓溶解首先，将样品用液体培养基配置成1024/mL或1024mg/mL。如果称量不便，可以选择配置成10240/10mL或10240mg/10mL。如果样品不溶于液体培养基，可以先用有机溶剂溶解，然后再用培养基定容。 𐟔젦“作过程在96孔板的ABC三行中，每个蜂窝孔中加入100液体培养基。在A1、B1、C1中各加入100样品，相当于三个平行。用100量程的排枪在A1、B1、C1中反复吹吸混匀。从混匀的A1、B1、C1中吸100混合液至A2、B2、C2中吹吸混匀，再从A2、B2、C2中吸100至A3、B3、C3中吹吸混匀，依次2倍梯度稀释至A12、B12、C12后，从A12、B12、C12中吸100弃去。在A、B、C三行所有孔中加入100 1.0x10^6 CFU/mL的菌悬液并吹吸混匀。同时设置阴性对照（100培养基+100菌液）和阳性对照（100抗生素+100菌液）。将96孔板放入37℃培养箱中培养16-20小时。 𐟓Š 判定结果根据加菌液后的样品浓度计算MIC。肉眼观察浊度变化，或用酶标仪测定OD600变化。一般以OD600变化＜0.05为判定结果。 𐟓Œ 注意事项 96孔板最外一圈可以选择不用。通过以上步骤，你就可以轻松测定最小抑菌浓度（MIC）啦！

2216E琼脂培养基制备全攻略 2216E琼脂培养基是一种专为海生细菌培养和计数设计的培养基。以下是详细的制备步骤和注意事项：培养基配方（固体）蛋白胨：5克酵母膏：1克磷酸高铁：0.01克琼脂：15-20克陈海水：1000毫升培养基配制步骤配料根据配方换算，在容器中加入少量水（蒸馏水或自来水）。按照配方称取各种药品，依次加入。加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。溶解淀粉溶解：少量冷水调成糊状。加热溶解，特别是含有琼脂的培养基，一定要煮沸。琼脂的熔解温度为95-97℃，需要边加热边搅拌以防止烧焦。调pH 用煮沸的5%氢氧化钠溶液调节pH至7.6Ɒ.2，25℃。过滤用滤纸或棉花进行过滤（有时可以省去）。分装一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角瓶静置培养：100ml培养基/250ml的三角瓶，最多不能超过150ml。摇瓶培养：15-20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。试管分装液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。包扎分装好后，塞上棉塞，再用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌置高压蒸气灭菌器中，在121℃（约105kPa）下灭菌20min。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。倒平板将冷至50℃培养基分别倒入经灭菌的各平皿中，每平皿约15mL，待其冷却凝固，置2-8℃冰箱内保存备用。注意事项该培养基无机盐成分较多，在高温高压灭菌后容易产生沉淀。为了更好的倒平板，灭菌前的溶解很关键，先加入水，边搅拌边缓慢加入干粉，不要让干粉成团。倒平板之前，应充分摇匀，尽量让沉淀分散开来，避免聚集在一起影响计数。通过以上步骤，您就可以成功制备2216E琼脂培养基，为海生细菌的培养和计数提供良好的环境。

超净工作台紫外灯使用全攻略 𐟌Ÿ 菌落PCR与摇菌全流程 1️⃣ 准备工作打开超净工作台，启动紫外灯进行灭菌20~30分钟。将枪头、酒精灯、离心管等放入超净工作台，确保无菌环境。 2️⃣ 配制PCR预混液根据所需菌落数量，计算并配制PCR体系。例如，若要验证16个菌，可先配制20ul体系，再分装至八联管中。 3️⃣ 挑取菌落用10ul枪头轻轻沾取菌落，注意不要沾太多。将沾有菌落的枪头放入PCR预混液中，反复吹打后弃去枪头。 4️⃣ PCR反应将混合好的PCR液体放入PCR仪中进行反应。反应完成后，进行跑胶验证条带大小是否正确。 5️⃣ 摇菌流程将离心管架、50ml离心管、液体培养基LB、枪头等放入超净工作台，再次进行紫外消毒。根据挑菌数量，摆放相应的50ml离心管，并加入5-10ml LB和对应抗生素。打开培养皿，挑选PCR正确的菌落，用白色枪头挑菌，放入离心管中反复吹打后弃去枪头。将离心管放入摇床继续培养，第二天可进行保菌、提质粒或送测。 𐟌Ÿ 超净工作台操作注意事项所有操作均在超净工作台中进行，确保无菌环境。使用紫外灯时，注意安全，避免直视灯光。操作过程中，保持手部稳定，避免污染。

口罩微生物检测全攻略：从基础到实践口罩在我们的日常生活和医疗环境中扮演着重要角色，特别是在新冠肺炎疫情全球蔓延的背景下，佩戴口罩已成为预防传染的关键措施。市面上的口罩种类繁多，按用途可分为工业用、医用和民用三种。口罩的质量检验至关重要，其中微生物检验是确保使用者健康的关键指标。本文将介绍口罩微生物检测的相关方法、培养基以及结果判断。 𐟔젥䧨‚ 菌群检测流程：见图1。结果报告：若乳糖胆盐发管产酸产气，乳糖发酵管产酸产气，且在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落，革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌，则可报告被检样品检出大肠杆菌。 𐟒š 绿脓杆菌检测流程：见图2。结果报告：若被检样品经增菌分离培养后，证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓杆菌试验均为阳性，即可报告被检样品中检出绿脓杆菌。如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。 𐟍‡ 金黄色葡萄球菌检测流程：见图3。结果报告：若在琼脂平板上有可疑菌落生长，镜检为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。 𐟒‰ 溶血性链球菌检测流程：见图4。结果报告：若镜检革兰氏阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肽试验阳性，可报告被检样品检出溶血性链球菌。 𐟌𑠧œŸ菌菌落总数检测流程：见图5。结果报告：按照以下算式计算： X2=B㗋/5 式中：X2----真菌菌落总数，CFU/g或CFU/mL B-----5块沙氏琼脂培养基平板上的真菌菌落总数 K-----稀释度当菌落数在100以内，按照实有数报告，大于100时采用二位有效数字。如果样品菌落总数超过标准规定，则进行复检。 𐟌🠧œŸ菌定性检测流程：见图6。结果报告：若培养管混浊应转种沙氏琼脂培养基，证实有真菌生长，可报告被检样品检出真菌。 𐟧젤𘭥›𝨍聾𘲰20版1101无菌检查法流程：见图7。要求：接种供试品体积不大于培养基体积的10%，硫乙醇酸盐流体培养基（FTM）每管装量不少于15mL，胰酪大豆胨液体培养基（TSB）每管装量不少于10mL。结果判定：阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。供试品管若均无菌生长，判定供试品符合规定；若供试品管中任何一管有菌生长，判定供试品不符合规定。通过这些检测方法和流程，可以有效确保口罩的质量和安全性，保障使用者的健康。

𐟧ꦊ‘菌圈实验：牛津杯法详解𐟥䊧‰›津杯法，也被称为管碟法，是一种利用双层琼脂进行抑菌圈实验的方法。虽然操作稍显复杂，但结果准确可靠。今天，我们将来介绍一种更简便的单层琼脂牛津杯法。𐟑‡ 首先，准备好菌悬液，浓度控制在1.0㗱0^7-8CFU/mL。你可以使用生理盐水、PBS或液体培养基进行稀释。接下来，在琼脂板背面做好标记，并用100的菌悬液均匀涂布于平板上。𐟧𞊊之后，将含菌平板放入框子中，便于后续操作。牛津杯经过灭菌并烘干后，用镊子轻轻放置在含菌平板上，并注入100-150的样品。同时，以溶解样品的溶剂作为空白对照。𐟥䊊最后，盖上培养皿盖子，并将框子置于37℃的恒温培养箱中培养16-20小时。培养结束后，用镊子取出牛津杯，倒置平板，采用十字交叉法测量抑菌圈的直径。𐟓 通过这种方法，你可以有效地评估样品的抑菌效果，为科研工作提供有力支持！𐟒ꀀ

化验员必学：鉴定类培养基的制备指南 𐟧ꊥ˜🯼Œ化验员们！今天我们来聊聊鉴定类培养基的制备方法。鉴定类培养基主要用于检验微生物的各种生化特性，很多分离类的培养基也具有鉴定效果，被称为分离鉴别培养基。这些培养基的形式多种多样，按状态可分为液体、固体、半固体。每种类型的培养基配制方法也不尽相同。液体类鉴定培养基 𐟌Š 液体类培养基，比如糖发酵、MR-VP、氨基酸代谢试验等，通常需要分装到试管中。如果你需要观察产气现象，可以在试管中放入倒管。灭菌后要进行排气；如果是厌氧培养，可以在培养基上方覆盖约3mm的液体石蜡。半固体类培养基 𐟍Š固体类培养基中通常含有少量的琼脂，需要先加热煮沸溶解均匀，然后分装到试管中。灭菌后摆直立，待凝固后备用。固体类培养基 𐟍𐊥›𚤽“类培养基有几种常见的制备方式：倒平板：将灭菌后冷却至50Ⰳ左右的完全培养基倾入无菌平皿即可。如果需要观察透明圈等现象，倾注平板不宜过厚。摆直立：适用于观察需氧条件下的单项生化反应。灭菌后一般摆成长斜面（斜面：底层≈3:2），底层也可以更短，主要起固定作用。高层斜面：适用于观察复合生化反应结果，同时需观察有氧和缺氧部分。灭菌后需摆高层斜面（斜面：底层≈2:3），使用的试管塞必须具有良好的透气性。小贴士 𐟒እ葉Œ全灭菌的培养基，通常建议先加热溶解分装，再进行灭菌处理。对于灭菌后还需添加不稳定成分的培养基，则需先灭菌，冷却后加入不稳定成分，再分装至无菌器皿。希望这些小技巧能帮到你们，祝大家在化验员的道路上越走越远！𐟚€

𐟔젨🞦Ž娽쥌–的实验步骤大揭秘！𐟔 𐟓š 想要了解连接转化的步骤吗？这里为你详细揭晓！ 1️⃣ 扩增目的序列：首先，进行目的序列的扩增，使用50微升体系进行胶回收或产物回收。 2️⃣ 连接反应：采用无缝克隆技术，使用T4连接酶，按照说明书进行连接反应。连接体系如图所示。 3️⃣ 短暂离心：将混合物短暂离心，确保所有成分混合均匀。 4️⃣ 孵育：将混合物放入PCR仪，37℃孵育30分钟。在此期间，可以准备超净台、水浴锅和解冻感受态细胞。 5️⃣ 感受态细胞处理：将50感受态细胞与5目的序列回收产物混合，使用移液枪轻柔搅匀。 6️⃣ 水浴激活：将混合物放入42℃水浴中90秒，然后迅速冰浴2分钟。 7️⃣ 复苏细菌：加入800预热的液体培养基（LB），放入37℃摇床，220r，孵育1小时。 8️⃣ 离心收集：7500rmp离心1分钟，吸取600上清液弃去，剩余菌液重悬。 9️⃣ 平板涂布：将重悬菌液涂布在含有玻璃珠的平板上，封板后37℃培养12-20小时。 𐟔Ÿ 观察结果：培养完成后，观察平板上的菌落生长情况，以确认连接转化是否成功。 𐟒ᠦ𘩩樦示：在进行实验前，请确保所有仪器和材料都已准备好，并按照步骤逐步操作，祝你实验顺利！

𐟍𒌂肉汤培养基制作指南𐟧슰Ÿ”쌂培养基，全称Luria-Bertani Medium，是微生物学实验室的明星培养基！它特别适合培养大肠杆菌等常见菌种哦。 𐟥㥮ƒ的名字来源于lysogeny broth，意为“溶源肉汤”，最初是用来研究溶源性噬菌体与宿主的关系的。 𐟓配方来啦： - Tryptone（胰蛋白胨）10g/L，提供氮源和氨基酸。 - Yeast Extract（酵母膏）5g/L，提供氮源、维生素、生长因子和少量碳源。 - Sodium Chloride（氯化钠）10g/L，维持渗透压平衡和细胞稳定。 𐟒ጂ培养基可以做成液体或固体形式哦： - 液体LB培养基适合细菌大量扩增和表达外源基因。 - 固体LB培养基则是在液体基础上加了琼脂，用于菌落培养、筛选和计数。 𐟒‰想要筛选特定菌种？没问题！在LB培养基中加入抗生素如氨苄青霉素，就能筛选出携带抗性基因的转化子啦。加入伊红美蓝还能鉴定大肠杆菌等菌种呢！

植物细胞培养：悬浮与固定化技术的优势在植物组织培养领域，MS固体培养基被广泛使用。然而，这种方法在某些方面存在局限性。例如，愈伤组织在生长过程中，营养成分和代谢物质的分布可能不均匀，琼脂本身也可能含有不明物质，这些因素可能影响植物组织的正常发育，甚至改变其代谢途径。为了克服这些缺点，液体培养基被引入到植物细胞培养中。通过薄层震荡培养或向培养基中通气，可以改善氧气供应，促进植物组织的生长。这就是植物细胞的悬浮培养：将游离的单细胞或细胞团按照一定的细胞密度悬浮在液体培养基中，用摇床或转床进行培养的方法。在此基础上，细胞固定化培养技术应运而生。这种技术将植物悬浮细胞包埋在多糖或多聚化合物（如聚丙烯）网状支持物中进行无菌培养。由于细胞处于静止状态，固定化培养可以促进细胞以多细胞状态或局部组织状态一起生长，从而为细胞提供一种最接近体内环境的环境。与悬浮培养相比，固定化培养在多个方面表现出优势。首先，它提高了次生物质的合成和积累。其次，固定化培养能够长时间保持细胞活力，并且可以反复使用，这在实际应用中具有显著的经济效益。通过这两种培养方式，植物细胞的培养技术得以不断优化和完善，为植物生物学研究和农业生产提供了强有力的技术支持。

如何制作漂亮的免疫荧光类器官图嘿，大家好！今天我想和大家分享一下如何做出超好看的免疫荧光类器官图。这个过程虽然有点繁琐，但绝对值得一试！让我们一起来看看吧！类器官收集 𐟌𑊩斥…ˆ，我们需要收集类器官。取出类器官培养板，用显微镜观察类器官的大小。等到类器官长到100-200左右的时候，就可以进行石蜡包埋了。用移液枪吸去培养液，加入等体积的预冷基础培养基。用润洗过的枪头（剪去尖端）轻轻划破或吹散基质胶和类器官的混合培养物，然后转移到1.5mL的离心管中，轻柔吹打几次，最后在冰上静置5分钟。接下来，300g，4℃，离心3分钟。你会看到培养基、基质胶和类器官沉淀从上至下分三层。如果基质胶去除不干净，可以再次用基础培养基重悬类器官离心后弃上清，直到基质胶完全去除。类器官固定、清洗 𐟧ꊥ›𚥮š类器官加入1mL 4% PFA到类器官沉淀悬液中，轻柔吹打使其混匀，然后在冰上或4℃静置固定1小时。固定结束后，300g，4℃离心5分钟，弃去上清。清洗类器官加入1mLPBS重悬类器官，300g，4℃离心5分钟，弃去上清。将类器官沉淀转移到60-70℃的水浴或金属浴中预热待用。琼脂糖包埋类器官 𐟧𔊥œ襾⧂‰中隔水加热至3%的琼脂糖彻底融化，操作时避免琼脂糖溶液沸腾，否则会导致液体损失及浓度改变。加入30-50已完全溶解的琼脂糖溶液，用润洗过的枪头（剪去尖端）重悬类器官沉淀，冰上放置30分钟，待其凝固。石蜡包埋、切片、脱蜡至水 𐟔ꊨ🙤𘀦�œ‰点复杂，但很重要。简单来说，就是将凝固的琼脂糖包埋的类器官切片，然后进行石蜡包埋、切片、脱蜡至水。免疫染色 𐟌ˆ 高温抗原修复封闭：用5%BSA封闭30分钟；孵育一抗：每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒，4℃孵育过夜；孵育二抗：第二天加荧光二抗。PBST浸洗爬片3次，每次3分钟。吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中20-37℃孵育1小时。PBS浸洗爬片3次，每次3分钟； DAPI染核：滴加DAPI避光孵育5分钟，对标本进行染核。PBS 5分钟㗴次洗去多余的DAPI；封片观察 𐟔튧”襐𘦰𔧺𘥐𘥹𒧈짉‡上的液体，用含抗荧光淬灭剂的封片液封片，然后在荧光显微镜下观察并采集图像。好了，这就是制作免疫荧光类器官图的全过程啦！希望对大家有帮助！如果有任何问题或需要更多细节，欢迎留言讨论哦！