液质联用最新视觉报道_液质联用仪的基本原理及基本功能(2024年12月全程跟踪)
液质联用仪揭秘 液质联用仪(LC-MS)是一种将液相色谱仪与质谱仪结合的现代分析技术,主要用于样品的定性和定量分析。它将液相色谱的分离能力与质谱的高灵敏度和结构信息提供能力相结合,广泛应用于各种领域。 液质联用仪的工作原理 样品通过液相色谱分离后,各个组分依次进入质谱检测器。在离子源中,这些组分被电离,形成带有不同电荷和质量数的离子。这些离子在电磁场中的运动行为不同,通过质量分析器按质荷比(m/z)分开,最终得到按质荷比顺序排列的质谱图。通过对质谱图的分析处理,可以获得样品的定性和定量结果。 液质联用仪的主要组成部分 ️ 液相色谱系统:包括进样系统、输液系统、分离系统和检测系统等。 接口:连接液相色谱和质谱的部分。 离子源:将样品转化为带电离子的部分。 质量分析器:按质荷比分离离子的部分。 检测器:检测离子信号的部分。 真空系统:保持质谱部分的高真空度。 电气系统:控制仪器各部分的电子系统。 数据处理系统:处理和分析质谱数据的部分。 液相色谱部分详解 𘨉𑩃襈与普通液相色谱基本相同,主要由进样系统、输液系统、分离系统和检测系统组成。在LC-MS系统中,质谱部分作为液相色谱的检测器。 进样系统 𐊦馜的进样系统使用隔膜和停流进样器,装在色谱柱入口处。现在大多使用六通进样阀或自动进样器。进样装置要求密封性好,死体积小,重复性好,保证中心进样,进样时对色谱系统的压力和流量影响小。 输液系统 犨𞓦恥 括贮液器、输液泵、过滤器和脱气装置等。贮液器用于贮存流动相;输液泵为高压泵,输出压力一般在150~500 kg/cmⲯ kg/cmⲽ98.0665 kPa),流速在0.01~10 mL/min,要求流速恒定,无脉动,流量可调节;过滤器用于过滤微小杂质;脱气装置用于除去流动相中的空气,避免气泡影响检测器;梯度洗脱装置有两种方式:低压梯度和高压梯度。 质谱部分详解 슧滥퐦 𗥓转化为带电离子的部分。 质量分析器:按质荷比分离离子的部分。 检测器:检测离子信号的部分。 通过了解这些基础知识,可以更好地理解和应用液质联用仪(LC-MS),为各种分析任务提供有力支持。
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液质&气质联用仪器日常维护全攻略 ### 液质联用日常维护指南 ️ 电源稳定是关键 使用稳压电源UPS,确保仪器电源电压稳定,特别是在停电时,UPS能继续供电,保护仪器不受影响。 每日清洁系统 䩧襼丙醇溶液冲洗系统和清洁雾化室。对于ESI源,每周至少做一次震气;对于APCI源,每天做一次震气,保持毛细管洁净。 控制流速 流动相流速不要过高,ESI离子源不要超过0.5ml/min,APCI不要超过1.0ml/min。 定期更换泵油 ⯸ 机械泵的泵油需要定期更换,一般半年更换一次。如果泵油看起来很脏,需要提前更换。更换泵油时,需将泵油全部倒出,再更换新的泵油,不同品牌的泵油不能混用。 环境控制 控制好样品运行的环境,包括温度和湿度,确保仪器正常运行。 实验后清洁 ꌥ要清洗进样针、进样阀等。用过含酸的流动相后,色谱柱和离子源都要用甲醇/水冲洗。 定期清洗样品锥孔 定期清洗样品锥孔,关闭隔断阀,取下样品锥孔。先用甲醇:水:甲酸(45:45:10)的溶液超声清洗10分钟,然后分别用超纯水和甲醇各溶液超声清洗10分钟,待晾干后再安装到仪器上。 流动相新鲜度 流动相要现用现配,最好不要过夜,一定要新鲜。 电子倍增器定期更换 定期更换电子倍增器,确保仪器性能稳定。 气质联用日常维护指南 ️ 气相色谱部分日常维护 色谱柱维护 在使用色谱柱尤其是使用极性色谱柱时,要去除载气中的氧。更换气瓶时不要混入空气,可以在气体流路中安装氦气净化器。充分做好试样的前处理,避免污染色谱柱。如果有鬼峰出现,可以先切除色谱柱前端的部分长度,并视基线和柱流失情况,适时老化色谱柱。老化色谱柱时事先设定接口温度高于柱温,柱温升到色谱柱的最高使用温度附近保持1-2小时。如还不能除去色谱柱内残留的难挥发的成分,可切掉连接进样口一侧的色谱柱30-50cm左右,然后老化色谱柱。色谱柱不使用时,应该将色谱柱两端堵死,可将色谱柱的两端插入废弃的隔垫中,使色谱柱管内与外部空气隔离,避免空气破坏色谱柱内部涂层。当色谱柱的分离效率降低时,会影响到分离度,视情况更换新的色谱柱。
液质联用仪校准:多组分分析的精准利器
流动相pH调节剂和缓冲盐的选择指南 在高效液相色谱(HPLC)中,流动相的pH调节至关重要,它影响着色谱柱的选择、分离效果以及分析物的稳定性。常见的pH调节剂和缓冲盐有哪些?它们各自的特点和适用范围又是怎样的呢?让我们一起来探讨。 首先,我们来说说那些不带缓冲能力的调节剂。这些小分子的酸或碱只能改变pH,不具备缓冲能力。 甲酸 ꊧ𘦘列常用的pH调节剂之一,浓度通常不超过1%。它能使水的pH降至二点几的级别。不过,甲酸在低波长(小于215nm)下有紫外吸收,且挥发性较大,长时间使用会导致浓度变化。 乙酸 𘧚酸性比甲酸略弱,使用浓度通常不超过5%,同样能使水的pH降至二点几。乙酸在低波长下也有紫外吸收,但相对甲酸来说,影响较小。 三氟乙酸 ꊤ𘉦 𘦘露种强酸,使用浓度通常不超过0.5%,能使水的pH降至2以下。它具有较大的离子强度和离子对作用,是分析蛋白和多肽时常用的添加剂。不过,三氟乙酸在低波长下有很强的紫外吸收,且离子强度高,可能会抑制液质联用。 磷酸 𒊧㷩 𘦘露种不挥发的酸,离子强度适中,且在低波长紫外区无本底吸收。它对色谱柱寿命有一定影响,但不能兼容质谱方法。 其他酸类 除了上述几种酸,还有硫酸、盐酸和柠檬酸等,但它们在HPLC中的使用非常罕见。 选择pH调节剂的考虑因素 酸性差异:磷酸的酸性比醋酸强,可以将流动相的pH调至更低。 紫外本底:甲酸和乙酸有紫外本底,而磷酸没有。在选择pH调节剂时,要考虑使用较低波长检测的方法。 挥发性:甲酸、乙酸和三氟乙酸等是挥发性酸,而磷酸不挥发。不挥发酸能使流动相的pH相对稳定,但限制了它们在液质联用时的使用。 离子强度:酸的离子强度影响被分析物的解离和性质,通常离子强度为:三氟乙酸 > 磷酸 > 甲酸 > 乙酸。离子强度高的酸,如三氟乙酸,对液质联用有强烈的抑制作用。 在选择pH调节剂和缓冲盐时,需要综合考虑上述因素,以确保最佳的分离效果和分析物的稳定性。希望这篇指南能帮助你在HPLC实验中选择合适的pH调节剂和缓冲盐!
网络药理学:中药现代化的新方向 ## 课程大纲 网络药理学的发展历程和研究现状 中药网络药理学的基本研究思路 中药网络药理学的经典案例分析(SCI) 中药复方/单味中药的化学成分筛选 药物成分靶点预测 疾病靶点预测 交集靶点PPI网络构建 网络拓扑分析 信号通路及生物功能富集 分子对接 内容简介 网络药理学的基本研究思路是通过液质联用或在线中药化学成分数据库(如TCMSP数据库、TCMID数据库、HIT数据库、BATMAN-TCM数据库等)获取中药复方或单位中药的化学成分(研究中药单体可跳过这一步骤)。然后,通过公共数据库(如PharmMapper数据库、SwissTargetPrediction数据库等)或者高通量测序/组学的数据对各成分的蛋白靶点进行预测。 接下来,通过疾病数据库(OMIM数据库、Genecards数据库、DisGeNET数据库以及DrugBank数据库等)或者TCGA/GEO获取疾病的靶点信息或者疾病中差异表达的基因。将中药各成分对应的靶点和疾病对应的靶点采用韦恩图取交集,即为中药成分治疗疾病的潜在作用靶点。 对交集内的靶点采用String数据库进行PPI网络的构建,最后采用Cytoscape软件构建成分-靶点、靶点-相关互作蛋白的网络进行网络拓扑分析。利用生物信息学网站将潜在作用靶点进行GO、KEGG富集分析,寻找其可能作用的信号通路以及参与的生物学过程,初步揭示中药复方/单味中药/中药单体的作用机制。最后,通过生物学实验进行相关验证。
流动相pH调节全攻略:酸碱盐大揭秘 在高效液相色谱(HPLC)中,流动相的pH调节至关重要,它影响着色谱柱的使用寿命和分离效果。为了帮助你更好地掌握这一技巧,我们深入探讨了各种pH调节剂,包括酸、碱和盐。 𖠩 𘧱𛊧𘯼常用于调节流动相的pH至2点几,但浓度通常不超过1%。 乙酸:酸性较甲酸稍弱,浓度不超过5%,可使pH降至2点几。 三氟乙酸:浓度不超过0.5%,能使pH降至2以下,具有强离子强度和离子对作用,适合分析蛋白或多肽。 注意:这些酸在小于215nm波长下不宜使用,且因挥发性强,需注意保存容器的密闭性,长时间不用时建议重新配制。 🠧Ⱨ氨水:用于将水相pH调至较高水平,但需谨慎使用,以免溶解色谱柱中的硅胶颗粒。 三乙胺:同样具有调高pH的作用,但使用时应小心。 盐类 甲酸盐:如甲酸铵,溶解性好,适用于液质联用,但对离子强度和吸潮性有要求。 乙酸盐:如乙酸铵,使用方法和甲酸盐类似,离子强度适中。 磷酸盐:如磷酸钠和磷酸钾,对pH调节能力强,但需注意对质谱和色谱柱的潜在伤害。 磷酸由于其多元酸性,可形成多种pH调节组合,提供较高的离子强度。 缓冲体系 甲酸-甲酸铵:pH可调至3-4.5。 乙酸-乙酸铵:pH可调至4-5.5。 磷酸:提供多种pH调节组合,但需注意对质谱和色谱柱的潜在伤害。 通过合理选择和使用这些pH调节剂,你可以更好地控制流动相的pH,从而优化色谱分离效果。记得在实验过程中保持细心和耐心,以获得最佳的实验结果!
药企打工人的周末放松指南与流动相选择 周末时光,放松心情 忙碌了一周,终于迎来了周末!作为一个工具人,我发现了一家超好吃的潮汕火锅自助店,特别是他们家的牛肉,简直美味到爆!比我在盒马买的大几十一斤的牛肉还要好很多,真是发现了一个宝藏店铺!吃完饭后,简单逛了一下lulu,心情特别舒畅! 🦵动相pH调节剂的选择指南 接下来,聊聊我在药企打工时的一些心得吧。流动相的pH调节剂选择可是个大学问哦!比起单纯的酸碱,盐类,特别是具有缓冲能力的盐类可以很好地控制流动相的pH值。根据不同缓冲盐中两种盐的配比,可以很容易地配置出一定pH的缓冲溶液。 甲酸盐:甲酸铵的秘密 在液相色谱中,甲酸盐通常是甲酸铵。这种盐的溶解度很好,完全兼容液质联用的方法,对色谱柱的伤害也比较小。不过,它的离子强度比较低,而且甲酸盐比较容易吸潮,称量的时候比较困难,在流动相里还可能挥发。与甲酸配合,可以得到甲酸-甲酸铵缓冲体系,大概的缓冲能力在pH3~4.5的范围之内,只要调节两者浓度的比例即可。 乙酸盐:乙酸铵的妙用 乙酸盐常见的是乙酸铵,使用上和甲酸盐十分类似,离子强度也不高。与乙酸配合的乙酸-乙酸铵缓冲体系pH的控制能力在pH4~5.5左右。虽然它的缓冲能力稍弱于甲酸盐,但在某些情况下还是很有用的。 磷酸盐:磷酸的多元魅力 磷酸盐常用的是磷酸的钠盐和钾盐,二者对pH的控制能力十分接近,只是离子强度稍有差异,绝大多数情况下是可以互换使用的。磷酸由于是多元酸,能够形成一氢盐和二氢盐,所以使用磷酸缓冲体系调节pH也是组合比较多,跨度比较大,并且可以提供较高的离子强度。不过,磷酸盐流动相体系无法兼容质谱,并且对色谱柱损伤较大。以磷酸钠盐为例,有以下两种组合的缓冲体系: 磷酸-磷酸二氢钠:pH可以达到1.2~3.1左右的范围 磷酸二氢钠-磷酸氢二钠:pH可以达到6.5~8左右的范围 上述的缓冲对能调节的pH范围指的都是在保持缓冲能力的范围之内,如果仅仅是调节pH的话,范围还可以再扩展一些。 有任何问题欢迎在评论区交流哦!3000粉丝抽宝儿送小礼物啦!
液质联用技术:从分离到质谱的完美结合 液质联用(LCMS)技术,顾名思义,就是将液相色谱仪(LC)和质谱仪(MS)结合起来,利用液相色谱的高分离度和质谱的高灵敏度,实现样品的快速分析和高效分离。슦用的工作原理 𑊊在LCMS系统中,液相色谱负责样品的分离,而质谱则负责样品的离子化和质量分析。样品在质谱部分与流动相分离后,被离子化,然后通过质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开,最终得到质谱图。 如何解读质谱图? 质谱分析的核心在于将物质离子化,并按离子的质荷比进行分离,然后测量各种离子谱峰的强度。设备测试到的离子信号强度为纵坐标,离子质荷比为横坐标所作的条状图,就是我们常见的质谱图。 使用LCMS时的注意事项 ⚠️ 1️⃣ 在LCMS报告中,MS响应强的组分可能会掩盖MS响应弱的组分。为了准确分析,可以通过提取离子流或扣除背景等方式进行判断。LCMS报告必须将LC和MS两部分结合,相互佐证。 2️⃣ 在不使用薄层色谱(TLC)的情况下,直接使用LCMS监测反应时,需要结合其他手段(如核磁共振NMR)进行辅助测试。特别提示:监测反应不能仅仅依赖于LCMS,而不进行TLC测试。TLC的使用非常重要,它直接、快捷,并为后续的分离纯化提供大量信息。 通过这些知识,我们可以更好地理解和应用液质联用技术,为科研和工业提供更准确、更高效的分析手段。
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