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转染试剂最新视觉报道_caspase3与凋亡的关系(2024年12月全程跟踪)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：热点更新日期：2024-11-30

转染试剂

泛素化检测秘籍𐟔 𐟌ˆ 如何检测蛋白质是否泛素化？通过免疫共沉淀（CO-IP）方法，可以将特定蛋白质及其结合的蛋白质分离出来。分离后的蛋白质经过SDS电泳和Western blot分析，可以明确哪个蛋白质的哪个赖氨酸残基发生了泛素化修饰。 𐟌Ÿ 实验步骤 1️⃣ 细胞接种与转染接种HEK293细胞，当细胞密度达到40-60%时进行转染。除了目的质粒外，还需转染0.75ug的泛素分子Ub。转染体系包括10ug质粒、20ul转染试剂和400ul高糖完全培养基。 2️⃣ 细胞裂解用胰酶消化细胞，将其转移到1.5ml离心管中，3500rpm离心5分钟，去除培养基。用PBS清洗细胞，重复两次。 3️⃣ 蛋白提取向离心管中加入100ul RIPA裂解液和10ul 10%的SDS，混匀后100Ⰳ煮10分钟，以解除被泛素化蛋白与其他蛋白的结合。 4️⃣ 超声破碎细胞向离心管中加入900ul RIPA裂解液和10ul PMSF，冰上放置30分钟，12000rpm 4Ⰳ离心10分钟。 5️⃣ 蛋白与磁珠结合取1ml IP Wash Buffer于离心管中，缓慢混匀后加入10ul磁珠，放置于磁力架上3分钟，吸弃IP Wash Buffer，重复清洗磁珠三次。 6️⃣ 免疫共沉淀取900ul上述所得裂解液于含磁珠的离心管中作为IP组，置于旋转仪上4度旋转过夜。剩余的细胞裂解液作为Input，保存于-20Ⰳ。 7️⃣ 清洗磁珠第二天将离心管置于磁力架上3分钟，磁珠吸附完毕后吸弃离心管中的溶液。每管加入1ml IP Wash Buffer，旋转仪置于4Ⰳ冰箱中旋转5分钟，吸弃IP Wash Buffer，重复清洗3次。 8️⃣ 煮样向Input组中加入25ul的5xLoading Buffer，IP组加入80ul用RIPA裂解液稀释的1㗌oading Buffer，振荡混匀后再瞬离，在震荡金属浴中100Ⰳ煮10分钟，震荡频率为1000rpm。

科研雷品：吉玛基因转染试剂的那些坑没想到大家对科研雷品这么感兴趣！今天给大家分享一个非常小众的科研雷品——吉玛基因的转染试剂。一开始，这个转染试剂配合公司提供的荧光标签siRNA，效果非常好，满屏都是荧光信号。相比之下，lipo3000在荧光下一点东西都看不到。刚开始用的时候，确实没什么细胞毒性，效果也不错。然而，有一天他们换了批次发货，细胞毒性突然变得非常大，几乎毒死了所有细胞。打电话反映情况，交接的经理特别不积极，说好要做细胞毒性测试再发货，结果直接发货了，根本没做测试。问了一个星期也不理人。此时此刻，这个破转染试剂已经耽误了我们三个月的实验。再也不相信他们家的任何转染试剂了。此后买国产试剂都要小心谨慎。现在，我们的安全感是lipo3000给的。如果你也订了他们家的业务，不要慌，他们家的转染试剂不行，但siRNA暂时还可以。我们当初订业务前有让别的老师去考察，没啥问题。

活体转染神器！两步搞定 in vivo-jetPEI⮠是一种先进的活体转染试剂，能够安全有效地在各种动物模型中递送DNA、si/miRNA和其他类型的核酸。它已被广泛应用于体内基因功能研究、癌症研究和免疫/疫苗领域，拥有超过700篇参考文献。 𐟌Ÿ 多样性：适用于多种动物模型和核酸类型 in vivo-jetPEI⮠可以在任何器官或组织中通过基因过表达或基因抑制的方法进行基因功能研究。它适用于各种动物模型（如小鼠、大鼠、豚鼠、狗、兔子、猴子等），并能递送不同类型的核酸（如质粒DNA、siRNA、shRNA、miRNA和寡核苷酸）。已有大量文献证明了在不同动物模型中成功递送各类核酸。 𐟒‰ 便捷性：两步法操作使用in vivo-jetPEI⮩ž常简便，只需将核酸与in vivo-jetPEI⮦𗷥ˆ后，直接注射到动物体内。操作过程与体外转染类似，省去了许多繁琐步骤。 𐟏… 成功经验：从基础研究到临床试验由于in vivo-jetPEI⮧š„可靠性、安全性和高效递送，它已被用于多个药物开发项目。目前，多项用于癌症治疗、疫苗和免疫的临床试验正在使用高质量的GMP级in vivo-jetPEI⮣€‚ 𐟔 质量等级 in vivo-jetPEI⮦œ‰不同等级，包括研发级用于基础研究和实验验证，PC级适用于临床前生物分布和毒理研究，而GMP级则是最高质量等级，符合人体临床试验的质量要求。通过这些特点，in vivo-jetPEI⮦ˆ为了科研和临床研究中的有力工具。

吉满优试剂 | 品牌周1周年，温暖你，包裹你又到了一年中四季随机播放的季节换季带来的温差总让人措手不及吉满优试剂本月特别挑选【卡皮巴拉午睡毯二合一】多功能：抱枕+靠垫+空调毯多场景：居家+办公+车载...谁也不能拒绝毛茸茸的包裹感活动时间：10月21日-10月25日活动形式：限量抢购，前20名下单试剂产品获赠好礼活动礼品：卡皮巴拉午睡毯二合一吉满目前有哪些试剂产品呢？ 1、细胞功能检测相关试剂细胞活力检测相关【GMTiterTM 发光法细胞活力检测试剂盒、CCK8检测试剂盒】荧光素酶检测相关【GMOne-Step 萤光素酶报告基因检测试剂盒2.0升级版、GMBrightOne-Step 荧光素酶报告基因检测试剂盒、GMSteadyOne-Step 荧光素酶报告基因检测试剂盒、双荧光素酶（Dual Luciferase）报告基因检测试剂盒、钾盐、钠盐】 2、病毒生产相关试剂慢病毒包装试剂盒、慢病毒浓缩试剂盒 3、细胞培养相关试剂培养基、抗生素、支原体喷雾、转染试剂 4、质控检测试剂 gDNA标准品、ctDNA标准品 5、蛋白、抗体标签抗体、内参抗体、药物靶点阳性抗体、ADC阳性对照抗体、ADC阴性对照抗体、抗毒素抗体

一分钟搞懂基因过表达、敲低、敲除的区别嘿，大家好！今天咱们来聊聊基因操作里的三个常见术语：过表达、敲低和敲除。别担心，只需要一分钟，你就能搞懂它们的区别啦！基因过表达 𐟚€ 基因过表达，简单来说，就是把一个基因插到一个表达载体里，然后把这个载体转染到目标细胞里。这样一来，细胞就会大量表达这个基因和它编码的蛋白质。常见的载体有哺乳动物载体（用于人、小鼠等哺乳动物细胞）、原核载体（用于大肠杆菌等原核生物）和慢病毒载体（比如HIV、FIV、SIV、EIA）。构建这些载体的方法包括设计目的基因片段和载体、连接元件（用酶切或gateway连接），然后通过病毒载体、电穿孔或转染试剂导入目标细胞。基因敲低 𐟛‘ 基因敲低呢，主要是用抑制剂来抑制基因的表达。常见的方法有RNA干扰技术（RNAi）、CRISPR-Cas9技术和gene转染技术。比如，siRNA载体通过与目标mRNA互补结合序列，特异性地实现靶向mRNA降解。而CRISPR载体则包含CRISPR靶向序列和转录抑制子。构建这些载体的步骤包括设计干扰序列、合成和克隆、转化和筛选，最后通过病毒等途径导入目标细胞。基因敲除 ✂️ 基因敲除则是用含有已知序列的小DNA片段与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组，整合到受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术。常见的载体有CRISPR/Cas9载体和TALENs载体。CRISPR/Cas9载体通过Cas9核酸酶和sgRNA靶向序列精确定位并靶向基因DNA序列，然后引入双链断裂点，完成基因敲除。而TALENs载体则包含特异性核酸酶和nuclease binding domain，通过切割靶向基因DNA序列，完成敲除和编辑。构建这些载体的方法包括设计和选择靶点、载体插入、转化和验证，最后通过病毒载体、电穿孔等方法导入目标细胞。总结 𐟓 总的来说，基因过表达、敲低和敲除这三种技术在生物学研究中有着广泛的应用。了解它们的原理和构建方法，可以帮助你更好地设计和执行实验。希望这篇文章能让你在短时间内对它们有个清晰的认识！如果你有任何问题或需要进一步的解释，欢迎在评论区留言哦！𐟘Š

polyplus转染试剂专业供应商

科研利器SuperfectTM转染试剂初步研究

【多宁生物与Branca Bun㺳达成战略合作，推进新型转染试剂市场应用】上海2024年11月6日 /美通社/ -- 日前，上海多宁生物科技股份有限公司（简称"多宁生物"）宣布与Branca Bun㺳 Ltd.（简称"Branca Bun㺳"）签署战略合作协议...网页链接

𐟌Ÿ细胞培养基大揭秘：三种基础培养基详解！ 𐟌𑥟𙥅𛥟𚦘炙†胞培养环境中的核心成分，它为细胞生长提供必需的营养物质、生长因子和激素，并维持适宜的 pH 值和渗透压。今天我们来探索三种基本培养基：基础培养基、减血清培养基和无血清培养基。 𐟌🥟𚧡€培养基基础培养基包含细胞生长所需的多种营养成分，如氨基酸、维生素、无机盐和碳水化合物。大多数细胞系在基础培养基中能够良好生长，但通常需要添加血清。例如，DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种常见的基础培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。 𐟍€减血清培养基减血清培养基在基础培养基的基础上减少了血清的含量。Opti-MEM™ I 减血清培养基是一种改良的最低必需培养基 (MEM)，能使胎牛血清的添加量减少至少 50%，而不会影响细胞的生长速率或形态。这种培养基常与阳离子脂质体转染试剂（如 Lipofectamine™ 试剂）配套使用，以提高转染效率。 𐟌Š无血清培养基无血清培养基完全不含有动物血清。它通过使用适当的营养和激素配方来替代血清，避免了使用动物血清时可能出现的问题。无血清培养基 (SFM) 在细胞培养中具有独特的优势，适用于那些对血清成分敏感或需要更严格控制实验条件的细胞类型。 𐟔选择哪种培养基取决于细胞类型、实验目的和成本等因素。这三种基本培养基在细胞培养中各有优势，了解它们的特点可以帮助你做出最佳选择。

虽然我没做过对比，但是生工的siRNA+多纳的转染试剂太牛逼了[送花花]

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