小鼠眼球取血权威发布_小鼠眼球取血操作步骤(2024年12月精准访谈)
小鼠取材全攻略:脑、肠、血注意事项详解 最近录制的解剖取材视频被限流了,不知道大家是不是都看不见了,有点生气。不过还是总结了一些经验和方法,供有需要的人参考。 取血小技巧 𘊦眼球法:抓起小鼠,快速摘下眼球,这种方法取血量多,速度快。因为小鼠本身血量就少,尽量用这种方法可以多取一些血。取血后还需要离心,取血清,量就更少了。用抗凝血管装采的血,注意尽快离心取血清,放太久会溶血采不出血清(我血的教训!),采血后半小时内就可以离心。 针头扎眼法:像视频里一样拿针头扎进眼睛后下方,找落空感也能取到5-6滴,这种方式比较温和,缺点就是血量少。 取脑组织 断头法:用大剪刀从耳朵后断头,精细剪把皮毛剪开,拿刀片在骨缝来回刮几下,重要的一步是用剪刀闭合在图下红色标记部位插进,再打开剪刀撬开脑袋,就会得到一半打开的脑组织,另一半就可以拿镊子小心拨开,拿镊子取全脑。 前额叶和海马:先去掉嗅球和小脑,对半切开,左右两边都各有一块海马与前额叶。前额叶斜着切,海马需要翻面过来背面剥离,大概是在我图中标记的这个位置。 取肠组织 튥 訂 和结肠:全肠从胃到肛门,结肠在盲肠到肛门的位置(视频中口误说成了幽门,纠正一下)。有粪便的那块最好取没有粪便的部位做指标,再拿PBS清洗干净,装样。 准备工作 备物品:两把无钩镊子、精细剪、手术剪刀(大的)、刀片、静脉输液针、注射器针管(20ml)、多聚甲醛(切片固定)、生理盐水、PBS缓冲液、RNA保存液(保存做q PCR)、大量的EP管子(装组织)、需要取血的话还需要用的抗凝血管子(取血用)。 希望这些经验能帮到大家,祝大家实验顺利!
我发现我在实验室最喜欢的工作竟然是解剖小鼠 摘眼球取血,然后解剖取脏器 很简单很流畅很不需要脑子甚至很解压[泪]
实验动物取血方式全解析 在进行动物实验时,选择合适的取血方式至关重要。以下是几种常见的实验动物取血方法,帮助你更好地了解如何安全、有效地获取动物血液。 䧩小鼠的割尾采血 这种方法适用于需要少量血液的情况。通过将鼠尾部浸在温水中或用大功率灯泡照射,使尾部血管充盈。然后用刀片在尾部做一小切口,让血液自然滴入容器或用毛细吸管吸取。每次可取血0.1-0.3ml。 𐠧𖩝脉丛采血 这种方法适用于小鼠,可以采集眶动脉和眶静脉的混合血。操作前需深度麻醉小鼠,使其眼球突出。用硬质毛细玻璃管或巴斯德玻璃吸管刺入眼睑和眼球之间,切开静脉丛,抽取所需血量。每次可取血0.2-0.3ml。 眼球采血 这种方法主要用于小鼠,可采集眼眶内血液。操作前需深度麻醉小鼠,迅速夹去眼球,并将鼠倒置,从身体后侧向眼部按摩小鼠躯体,使眼眶内血液流入事先准备好的收集管。此法只能一次采血。 䧩🃨采血 这种方法适用于大鼠,可抽取大量血液。将大鼠麻醉后仰卧固定,剪去胸前区被毛,用注射器选择心搏最强处垂直向下穿刺,每次采血量0.5-0.6ml。 𐠥 耳缘静脉采血 这种方法适用于家兔,可反复采血。将兔固定于兔盒内或由助手固定,选静脉较粗、清晰的耳朵,拔去采血部位的被毛,消毒后用6号针头沿耳缘静脉远心端刺入血管。一次可采血5-10ml。 ᥊诼静)脉、腋下动(静)脉、颈动(静)脉或腹主动脉采血 这些部位需要麻醉后固定动物,然后做动(静)脉分离手术,使其暴露清楚后,用注射器沿大血管平行方向刺入,抽取所需血量。 𖠧쥉、后肢皮下浅层静脉采血 这种方法在犬类动物中广泛使用。将动物侧卧固定,减去采血部位的被毛,用碘酒、酒精消毒皮肤,用胶皮带扎紧或用手抓紧静脉近心端,使血管扩张。使用6号或7号针头的注射器从静脉远心端水平刺入血管,抽取时速度要稍慢,以防抽瘪血管。一次可采集较多血液。 𖠧쩢静脉采血 这种方法适用于需要大量血液的犬类动物。将动物侧卧固定,使颈伸直并稍向一侧歪。减去颈部被毛,消毒后对颈基部施加压力阻止静脉回流,即可看见血管。用连有7号针头的注射器,针头平行血管向头部刺入血管。由于此静脉在皮下易于滑动,针刺时除用左手固定好血管外,刺入要准确。一次可采集较多血液。 𖠧쥿脏采血 将动物麻醉后仰卧固定,前肢向背侧方向固定,暴露胸部,剪去左侧第3~5肋间的被毛,消毒。用左手探摸确定搏动最强处,右手持连有7号针头的注射器。一般选择胸骨左外缘1cm处于第3~4肋间穿刺。穿刺时随针头接触到心脏跳动的感觉调整刺入方向和深度,但不能让针头在胸腔内乱晃。当穿刺正确时血液自动流入注射器。本法可抽取大量血液。 通过以上方法,你可以根据实验需求选择合适的取血方式,确保动物实验的安全和有效性。
ICP技术详解送样指南 电感耦合等离子体(ICP)是一种离子激发源,主要用于离子分析。它有两种主要应用:ICP-OES和ICP-MS。 ICP-OES:利用等离子体激发光源使试样蒸发、汽化、离解或分解为原子状态,进一步电离成离子状态。原子及离子在光源中激发发光,通过分光系统将光分解为按波长排列的光谱,利用光电器件检测光谱,根据光谱波长进行定性分析,按发射光强度进行定量含量测定。 ICP-MS:电感耦合等离子体质谱仪,将样品由载气(氩气)引入雾化系统进行雾化后,以气溶胶形式进入等离子体中心区,在高温和惰性气体中被去溶剂化、汽化解离和电离,转化成带正电荷的正离子,经离子采集系统进入质谱仪,质谱仪根据质荷比进行分离,根据元素质谱峰强度测定样品中相应元素的含量。 栩样要求: 无机水溶液样品:提供2 mL以上样品;液体样品是否含有高浓度盐酸、硝酸、高氯酸、浓硫酸、氢氟酸。 需要消解的水溶液样品:有机液体、含有有机物的水溶液、纳米颗粒分散液等,提供1 mL以上;元素含量极低需要富集的,10 mL以上。 需要消解的固体或半固体样品(粉末、块体、粘稠样品):固体或半固体样品量大于0.1 g为佳;样品量极少(≤0.02g),由客户称取确定质量的样品保存于离心管中;动物器官样品,取完整的器官,新鲜状态下准确称量质量装于离心管中冷藏(或冷冻)保存;人类血液或血浆,取样容器15 mL离心管,准确取2 mL血液,存放温度4度冷藏,无需抗凝剂;小鼠血液样品,单次取20 为佳,采用毛细管眼球取血或尾静脉取血方式,准确取血后,将血液装于15 mL离心管底部,自然晾干后呈不流动状态冷藏送样;植物样品,单株元素代谢分布实验,比如用水培法,将需测试的根、茎、叶分别取样,风干、烘干后或冻干后,装于离心管送样。 特殊样品要求:金属毒性浸出实验(常测元素:铜、锌、镉、铬、汞、钡、镍、银、砷、硒),需要10 g样品以上。 🠩过这些信息,您可以更好地了解ICP技术的应用和送样要求,确保您的样品能够得到准确的分析和测定。
元素分析ICP测试样品准备指南 1. 无机水溶液样品:对于无机水溶液样品,如果元素以离子态存在,无需消解。建议提供至少2mL的样品,如果浓度较高,可以提供0.5mL以上的样品。如果液体样品含有高浓度酸或碱,请备注浓度。 需要消解的水溶液样品:对于需要消解的样品,建议提供至少1mL的样品。如果元素含量极低需要富集,可以提供10mL以上的样品。纯有机溶剂样品必须告知是否有毒,以及加酸加热是否会爆炸等危险信息。 固体或半固体样品:对于固体或半固体样品,建议称取大于0.1g的样品,保存于离心管中。如果样品量极少(≤0.02g),称取确定质量的样品保存于离心管中,全部消解。 动物器官样品:尽量取完整的器官,新鲜状态下准确称量质量装于离心管中冷藏(或冷冻)保存。建议使用10ml或15ml的离心管。因组织不稳定,取样后可能会有组织液渗出或腐败,导致质量变化,所以新鲜状态取出后,装于10ml以上离心管内,可以加酸全部消解,以新鲜状态下的质量计算,这样最准确。 人类血液或血浆:取样容器建议使用15mL离心管,准确取1mL或2mL血液,存放温度4度冷藏(存放时间长的话可以先冷冻),无需加抗凝剂,但一定要密封好口,不能漏出。实验方法是直接管内加酸全部溶解掉,所以所取样品要准确取2mL(或者1mL),管口要密封好不能漏液。 小鼠血液样品:一般血液代谢会取不同时间多个点,而小鼠血液量本身很少,为了减小取血太多影响小鼠正常生理代谢,一般单次取20uL为佳。一般采用毛细管眼球取血或者尾静脉取血方式,准确取血后,将血液装于10mL或者15mL离心管底部。因体积量太少,为避免后期快递运输导致血液漏液导致的误差,取血于离心管底部后,自然晾干后呈不流动状态冷藏送样。 水培植物代谢测试:根据实验需求,如果是做单株元素代谢分布实验,比如用水培法,将需要测试的根、茎、叶分别取样,风干、烘干后或者冻干后,装于离心管送样。建议同样的实验,一个样品根据植株大小,取多个平行植株装于一起测试。如果样本质量较大,需要进行研磨均匀后送样。 非水培植物:取同区域或者同样实验环境的多个植株的待测样本,风干、烘干或者冻干后,装于离心管或者自封袋后送样。举例:污染区域或者农田植物样品叶片重金属测试,取该区域内不同位置10个左右的植株叶片,干燥后送样,如有条件,干燥后进行研磨均匀。
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