紫外分光最新视觉报道_紫外分光光度计工作原理(2024年11月全程跟踪)
紫外分光度法测定DNA和RNA浓度 紫外分光度法是一种常用的测定DNA和RNA浓度的方法。通过测量特定波长下的光密度(OD值),可以间接计算出核酸的浓度。以下是该方法的基本原理和操作步骤: OD值的含义 OD是optical density的缩写,表示被检测物质吸收的光密度。由于核酸中的碱基具有共双键结构,因此它们具有紫外光吸收特性。 不同波长的吸收峰 OD260:DNA双链的吸收峰,主要反映DNA的浓度。 OD280:芳香族氨基酸的吸收峰,主要用于判断蛋白质污染程度。 OD230:核酸提取过程中使用的盐离子在230nm处有吸收峰,如果OD230很高,说明盐离子浓度较高。 纯度判断 OD260/OD280的比值用于判断RNA或DNA的纯度。高纯度的DNA比值应该在1.8-2.0之间。如果比值低于1.8,说明蛋白质污染较严重;高于2.0,则说明可能有RNA污染。 操作步骤 ꊥ备核酸样品:将待测的DNA或RNA样品溶解在适当浓度的缓冲液中。 测量OD值:使用紫外分光度计,分别测量260nm、280nm和230nm处的光密度。 计算浓度:根据已知的摩尔消光系数,计算DNA或RNA的浓度。 注意事项 ⚠️ 实验过程中要避免蛋白质和盐离子的污染,否则会影响结果的准确性。 测量时要保持样品池和空白池的清洁,避免杂质干扰。 通过以上步骤,可以准确测定DNA和RNA的浓度,为后续的实验提供可靠的参考数据。
蛋白质的紫外线吸收峰值 原理: 蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,这使得蛋白质能够吸收紫外光。吸收高峰位于280nm处,其吸光度(光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。这一波长范围内的光吸收值与蛋白质浓度成正比,根据Beer-Lambert定律计算蛋白质浓度。 A = E • C • l A代表吸光度,E代表消光系数,C代表蛋白质浓度,l代表光径长度。消光系数可以根据蛋白质序列进行估算。 特点: 优点: 简单快速; 不消耗样品:检测过程中不对样品进行处理,故而测定后能回收样品。 缺点: 普适性差:不同的蛋白质有不同的酪氨酸和色氨酸含量。对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质,有一定的误差。故要准确测量,必须要有待测蛋白质的纯品作为参考。 曲线非线性:标准曲线也有轻微的非线性,因而不能用Beer-Lambert定律进行计算,而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。 干扰物质多:若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等能吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。 另外,由于不同蛋白的序列不同,其所含有的酪氨酸和色氨酸所占总氨基酸的比例不同,因此造成了不同的蛋白具有不同的消光系数。在使用该方法进行测定蛋白浓度时,需要知道待测蛋白的消光系数,将通过紫外分光光度计测得的浓度除以蛋白的消光系数即为该蛋白的真实浓度。待测蛋白的消光系数可通过软件进行预测,在预测时只需要在网站中输入蛋白质的氨基酸序列即可给出相应的消光系数。预测蛋白消光系数的网址为: 步骤: 将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中,用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照; 在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280; 根据吸光度和摩尔消光系数计算蛋白质浓度。 注意事项: 由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。
分光抗老,告别肌肤红暗纹! 老化是导致皮肤衰老的主要原因之一,它无处不在,无论是在通勤、出游、办公室,还是在电脑屏幕前,都在无形中损害着我们的肌肤。 ☀️ UVB(290-320nm)会导致皮肤晒红 ☀️ UVA(320-400nm)会使皮肤变得暗沉 光(400~500nm)会加速皮肤衰老 ⃧之源的「元素水乳」通过分光抗老技术,提供3抗4修的紧致稳亮效果,日夜防御光老化,内外修护光损伤,开启多维的光防修体验。 光老→3抗元素水 抗红:对抗UVB紫外线引起的皮肤红胀 抗暗:抵御UVA紫外线导致的皮肤暗沉 抗老:防止蓝光引起的皮肤老化 🮥 损→4修元素乳 修纹:修复因光老化产生的皱纹 修紧:紧致因光损伤而松弛的皮肤 修屏:保护皮肤屏障,抵御外界刺激 修润:滋润因光损伤而干燥的皮肤 日常搭配使用,抗光效果更佳✨,让肌肤不红、不暗、不纹,稳稳亮起来!
仪器分析光谱技术全解析 仪器分析中的光谱技术多种多样,包括紫外可见分光光度法、红外光谱、拉曼光谱、分子荧光光谱、原子发射光谱、原子吸收光谱和原子荧光光谱等。 紫外可见分光光度法 紫外可见分光光度法是利用物质对紫外和可见光的吸收来进行分析的方法。该方法的核心仪器是紫外分光光度计,主要由光源、单色器、吸收池和检测器组成。 红外光谱 红外光谱是利用红外辐射与物质的相互作用来进行分析的方法。红外光谱仪主要由光源、干涉仪、检测器和计算机组成。 拉曼光谱 拉曼光谱是利用拉曼散射效应来进行分析的方法。拉曼散射是指光与物质相互作用时,光子与分子发生非弹性碰撞,导致光子能量发生变化。 分子荧光光谱 分子荧光光谱是利用物质在特定波长的光激发下产生的荧光来进行分析的方法。荧光是指物质在吸收光后,以较长的波长重新发射的光。 原子发射光谱 劥子发射光谱是利用原子在高温下激发产生的光谱来进行分析的方法。原子发射光谱仪主要由光源、分光系统和检测器组成。 原子吸收光谱 原子吸收光谱是利用原子对特定波长的光的吸收来进行分析的方法。原子吸收光谱仪主要由光源、单色器、吸收池和检测器组成。 原子荧光光谱 ✨ 原子荧光光谱是利用原子在特定波长的光激发下产生的荧光来进行分析的方法。原子荧光光谱仪主要由光源、单色器、吸收池和检测器组成。 其他重要因素 灵敏度:灵敏度是指仪器对微量物质的检测能力。 吸光度:吸光度与物质的浓度成正比,是定量分析的基础。 仪器参数:不同仪器有不同的参数设置,需要根据具体实验进行调整。 实验条件:实验条件如温度、压力等也会影响光谱的测定结果。 实际操作:在实际操作中,需要注意仪器的校准、样品的处理和实验条件的控制等。 总结 光谱技术在仪器分析中有着广泛的应用,不同的光谱方法有着不同的原理和应用范围。在实际操作中,需要根据具体实验选择合适的光谱方法,并注意实验条件和操作细节,以获得准确可靠的分析结果。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告 实验名称:邻二氮菲分光光度法测定微量铁 젥ꌧ:熟悉紫外-可见分光光度计的使用方法,掌握微量铁的测定方法。 实验原理:邻二氮菲(phen)与铁离子(Fe)在pH为2-9的溶液中反应生成橘红色配合物,该配合物在510nm处有最大吸收。利用这一反应,可以测定微量铁。 砥ꌤ诼紫外-可见分光光度计、容量瓶(500ml、10ml、5ml)、吸量管、玻璃比色皿。 ꠥꌨ:铁标准溶液、盐酸、邻二氮菲(phen)、乙酸钠(NaAc)、柠檬酸三钠(Na3C6H5O7)。 实验步骤: 配制标准溶液:将铁标准溶液稀释至不同浓度。 绘制标准曲线:在紫外-可见分光光度计上,以不同浓度的铁标准溶液为样品,测定其在510nm处的吸光度,绘制标准曲线。 样品测定:取待测样品,加入适量的邻二氮菲和乙酸钠,调节pH至2-9,然后测定其在510nm处的吸光度。根据标准曲线计算样品中的铁含量。 实验结果:通过测量样品的吸光度,结合标准曲线,可以计算出样品中的铁含量。 ᠦ事项:实验过程中要注意仪器的使用方法和试剂的配制,确保实验结果的准确性。
化学分析检测仪器大揭秘 슦成为化学检验员?那你得先了解这些化学分析检测仪器!它们可是你工作中的好帮手哦! 气相色谱仪 쯸 气相色谱仪可是个分析速度和分离效率都超高的家伙!它用气体作为流动相,样品在气相中传递速度快,瞬间就能达到平衡。而且,可选的固定相物质多得数不过来,让你随心所欲地分析各种样品。近年来,高灵敏选择性检测器的加入,更是让它如虎添翼,分析灵敏度高、应用范围广,简直是化学分析界的明星! 紫外分光光度计 紫外分光光度计可是个“紫外线侦探”,专门用来追踪分子的价电子。当紫外光照射到被分析的物质上,会引起分子中价电子的跃迁,吸收光谱就会反映出物质的特征。这个原理就像指纹识别一样,独特又准确。 荧光与原子荧光光度计 这个仪器可是个“夜行侠”,能在黑暗中捕捉到微弱的荧光信号。它有两种工作模式:荧光发射光谱和荧光激发光谱。前者记录荧光发射强度与发射波长之间的关系,后者则记录荧光发射强度与激发光波长的关系。时间分辨技术更是让它能够分辨出混合物中光谱重叠但有寿命差异的组分,简直是化学分析界的“侦探”。 pH酸度计 pH酸度计是个“酸碱度侦探”,专门用来测量溶液的酸碱度。它利用溶液的电化学性质测量氢离子浓度,确定溶液的酸碱度。25℃中性水的pH值为7,pH值小于7的溶液为酸性,pH值大于7为碱性。温度对水的电离系数有影响,所以pH计进行pH值测量时,会利用电位分析法,建立离子活度与电动势之间的关系,通过测量原电池的电流来得到pH值。 有机元素分析仪 劦机元素分析仪是个“元素侦探”,专门用来分析有机物中的元素含量。样品燃烧后的产物通过特定的试剂后形成CO2、H2O、N2和氮氧化物,同时试剂将一些干扰物质,如卤族元素、S和P等去除。然后气体进入还原罐,与铜进行反应,去除过量的氧并将氮氧化物还原成N2,最后进入混合室,在常温常压下进行均匀的混合。混合均匀后的气体通过三组高灵敏度的热导检测器,每组检测器包含一对热导池,最终测定出样品中的元素含量。 凯氏定氮仪 𓊥聆定氮仪是个“蛋白质含量侦探”,专门用来测定蛋白质中的氮含量。它利用蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中氮的含量来计算蛋白质含量。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法,故被称为凯氏定氮仪,又名定氮仪、蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪。 怎么样,是不是对这些化学分析检测仪器有了更深的了解呢?如果你对这些仪器感兴趣,不妨考虑一下成为化学检验员哦!좜耀
TU-1810紫外分光光度计操作指南 嘿,大家好!今天我们来聊聊TU-1810紫外分光光度计的操作步骤。这个仪器在实验室里可是个得力助手,掌握了它的使用方法,你的实验效率会大大提升哦! 开机与预热 犩斥 ,打开样品室盖,检查一下里面有没有放错东西,比如遮光物。然后,打开电源开关,预热30分钟。这个步骤很重要,预热不够可能会影响测量结果。 选择光源 ኧ一开,钨灯就会亮起。如果你需要在紫外光区(200nm~290nm)工作,记得把光源切换到氘灯;如果是在290nm~360nm的紫外光区,那就同时点亮氘灯和钨灯。 设置波长 接下来,按数字键输入你需要的波长。这个波长决定了单色光的类型,所以一定要选对哦! 校准仪器 슧襞号较新的分光光度计有开机自动校准功能,但如果你用的是没有这个功能的,那就得手动校准了。具体方法可以参考使用说明书。 开始测量 一切准备就绪后,按START键开始测量。通常我们会用装有蒸馏水的吸收池调零,然后再放入样品和参比样进行测试。记住,光吸收值在0.3~0.7之间是最理想的线性关系。如果浓度差异大,先测低浓度的,再测高浓度的。 数据处理 定量测试时,你需要先测定一系列已知浓度的标准样品,根据它们的吸光值和浓度绘制标准曲线。新型号的紫外分光光度计有自动制作和计算标准曲线的功能,但如果你用的是老型号,可以用Excel或者坐标纸来辅助绘制。 关机与保养 ️ 测量完成后,取出吸收池,清洗干净并晾干,然后放入盒子里保存。关闭电源,拔下插头,在样品室内放入干燥剂,盖上样品室盖,罩上防尘罩。这样你的仪器就能得到很好的保养啦! 好了,以上就是TU-1810紫外分光光度计的基本操作步骤。希望对你有所帮助!如果有任何问题,欢迎留言讨论哦!
高中生物教材:灭菌压力写错! 最近我发现了一个令人哭笑不得的错误,出现在新人教版的高中生物教材上。教材上写着高压蒸汽灭菌的压力是100kPa,甚至还有题目考到了这个答案。但实际上,初中时就学过,一个大气压是101.3kPa。今天南京的气压是1005百帕。所以,高压蒸汽灭菌的压力根本不可能是100kPa,而应该是103.4kPa。 于是,我通过人教社中小学课本意见反馈平台写了反馈。之前我还发现了一个旧人教版高中生物教材的严重错误,也反馈了,但反馈记录查不到了。不知道是不是因为人教社小学数学课本插图事件,反馈太多,把服务器填满了。我当时反馈时,高中生物新教材已经上市了,已经删除了这个严重错误。不过江苏用旧教材一直用到了2022年高考。 更早之前,我还发现过旧人教版高中生物教材的一个严重错误。教材上说用紫外分光光度计来检测PCR产物浓度,这简直是天方夜谭。我在南京大学读研究生时,也这么想过,亲自用紫外分光光度计检测失败的PCR产物,结果却测出很高浓度。我当时也给人教社教材意见反馈平台反馈过。不过反馈记录找不到了。那个时候,新人教版教材已经上市,已经改正了这个错误(应该用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物做半定量)。到江苏一直用旧人教版教材到2022届高考。 希望这些反馈能引起相关部门的注意,毕竟教材是学生们学习的基础,错误的信息可能会误导一代又一代的学生。
药学类的论文 引言 阿司匹林是一种广泛使用的非甾体抗炎药,常用于治疗各种疼痛和炎症。阿司匹林肠溶缓释片是一种改良后的剂型,旨在减少胃肠道不良反应。然而,这种药物在强碱性溶液中可能会分解,生成水杨酸和乙酸盐。因此,测定阿司匹林肠溶缓释片中乙酰水杨酸的含量至关重要。 짴륤分光光度法测定乙酰水杨酸含量슧䖥光光度法是一种常用的化学分析方法,适用于测定药物中的乙酰水杨酸含量。实验材料包括乙酰水杨酸对照品、阿司匹林肠溶缓释片、95%乙醇等。实验过程中,将乙酰水杨酸标准品和供试品溶液分别置于25ml容量瓶中,用95%乙醇溶解并定容至刻度。然后,使用紫外可见分光光度计测定吸光度,绘制标准曲线并计算线性回归方程。 实验结果 线性关系考察结果显示,在8.8~88ug/ml浓度范围内,乙酰水杨酸的吸光度与浓度呈良好的线性关系。精密度实验、稳定性实验、重复性实验和加样回收率实验均表明,该方法具有较高的准确性和可靠性。最终,根据线性关系计算得出,阿司匹林肠溶缓释片中乙酰水杨酸的含量为标示量的96.04%,符合药典规定。 ᨮ訮ኩ🥏𘥌肠溶缓释片的分解可能会产生有害的水杨酸,因此测定其含量至关重要。紫外分光光度法是一种简单有效的测定方法,适用于药物质量控制。然而,该方法也存在一定的局限性,如可能受到其他成分的干扰。因此,在实际应用中,需要根据具体情况选择合适的分析方法。 参考文献 [1] 张玉龙, 邹明强. 紫外分光光度法测定阿司匹林肠溶缓释片中乙酰水杨酸的含量[J]. 药学研究, 2020, 39(1): 25-28. [2] 王艳红, 李海燕. 高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶缓释片中乙酰水杨酸的含量[J]. 中国药品标准, 2019, 20(4): 301-304. [3 邹明强, 张玉龙. 阿司匹林肠溶缓释片的研究进展[J]. 药学研究, 2018, 37(6): 371-374.
对乙酰氨基酚片质量检查实验全攻略 实验时间:2024年3月25日 实验名称:对乙酰氨基酚片的质量检查 预习内容: 2020版中国药典收载的相关检查标准 对乙酰氨基酚片的质量检查方法 实验步骤: 溶解样品:在对乙酰氨基酚片中加入适量溶剂,充分溶解后,稀释至刻度,摇匀并滤过,取续滤液。 制备供试品溶液:精密称取对乙酰氨基酚片与对照品,加入溶剂溶解并稀释成每毫升约含20mg的溶液。 高效液相色谱法测定:精密量取供试溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。 计算含量:根据色谱图计算供试品溶液中对乙酰氨基酚的含量,不得超过对照品标示量的105%。 紫外-可见分光光度法测定:精密称取约4mg的对乙酰氨基酚片,加入氢氧化钠溶液溶解后,用水稀释至刻度,摇匀。取适量溶液,在特定波长处测定吸光度,计算吸收系数(E)。 젥ꌧ分析: 显色反应:对乙酰氨基酚片中的对乙酰氨基酚与显色剂反应,生成蓝紫色的配位化合物。 重氮化反应:在对乙酰氨基酚片中加入重氮化试剂,生成红色的偶氮化合物。 紫外-可见分光光度法:通过测定吸光度,计算对乙酰氨基酚片的含量。 实验注意事项: 在溶解样品时,需先定容后过滤,以去除不溶性杂质。 在制备供试品溶液时,需分次研磨,以提高检测的准确性。 在测定吸光度时,需注意操作规范,避免误差。 实验总结: 通过对乙酰氨基酚片的溶解、制备供试品溶液、高效液相色谱法测定和紫外-可见分光光度法测定,我们成功进行了对乙酰氨基酚片的质量检查。实验结果表明,该片的含量符合药典标准。
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