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GST实验:探P53与HSP70 ### 实验目的 通过构建GST-P53融合蛋白表达载体,利用GST pull-down技术沉淀与P53蛋白互作的蛋白,并通过Western Blot(WB)验证P53与HSP70的潜在互作。 材料准备 DL2000 DNA Marker(YEASEN,cat.No 10501ES60) 琼脂糖(BIOWEST,cat.No 111860) GST pull-down试剂盒(Ruqi.biotech,cat.No RQ0085) 主要仪器 凝胶成像仪(勤翔,cat.No 6100) 高速离心机(Eppendorf,cat.No 5810R) 方法概述 捕获蛋白制备 细胞收集与洗涤 裂解细胞,获取上清 保留一部分上清作为input样本 诱饵蛋白制备 对GST-P53表达菌液进行洗涤和裂解 磁珠的准备和与诱饵蛋白结合 GST pull-down操作 结合诱饵蛋白与捕获蛋白裂解液 洗涤和裂解磁珠上的蛋白复合物 收集上清以进行后续分析 银染与WB结果 详细银染步骤,从固定到最后的水洗涤 对银染和WB结果的描述和分析 实验原理 GST pull-down实验基于亲和层析的原理,通过GST融合蛋白与GSH磁珠的结合,实现与目标蛋白的物理性互作沉淀。详细解释了实验中蛋白-蛋白互作的分子机制和该技术如何使我们能够研究这些相互作用。 结果分析 详细记录了银染和Western Blot的实验结果,并对数据图像进行分析,评估GST-P53与HSP70互作的证据,并探讨实验结果的意义。 实验操作的注意事项 诱饵蛋白与GST融合的重要性,以及在实验中如何保证融合蛋白的活性。 细胞裂解条件对实验结果的影响,包括Protease inhibitor及PMSF的使用以保护蛋白质不被降解。 详细说明磁珠处理的操作要点,包括磁珠的选择、洗涤、和蛋白结合的最佳条件。 实验的数据处理与统计分析 通过凝胶成像系统和相关软件对电泳条带进行定量分析。 描述Western Blot结果的定性分析流程,包括膜转移、抗体孵育以及信号的检测。 实验结果展示 WB实验结果 GST-银染检测 总结 总结本次GST pull-down实验的关键发现,并提出后续研究的建议,包括可能的实验改进、进一步的验证实验,以及本实验结果如何为未来研究P53相关疾病提供信息。

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猫咪生化检查大概多少钱 今天带贝贝去洛阳的知家宠物医院做了绝育手术,这已经是我们家第二只绝育的小猫了。医生态度非常好,听说贝贝喘得比较厉害,还特意让张院长给我们做了心脏彩超。 𐟒‰ 花费: 母猫绝育手术费:399元 心脏彩超:159元 生化十六项+血常规:230元 总计:790元 𐟓‹ 注意事项: 术前六小时断水断粮 术后六小时断水断粮 带了航空箱 麻药醒后,贝贝像一只傻猫,在航空箱里乱撞,把箱子当架子鼓打 做完检查后,医生说贝贝非常健康。这次手术后,她又可以愉快地玩耍了! 𐟓𘠦〦Ÿ妊契Š: SonoScape Clinic 0.91.120240702095222 1岁 noScape 07/02/2024 10:58:14 8P1/F2 金渐层贝贝 女 01/12/2023 vsd: 4.05mm LviDd: 12.57 mm Lvpwd: 5.20mm LVIDs: 7.66mm LVPWs: 6.94 mm ED(Tich: 3.80 mL EVITeich: 0.99 mL EF(Teichi: 73.88 SV(Teich: 2.81 mL FS(Teich: 39.08 NS%: 39.29 LVPW%: 33.33 IVS/LVPW: 0.78 MPR Peak Slow LVMIC GN 41 PWR 100 中国 𐟏堧”Ÿ化十六项+血常规报告: 主人名字:当层 科室:知家动物医院 仪感版本号:10.01,06/1.0013 操作医生:张院长 试剂盒ID:018049241083 样本类型:血液 检测时间:2407.021030202407.0210:45 参考范围:谷丙转氨酶(ALT):37.6 U/L(22-44 U/L) 谷草转氨酶(AST):57 U/L(5-48 U/L) 肌酐(CREA):73.28 ol/L(44-130 ol/L) 血糖(GLU):23-52 mmol/L(3.68-6.11 mmol/L) 钾(K):35.68 mmol/L(3.5-5.5 mmol/L) 钠(Na):144 mmol/L(137-147 mmol/L) 氯(Cl):106 mmol/L(96-108 mmol/L) 总蛋白(TP):62 g/L(55-85 g/L) 白蛋白(ALB):35 g/L(28-48 g/L) 球蛋白(GLO):27 g/L(20-45 g/L) 谷氨酰胺转移酶(GGT):16 U/L(7-30 U/L) 碱性磷酸酶(ALP):68 U/L(35-129 U/L) 总胆红素(TBIL):9.64 ol/L(3.4-17.1 ol/L) 直接胆红素(DBIL):4.4 ol/L(1.7-6.8 ol/L) 间接胆红素(IBIL):5.2 ol/L(1.7-12.9 ol/L) 谷草转氨酶同工酶(AST-M):27 U/L(< 48 U/L) 乳酸脱氢酶(LDH):69 U/L(< 48 U/L) 总胆固醇(TC):5.77 mmol/L(< 8.83 mmol/L) 甘油三酯(TG):1.77 mmol/L(<

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