圆二色光谱仪权威发布_圆二色光谱仪的原理和应用(2024年12月精准访谈)
圆二色谱:从原理到应用全解析 圆二色谱的原理 圆二色光谱仪(CD)的工作原理是利用蛋白质的圆二色性和不对称分子对左右圆偏振光的不同吸收来分析蛋白质的结构。蛋白质或多肽中的主要光活性基团是肽键、芳香族氨基酸残基和二硫键。当平面圆偏振光的吸收不同时,会产生吸收差异。由于这种吸收差异的存在,导致偏振光矢量的振幅差异,圆偏振光变成椭圆偏振光,即蛋白质的圆二色性。通过圆二色谱扫描仪可以在一定程度上分析蛋白质和多肽样品的二级结构和高级结构。 圆二色谱的应用 圆二色光谱仪是应用最为广泛的能够定性定量测定手性光学活性物质的设备。除了常规CD谱外,还可以测变温CD谱(温度范围5-95Ⱒ)、固体粉末漫反射CD谱、紫外可见吸收光谱、旋光度等。主要应用于蛋白质折叠、蛋白质构象、DNA/RNA反应、药物分析、酶动力学、天然有机化合物、立体有机化学、配位化合物、生物化学、物理化学等相关研究领域。 圆二色谱的制样要求 液体CD制样要求: 测试时需要空白溶剂做对照扣背景,麻烦样品及溶剂至少各备5ml; 样品及溶剂的浓度对测试影响较大,不宜过高或过低(浓度过高,会超电压,数据不准;浓度过低,没有信号)。不同物质,最佳浓度不同,测试时不对浓度进行摸索。如之前测过CD或有相关文献,建议按对应浓度准备;如没测过CD或无文献,但扫过紫外全谱,建议优选紫外浓度的一半配制样品,如不合适再调整(直接用紫外对应浓度,测CD的话浓度偏高);如以上均无,建议按0.5mg/ml来配(蛋白质样品,浓度一般0.1-0.5mg/ml),但无法保证该浓度合适。 固体CD制样要求: 固体CD需要10-20mg,如果样品透过率不好,建议可以采用积分球模式测试。 ᠦ🇧苤𘭥𘦔𖥼楤示2的话测试结果有用吗? 在蛋白质圆二色谱分析中,吸收强度大于2通常是指峰值的CD吸收值大于2,这通常被认为是强信号。然而,强信号也可能伴随着一些问题和限制。一方面,强信号可能会对谱图中一些峰的分辨率产生影响。在这种情况下,需要使用高的稀释倍数,以获得更准确的结果;另一方面,强信号也可能表示样品中含有大量的蛋白质,这可能会导致一些问题。此外,在进行数据分析时,还需要考虑其他因素,如基线噪音、光源的稳定性等,以确保结果的可靠性。总之,蛋白质圆二色谱分析中的强信号并不总是意味着测试结果不准确或无用。需要仔细处理数据,并对不同情况进行评估,以确保测试结果的准确性和可靠性。 CD在近紫外区和远紫外区扫描到的图谱代表什么? 圆二色谱在远紫外区的扫描图谱提供了蛋白质二级结构的信息。它反映了蛋白质中肽键的空间排布,通过计算可以得到不同二级结构元件(如螺旋、折叠、转角和不规则卷曲)在蛋白质中的比例。这些信息对于了解蛋白质的结构特征和稳定性非常重要。圆二色谱在近紫外区的扫描图谱则提供了关于蛋白质侧链的信息。它反映了蛋白质中含有生色基团的氨基酸残基(如色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸)在空间中的排布情况。同时,近紫外区扫描还可以揭示蛋白质中二硫键的微环境变化。这些信息对于研究蛋白质的功能和相互作用具有重要意义。 褻么软件分析蛋白质的二级结构,有何优势? 目前有多种软件可用于蛋白质二级结构的分析和预测。一般采用CDNN软件进行分析。CDNN是一种基于深度神经网络技术的二级结构计件,它能够通过分析蛋白质的氨基酸序列来预测其二级结构组成。相比其他软件,CDNN具有以下优势:首先,它提供了高准确性的计算结果,能够准确预测蛋白质的二级结构。其次,CDNN具有高速度的计算能力,能够快速处理大规模的蛋白质序列数据。此外,CDNN还具有经济性,可以节省分析成本和时间。该软件已在许多生物医学应用中得到验证和应用,例如药物设计和蛋白质结构预测等。 相关测试项目 傅里叶变换红外光谱、拉曼光谱、X射线荧光光谱仪(XRF)、原位(变温)紫外光谱等。
圆二色光谱(CD)测试样品准备指南 圆二色光谱(CD)是一种用于研究分子二级结构的强大工具。为了获得准确的数据,样品准备至关重要。以下是液体和固体样品的详细要求: 液体类样品 犧麧𝦺𖥉对照:测试时需要空白溶剂作为对照以扣除背景。建议至少准备5ml的样品和溶剂。 浓度控制:样品和溶剂的浓度对测试结果影响显著。浓度过高可能导致超电压,浓度过低则信号不足。不同物质的最佳浓度可能有所不同,建议根据以下方式准备: 有文献参考:如果之前有过CD测试或相关文献,建议按照文献中的浓度准备。 无文献参考但有紫外全谱数据:优先选择紫外浓度的一半配制样品,必要时进行调整。 无文献参考且无紫外全谱数据:建议按0.5mg/ml的浓度配制(适用于蛋白质样品),但请注意,这可能不是最佳浓度。 DMSO和离子液体:这些溶剂在低波长段有吸收,会影响CD数据和二级结构计算。 固体类样品 슧𒉦릠𗥓:至少需要30mg的粉末。 薄膜样品:直径应大于1cm。 块体样品:尺寸应为1cm*1cm。 注意事项 ⚠️ 有时效性的样品:如果样品需要低温保存,寄送时请使用冰袋或干冰,以防变质。 文件格式:数据文件通常为csv和pdf格式,csv文件可以用Excel打开,pdf文件可以用Origin软件编辑。 准备样品时,请仔细遵循这些指南,以确保您的圆二色光谱测试结果准确可靠。
JACS顶刊!甲基影响旋转 最近看到一篇JACS的文章,简直让我怀疑是不是在本科有机课堂小测的水平。这个甲基有这么神奇吗?!不就是简单的位阻问题吗?难道不对称合成真的有这么复杂,需要发一篇JACS?有没有搞有机的小伙伴能解释一下? 文章标题是《Molecular Motors' Magic Methyl and Its Pivotal Influence on Rotation》,作者包括Yohan Gisbert、Maximilian Fellrt、Charlote N. Stindt、Aexander Gerstner和Ben L. Feringa。这篇文章详细介绍了一种分子马达的神奇甲基,以及它对旋转行为的关键影响。 文章的主要内容是,分子马达在各种应用中发挥着重要作用,尤其是在需要精确控制运动的系统中。为了实现这种控制,通常需要对马达的设计进行修改。在这里,作者展示了一种简单的不对称合成方法,用于制备具有不同甲基模式的分子马达。 具体来说,作者通过不对称合成制备了两种新的分子马达,分别具有甲基和二甲基结构。这些马达的合成产率高,且对映体纯度高。通过变量温度核磁共振(VT-NMR)、紫外-可见光谱(UV-vis)和圆二色光谱(CD)等手段,作者详细研究了这些马达的旋转行为。结果显示,甲基模式对马达的旋转速度和方向有显著影响。 从常见的手性前体出发,作者发现后续的甲基化可以显著降低马达的速度并改变旋转方向。更令人惊讶的是,作者首次发现,即使在稳定态和亚稳态之间的能量差很小的情况下,也能实现完全的单向旋转。这一发现为设计更先进的分子马达提供了新的思路。 总的来说,这篇文章展示了甲基模式对分子马达旋转行为的重要影响,为有机化学领域的研究提供了新的视角。看完这篇文章,我真心觉得发顶刊有时候真的就像吃面条一样简单,只要你有创意和耐心,谁都能搞出点名堂来。
圆二色谱:揭示分子构型的秘密 圆二色谱(CD光谱)是一种独特的旋光光谱技术,用于探究非对称分子的构型和构象。当光学活性物质吸收平面偏振光中的左旋和右旋圆偏振光时,由于吸收系数(𘍧𘧭(≠),产生了圆二色性。通过绘制不同波长(平面偏振光与吸收系数之差=-)的关系图,我们得到了圆二色光谱。如果手性化合物在紫外可见区域有吸收,那么其圆二色光谱将具有独特的特征。 样品要求: 纯度要求:样品必须保持高纯度,不含光吸收杂质,且溶剂在测定波长范围内无吸收干扰。 溶解性:样品需完全溶解在溶剂中,形成均一透明的溶液。 氮气流控制:确保实验过程中氮气流量的稳定。 缓冲液和溶剂选择:在配制溶液前,检查缓冲液和溶剂是否在测定波长范围内有吸收干扰,以及是否会形成沉淀或胶状物。 蛋白质测量中,常选择透明性好的磷酸盐作为缓冲体系。 浓度与池子选择:不同样品的圆二色光谱范围不同,对池子大小(光径)和浓度的要求也不同。蛋白质CD光谱测量通常在较稀的溶液中进行。 通过圆二色谱技术,我们可以深入了解有机化合物的构型和构象,为化学研究提供有力支持。
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养殖低盐罗非鱼时,加入外源物质THG,能增强其体内的消化分解作用吗? 在低盐罗非鱼的养殖过程中,如何提升鱼糜的质量和消化效率一直是养殖研究中的一个关键问题。近年来,随着水产养殖技术的不断发展,越来越多的研究开始关注如何通过添加外源物质来改善鱼糜的物理化学性质。鱼糜作为一种重要的水产加工原料,其品质直接影响到最终产品的风味和营养价值。因此,研究人员不断探索不同的添加剂对鱼糜特性的影响,以期提高其在市场上的竞争力。 在这种背景下,一项关于外源物质THG对低盐罗非鱼糜的影响的研究引起了广泛关注。研究表明,THG(含有羟基的复配物)能够显著改善鱼糜的水分保持能力和消化性能。THG是一种由多种物质复合而成的外源添加剂,它能够影响鱼糜的水分分布和蛋白质结构。正如古语所说,“工欲善其事,必先利其器”,在研究中,科学家们通过系统实验验证了THG的作用机制,为养殖业提供了新的思路。 实验的核心在于对低盐罗非鱼糜的横向弛豫时间T2波谱图进行分析,以探讨不同外源物质对鱼糜的影响。实验结果显示,THG组的T2弛豫时间在三个主要区间(T21、T22、T23)均显著提前,尤其是T21区间的提前最为明显。这表明THG能够使鱼糜中的结合水和不易流动水更加稳固。此外,与空白组相比,THG组的P21和P22显著增加,意味着在THG的作用下,鱼糜中的自由水逐渐转化为结合水和不易流动水,从而提升了水分的保持能力。这一变化的主要原因可能在于THG中的羟基通过氢键形成了网状结构,锁住了部分自由水。 为了进一步分析外源物质对鱼糜的影响,研究人员还制作了鱼糜凝胶的水分质子密度伪彩图。伪彩图像显示,THG组的水分质子密度最高,颜色最深,表明其水分保持能力最强。这些结果表明,THG不仅提升了鱼糜的持水率,也改善了鱼糜的整体质量。 在蛋白质结构方面,实验通过圆二色光谱分析了鱼糜中肌原纤维蛋白的构象变化。研究发现,THG组的螺旋含量最低,而折叠、转角和无规卷曲含量最高。这表明THG能够显著改变鱼糜蛋白的结构,使其形成更稳定的三维网络结构,从而有利于水分的束缚和凝胶的品质提升。经过模拟消化实验,THG组的蛋白质消化率也显著提高,相比于其他组,THG组表现出更好的消化分解效果,说明THG对蛋白质的消化分解具有促进作用。 总的来说,THG的添加在提升低盐罗非鱼糜的水分保持能力和消化性能方面表现出了显著的效果。与单一外源物质相比,THG的复配效果更为突出,能够显著改善鱼糜的品质和消化效率。实验结果证明,THG不仅能优化鱼糜的水分分布,还能有效促进蛋白质的消化分解,使其在胃-十二指肠消化过程中表现得更加优秀。 综上所述,THG作为一种新型的外源物质,其在鱼糜加工中的应用前景广阔。它不仅提升了鱼糜的物理化学性质,还显著改善了鱼糜的消化性能。这一研究成果为水产养殖领域提供了宝贵的参考,也为未来的研究和应用奠定了基础。正如科学家所说,“科学的进步离不开创新的探索”,THG的发现和应用无疑是这一领域的一次重要创新,预示着未来更多的突破与发展。
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