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细胞培养最新视觉报道_细胞培养技术(2024年12月全程跟踪)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：热点更新日期：2024-12-02

细胞培养

哺乳动物细胞培养：探索生命的奥秘想象一下，把哺乳动物细胞放进培养皿里，给它们提供合适的营养和条件，它们就像在开一场细胞派对！这些细胞们互相交流、互相依赖，共同演绎出生命的华美乐章。𐟎𖰟’ƒ 这场细胞之舞背后有着广泛而重要的应用。在医学研究中，哺乳动物细胞培养模型被用来研究疾病的发展机制和寻找治疗方法。这些细胞能模拟人体内的情况，为疾病的解读和治疗提供重要线索。𐟒Š𐟔슊哺乳动物细胞培养就像一场魔幻的视觉盛宴，让我们近距离感受生命的奇迹。如果你也对这个领域感到好奇，那就和我一起踏入这片神秘的细胞乐园吧！𐟌ˆ𐟧ꊊ下面是关于哺乳动物细胞培养的一些基本概念和步骤：细胞系的选择 𐟌𑊩€‰择适合培养的哺乳动物细胞系非常重要。常用的细胞系包括人类细胞系（如HEK293、HeLa）、小鼠细胞系（如NIH/3T3）和其他动物细胞系（如CHO）。选择细胞系时需要考虑其生长特性、稳定性和在所需实验中的适用性。细胞培养基 𐟍𒊧𛆨ƒž培养基是提供细胞营养和生长因子的液体培养介质。常见的培养基包括DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）和RPMI 1640。此外，培养基通常会添加血清（如胎牛血清）和其他补充物（如氨基酸、维生素、抗生素等）。培养条件 𐟌᯸ 细胞需要在适宜的环境条件下培养。这包括恒定的温度（通常为37摄氏度）、适当的CO2浓度（通常为5%），以及衡量和调节培养基的pH值。培养皿和培养技术 𐟧ꊥ𘸧”觚„培养皿包括培养瓶、细胞培养板和细胞培养皿。可以使用传统的培养方法，如悬浮培养、贴壁培养或旋转培养，根据细胞类型和实验要求选择适当的培养技术。细胞检测和传代 𐟔스𘺤𚆧𛴦Œ细胞的健康和生长，需要定期检测细胞的形态、增殖情况和纯度。当细胞达到一定的密度时，需要进行细胞传代，将细胞转移到新的培养容器中，以降低群体密度并维持细胞的增长状态。在进行细胞培养实验时，需要严格控制培养条件和采用无菌技术，以避免细菌和真菌的污染，并确保实验结果的可靠性。

100多种细胞系详解，你知道多少？在细胞培养的世界里，我们经常会遇到各种不同的细胞类型。这些细胞来自不同的组织和器官，每种细胞都有其独特的特性和用途。今天，就让我们一起来探索这些神奇的细胞系，别再傻傻分不清楚啦！𐟔 上皮细胞：这些细胞通常覆盖在身体表面，保护我们的身体不受外界伤害。成纤维细胞：它们存在于结缔组织中，负责修复和重建受损的组织。神经细胞：它们是神经系统的基础，负责传递和接收信号。免疫细胞：这些细胞参与免疫反应，保护我们免受疾病的侵害。内皮细胞：它们构成血管的内壁，负责运输氧气和营养物质。肌细胞：它们是肌肉的基础，负责身体的运动。腺细胞：它们分泌激素和其他化学物质，调节身体的内部环境。脂肪细胞：它们储存脂肪，为身体提供能量。癌细胞：这些细胞不受控制地生长和分裂，形成肿瘤。干细胞：它们具有自我更新的能力，可以分化成多种类型的细胞。胚胎干细胞：它们来自早期胚胎，具有多能性，可以分化成任何类型的细胞。这些细胞系只是冰山一角，还有更多未知的细胞类型等待我们去发现和了解。通过深入了解这些细胞，我们可以更好地理解生命的奥秘，为未来的医学研究和治疗提供更多可能。𐟌Ÿ

细胞克隆形成实验：详细步骤与成图方法细胞克隆形成实验是一种常用的细胞生物学研究方法，通过这种方法可以研究细胞的增殖和分化。以下是详细的实验步骤和注意事项：细胞准备 𐟧ꊩ斥…ˆ，选择处于对数生长期的细胞，这个时候细胞增殖活跃，非常适合进行克隆形成实验。使用0.25%的胰蛋白酶消化细胞，将细胞完全悬浮于完全培养基中，并进行准确计数。细胞接种 𐟌𑊥𐆧𛆨ƒž悬液进行梯度倍数稀释，根据实验需要控制每孔的细胞数量，通常在400-1000个细胞/孔之间。将稀释后的细胞悬液接种于6孔板或其他培养板中，每个实验组设3个复孔以提高实验的准确性。注意稀释细胞可采取梯度稀释法，铺板后在显微镜下观察细胞数量和状态，如是否是单克隆，数量是否适宜。数量过多导致克隆会连成一片，数量过少可能会导致克隆无法正常生长。培养 𐟌🊥𐆦Ž姧好的细胞培养板置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中继续培养。培养时间根据细胞类型和生长速度而定，通常需要10-14天或直到大多数单个克隆中的细胞数超过50个细胞，克隆的大小通常在0.3到1.0毫米之间。固定与染色 𐟎芥𝓥…‹隆形成后，使用4%多聚甲醛或甲醇固定细胞，固定时间根据实验条件而定，通常为15-30分钟。弃去固定液，用PBS洗涤细胞。使用结晶紫（0.1%-0.5%浓度）或其他染色剂对细胞进行染色，染色时间控制在5min-20min内。染色后用PBS清洗多余的结晶紫染料，将细胞克隆晾干。观察与计数 𐟔 使用倒置显微镜观察细胞克隆的形成情况，并进行拍照记录。对克隆进行计数，计算克隆形成率：克隆形成率=(克隆数/接种细胞数)㗱00%。通过以上步骤，你可以得到细胞的克隆形成情况，进一步研究细胞的增殖和分化机制。

细胞培养全攻略：从零开始到专家嘿，大家好！今天我们来聊聊细胞培养的基础知识，特别适合刚入门的小伙伴们。准备好你们的笔记本，我们开始吧！实验室介绍 𐟏š️ 首先，咱们得先了解一下实验室的基本构造。细胞培养实验室通常有三个房间：缓冲间、无菌操作室和准备室。每个房间都有特定的功能，比如缓冲间是防止空气对流，无菌操作室则是进行实验的地方。进入实验室前，记得换上专用的拖鞋和实验服，戴好口罩和帽子。主要设备 𐟔슧𛆨ƒž培养需要用到一些关键设备，比如培养箱、超净工作台、倒置显微镜等。培养箱是用来模拟体内环境，让细胞生长和繁殖的地方。超净工作台则是进行无菌操作的地方，确保实验环境干净无污染。倒置显微镜则是用来观察细胞的生长情况。细胞培养基础 𐟌𑊧𛆨ƒž培养分为原代培养和传代培养。原代培养是从机体中取出组织后进行的首次培养，而传代培养则是将原代细胞增殖到一定密度后，经过处理再转移到新的培养瓶中继续培养。传代的次数就是细胞的代数。无菌操作 𐟧𜊦— 菌操作是细胞培养的关键，所有与实验无关的物品一律不能带入实验室。进入实验室后，要穿戴好工作服、口罩和鞋套。吸管使用前、培养瓶开启之前以及合盖前都要在酒精灯附近操作，确保无菌环境。细胞传代操作 𐟧스𜠤𛣦“作需要用到胰蛋白酶和EDTA溶液来消化细胞。消化时间要把握好，一旦胞质回缩、连接变松散或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。消化后的细胞要用无菌吸管吹打分散，然后分装到新的培养瓶中继续培养。注意事项 ⚠️ 严格无菌操作：所有操作都要在超净工作台内完成，确保无菌环境。适度消化：消化时间要把握好，避免过度消化导致细胞死亡。观察细胞形态：在消化过程中要注意观察细胞的形态变化，及时终止消化。好了，今天的细胞培养基础就聊到这里。希望对大家有所帮助！如果有任何问题，欢迎留言讨论哦！

细胞克隆实验全攻略：从准备到结果解读细胞的消化 𐟧슥–对数生长期的细胞，分别加入0.5mL 0.25%的胰蛋白酶，放入细胞培养箱中消化2分钟。从培养箱中取出细胞，加入1mL完全培养基，吹打成单个细胞。常温下1000rpm离心5分钟收集细胞。离心后去除上清液，加入1mL完全培养基，吹打成单个细胞悬浮液备用。活细胞计数 𐟔⊥–10细胞悬浮液，加入90台盼蓝溶液，涡旋振荡混匀。用酒精清洁血细胞计数器的小室和盖玻片，然后用脱脂棉擦干。用微量移液器吸取10稀释的样本充满两个小室。计数4个大方格中的细胞总数，活细胞透明有折光（未染色），死细胞则染成蓝色。细胞密度计算方法：每个方格中活细胞总数平均值 x 稀释倍数 x104=活细胞数/mL。细胞接种与培养 𐟌𑊥𐆧𛆨ƒž悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每孔500个细胞梯度密度接种于含2mL 37℃预温培养液六孔板中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37℃ 5%CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2~3周。每隔3~4天换一次新鲜培养基。细胞克隆固定与染色 𐟎芧𛏥𘸨炥𜌥𝓥Ÿ𙥅𛥭”中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加5mL 4%多聚甲醛固定细胞15分钟。除去固定液，加适量0.4%结晶紫染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。细胞克隆计数与拍照 𐟓𘊥𐆥𙳧š🥀’置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率 =（克隆数/接种细胞数）㗱00%。实验关键 𐟔动ꌦˆ功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。细胞在进行克隆形成实验时要求有95%以上的分散度，否则结果的准确度会受到很大影响。一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形成率弱，转化细胞系强；正常细胞克隆形成率弱，肿瘤细胞强。

𐟌𑠩𛑩𞙦𑟦䍧‰駻„培实验室设计指南 𐟌🊦䍧‰駻„培实验室是进行植物细胞培养和组织培养等研究的关键场所。为了确保实验环境的稳定性和工作效率，一个精心设计的实验室方案至关重要。以下是一个植物组培实验室设计方案的概述，以满足实验室操作的各种需求。 𐟏�ꌥ𘃥𑀨功能区划分在设计实验室布局时，应根据实验室的功能需求合理划分不同的区域。常见的功能区包括：准备区：用于准备培养基、试剂和消毒设备等。操作区：用于进行组织样品的处理、细胞培养和组织培养等实验操作。储存区：用于存放培养基、试剂、实验器材和生物样品等。分析区：用于分析和评估实验结果，包括显微镜观察和数据处理等。布局原则在布局设计时，需要考虑以下原则：流线型设计：确保实验员能够方便地在不同区域之间移动，减少操作过程中的交叉污染。分隔离散：将不同实验室功能区分开，减少干扰和交叉感染的风险。安全性：合理安排实验台、储存柜和紧急出口等设施，以确保实验人员的安全。环境控制：提供恒定的温度、湿度和光照条件，以满足植物细胞培养的要求。通过以上设计原则和功能区划分，可以创建一个既安全又高效的植物组培实验室，为科学研究提供有力的支持。

细胞培养基的选择指南 𐟌𑊧𛆨ƒž培养基是细胞生长和繁殖的基础，它们为细胞提供必要的营养和生长环境。通常，培养基包含碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水。以下是几种常见的培养基类型及其特点： DMEM 𐟧슄ulbecco's Modified Eagle Medium（DMEM）是最常用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。它主要用于快速生长的细胞，分为低糖（1000mg/L）和高糖（4500mg/L）两种。DMEM含有更高浓度的NaHCO3，需要用10%的CO₂来平衡，也可以在较低CO₂浓度下使用。DMEM-高糖适合高密度悬浮细胞培养，而DMEM-低糖则适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞。 MEM 𐟌𑊍EM（Minimal Essential Medium）是最基本的培养基，最初设计用于培养HeLa细胞和部分哺乳类成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素，适合多种细胞单层生长。以MEM为基础，Stanner利用Earle's Balanced Salts和非必需胺基酸（NEAA）进一步配制成MEM-Alpha培养基，可广泛用于哺乳动物细胞的培养。 RPMI-1640 𐟧𔊒PMI-1640的营养成分相对简单，比DMEM少一点糖和谷光甘肽，广泛应用于许多种正常细胞和肿瘤细胞、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞、杂交瘤细胞的培养。其他如K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等也可使用RPMI-1640培养基。 DMEM/F12 𐟌🊆12培养基成分丰富，含有多种微量元素，与DMEM以1:1结合，称为DMEM/F12培养基，作为无血清培养基的基础。这种培养基适用于多种细胞的生长和繁殖。选择合适的培养基对于细胞的生长和实验的成功至关重要。希望这些信息能帮助你更好地选择适合你的细胞培养基！

湖南细胞培养室设计指南 𐟌𑊧𛆨ƒž培养室是进行细胞培养和实验的关键场所，其设计规划需要考虑以下几个方面： 𐟏 空间规划：选择合适的房间作为细胞培养室，确保有足够的面积容纳所需设备和操作区域。良好的通风是关键，以避免交叉感染。 𐟧ꠥꌥ𐥒Œ操作区：设置实验台和操作区，包括清洗区、操作区和储存区。实验台应耐腐蚀且易于清洁，以确保卫生和实验质量。 𐟛᯸ 生物安全柜：选择适当的生物安全柜，提供无菌的工作环境和保护实验人员免受微生物污染。根据实验需要，选择不同级别的生物安全柜。 𐟧𜠦𖈦䇯𜚧𛆨ƒž培养室中必须配备常见的消毒设备，如紫外线灯、高温高压灭菌器等，用于杀灭细菌和其他微生物。 𐟌᯸ 温度控制：细胞培养室需要保持恒定的温度和湿度，通常在37℃左右。安装温湿度控制设备，如空调系统和加湿器，确保稳定的培养条件。 𐟌쯸 洁净度：细胞培养室应有合适的过滤器和风机，以保持室内的洁净度。通常使用过滤器过滤空气中的微粒，防止污染细胞培养物。

𐟔젧𛆨ƒž增殖力揭秘：平板克隆实验全解析 𐟌𑠧𛆨ƒž克隆形成实验是生物学研究中的经典方法，它能够直观地反映细胞群体的依赖性和增殖能力。通过这个实验，我们可以了解到细胞在体外环境下的增殖情况，以及各种理化因素对细胞克隆形成能力的影响。 𐟔 实验目的 1️⃣ 评估细胞在处理后的增殖能力，通过克隆形成来观察细胞在培养板上的生长情况。 2️⃣ 探索不同杀伤因素（如药物、基因等）对肿瘤细胞增殖能力或群体依赖性的影响。 3️⃣ 预测细胞在体内的成瘤性，体外克隆能力越强，体内成瘤性越强，为体内实验提供参考。 𐟧ꠥꌨ所需材料：基础培养基（根据细胞类型选择）胎牛血清胰蛋白酶 PBS 青霉素-链霉素溶液（100X）多聚甲醛固定液结晶紫染液 Giemsa染液基本步骤： 1️⃣ 取对数生长期的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中。 2️⃣ 将细胞悬液进行梯度倍数稀释，分别以每皿50、100、200个细胞的密度接种到含10mL预温培养液的皿中，轻轻转动使细胞均匀分布。 3️⃣ 将培养皿放入37℃、5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周，经常观察，当出现肉眼可见的克隆时终止培养。 4️⃣ 弃去上清液，用PBS小心浸洗2次，加入4%多聚甲醛固定细胞15分钟。然后去固定液，加入Giemsa染色液染色10～30分钟，用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。 5️⃣ 将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼或显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数，最后计算克隆形成率。 𐟓Š 数据分析克隆形成率 = (克隆数 / 接种细胞数) 㗠100% 通过这个实验，我们可以深入了解细胞的增殖特性，为后续的实验研究提供有力的数据支持。

细胞划痕实验：从原理到步骤的详细指南 𐟔슧𛆨ƒž划痕实验是一种常用的方法，用于研究细胞迁移和修复能力。它的基本原理是在体外培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其他硬物划出一条线，去除中央部分的细胞，然后继续培养至设定的时间，观察并记录细胞的生长和迁移情况。通过不同分组之间的细胞修复能力的差异，可以判断各组细胞的迁移与修复能力的差别。 𐟔 实验步骤：准备工具：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和 marker 笔在操作前要在紫外下照射 30 分钟。培养板划线：先用 marker 笔在 6 孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔 0.5~1 cm 一道，横穿过孔，每孔至少穿过 5 条线。细胞铺板：在孔中加入约 5㗱05 个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。细胞划线：第二天用枪头比着直尺，尽量垂直于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。洗细胞：划痕完成后，使用无菌 PBS 洗细胞 3 次，洗去不贴壁的细胞，然后更换新鲜无血清培养基。细胞培养及观察：放入 37℃、5% CO2 培养箱，培养；按 0，6，12，24 小时取样，倒置显微镜观察特定位置细胞迁移情况并拍照。结果分析：使用 Image J 软件打开图片后，随机划取 6-8 条水平线，计算细胞间距离的均值。 𐟒ᠥꌥ𘸨灩—˜：适用范围：划痕法测量适用的细胞范围较小，一般只适用于上皮细胞和纤维样细胞。无血清培养：虽然无血清培养可以忽略细胞增殖的影响，但由于细胞内信号传导系统整体性的下调节，细胞迁移的速度也会慢很多。冲洗时注意事项：在用 PBS 缓冲液冲洗时，注意贴壁慢慢加入，以免冲散单层贴壁细胞，影响实验拍照结果。低血清培养：一般做划痕实验，需要排除细胞增殖的影响，一般在不影响细胞增殖的情况下采用低血清（<2%）或者无血清。否则细胞增殖就不能忽略，这样对于迁移较慢的细胞就需要延长拍摄时间（也可用丝裂酶处理一小时）。固定检测点：按照 6 孔板背后画线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，作为固定的检测点，以解决了前后观察时位置不固定的问题。培养基更换：每次拍照前、后，尽量换掉培养基，去除飘落的细胞，能得到较为干净的划痕区域。通过这些步骤和注意事项，你可以更好地理解和掌握细胞划痕实验的原理和方法。

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