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elisa实验在线播放_elisa实验目的(2024年12月免费观看)

内容来源：麦吉窗影视所属栏目：导读更新日期：2024-11-29

elisa实验

ELISA实验技巧，提准必备！酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种在医学、生物学和化学等领域广泛应用的免疫分析方法。结果的准确性对于实验的可靠性至关重要。以下是一些提高ELISA实验准确性的技巧： 𐟌Ÿ 标准曲线的制作首先，需要制作标准曲线。将已知浓度的标准品加入反应孔中，按照相同的反应条件进行孵育、洗涤和显色等步骤，最后得到吸光度值与标准品浓度的关系曲线。标准曲线应呈S型或抛物线型，且重复性好。 𐟌Ÿ 阴性、阳性判断根据标准曲线，将样品的吸光度值与标准品进行比较，从而判断样品是阴性还是阳性。通常，阴性样品的吸光度值低于标准曲线的最低浓度，而阳性样品的吸光度值高于标准曲线的最低浓度。对于临界值附近的样品，可以采用稀释等方法进行重新检测，以避免假阳性或阴性结果的出现。 𐟌Ÿ 重复性和准确性实验为了评估ELISA检测的准确性和重复性，需要进行重复性和准确性实验。重复性实验是通过多次重复检测同一样品，计算变异系数（CV）来判断检测结果的精密度。准确性实验则是通过将已知浓度的标准品加入到样品中，检测其回收率，以评估检测方法的准确度。一般情况下，CV值应小于10%，回收率应在90%-110%之间。 𐟓 注意事项保证试剂盒的质量：选择质量可靠、经过认证的试剂盒，避免使用过期或质量不稳定的试剂。标准化操作：按照试剂盒说明书进行标准化操作，避免操作过程中的人为误差。避免交叉污染：在实验过程中，要特别注意防止样品和试剂之间的交叉污染，以免影响检测结果的准确性。温度控制：ELISA检测需要在恒温条件下进行，因此要确保实验过程中温度的稳定和准确性。空白吸光度值：在实验过程中，要特别注意空白吸光度值的稳定性，避免其对检测结果的影响。实验数据的处理：对实验数据进行正确的处理和分析，包括对异常值的处理、数据转换等，以确保结果的准确性和可靠性。质量控制：在实验过程中，应进行必要的质量控制，如定期进行室内质控和室间质评等，以确保实验室检测结果的准确性。通过这些技巧和注意事项，可以提高ELISA实验的准确性，确保实验结果的可靠性。

ELISA洗板新法：省时又省力！ ELISA实验作为基础诊断性实验，其成败往往取决于看似不起眼的洗板步骤。𐟧갟’砨€师经常提醒我们，洗涤虽然不是反应步骤，但它决定了实验的成败。即使我们通过严谨的实验设计，使用优质的试剂，采取了正确的操作和良好的仪器，也可能因为忽略了洗板而得到不理想的结果。 𐟔 洗板次数不足或浸泡时间短，洗液量少或残留多，都可能导致假阳性或本底高。常见的「花板」现象，其实也可以通过增加洗板时间和次数来降低或避免样品中干扰物质的影响。 𐟤– 目前，实验室中常用的洗板方式主要有两种：手工洗板和洗板机洗板。手工洗板虽然人为因素较大，但操作熟练后，可以避免跳孔、串孔，且可以多块板实验套作，多个实验小组可以同时操作。 𐟤– 洗板机洗板则简单便捷，人为因素少，速度快，但价格较高，难以人手一台。因此，寻找一种既能达到洗板机效果，又兼具性价比的手工洗板方式显得尤为重要。 𐟌Ÿ 快涤手动洗板器就是一种全新的手工洗板仪器，它替代了传统的「排枪」，为实验人员提供了更友好的洗板操作方式。相比「排枪」，快涤手动洗板器有四大独特优势： 1️⃣ 连续分液，节省时间：采用连续分液技术，不用在洗液和酶标板之间来回移动，精准快速加液，减少孔间差，降低CV值，保障实验准确。专业实验室测试数据显示，相比常规8道移液器，可节省60%的洗板时间。 2️⃣ 定量设计，精准满孔：采用2400定量分液管，配备8道分液头，均匀分液，单孔300（酶标板满孔剂量），控制误差小于1%，避免人为加液串孔或不能满孔。 3️⃣ 操作简单，学习成本低：洗板器拥有更好的人体工学设计，操作更加简单，简单熟悉后即可直接上手，学习成本低。 4️⃣ 性价比高：相比传统手工洗板和洗板机洗板，快涤手动洗板器的性价比更高，适合大多数实验室使用。 𐟒ᠩ€š过选择合适的洗板方式，我们可以更好地控制实验变量，提高ELISA实验的准确性和可靠性。𐟌Ÿ

师姐的实验记录本：移液操作的关键技巧最近翻了翻师姐的实验记录本，真是大开眼界！原来不同的实验，移液的操作要点差别这么大。细胞培养、PCR实验、ELISA实验，每种实验都有自己独特的移液技巧。细胞培养：均匀、快速接种，注意剪切力 𐟧슥œ觻†胞培养中，移液的关键是均匀和快速。接种细胞时，要确保每块培养皿的细胞数量一致，这样才能保证实验结果的可靠性。同时，也要注意避免产生过多的剪切力，以免损伤细胞。 PCR实验：预润洗、吸头吸附力、正向移液与反向移液 𐟧슐CR实验对移液的要求特别高。首先，要进行预润洗，确保吸头内没有杂质。其次，吸头的吸附力要强，这样才能避免移液时液体泄漏。最后，正向移液和反向移液的操作要熟练，这样才能保证PCR反应的准确性。 ELISA实验：精确加样、温度控制 𐟧슥œ腌ISA实验中，精确加样是关键。每一步都要严格按照实验要求进行，确保样品的量准确无误。同时，温度控制也非常重要，过高的温度会影响酶的活性，从而影响实验结果。移液器常见问题及解决方法 𐟛 ️ 移液器滴液：建议采用反向移液的方法，或者使用外置活塞原理的移液器。移液器漏吸：使用同一品牌的移液器和吸头匹配，这样可以减少漏吸的发生。移液器吸不准：要注意吸液时保持移液器垂直，这样可以避免吸不准的问题。移液时产生气泡：可以采用反向移液技术：吸取液体时，将排液按钮按至第二档，吸头浸入液面至少1mm，吸取液体。真是后悔没有早点看到师姐的记录本，这些小技巧真的让我受益匪浅！希望大家也能从中学到一些有用的知识，提升自己的实验技能。

师弟的ELISA实验让我想起了过去的日子最近在实验室里，我看着师弟在细胞室里埋头苦干整整四个小时，还以为他在摸鱼呢。结果走近一看，原来是他操作失误，正在重新做实验。这一幕让我想起了自己刚加入实验室的那些日子。那时候，我也是个小白，对实验一窍不通。每次做ELISA实验，总是搞得一团糟。有一次，我在做小鼠IL-13的ELISA实验时，也是因为操作失误，结果整个实验都失败了。当时心里真是五味杂陈，既心疼实验材料，又怕导师批评。师弟现在的样子，让我回想起那些青涩的时光。虽然现在我已经不再是那个小白，但实验室的每一天都充满了挑战和乐趣。看着师弟在努力，我也觉得自己还在进步的路上。实验室的日常就是这样，充满了未知和挑战，但也正是这些挑战让我们不断成长。希望师弟能早日掌握技巧，做出漂亮的实验结果吧！𐟒ꀀ

ELISA实验操作指南：细节决定成败 𐟧ꊥ˜🯼Œ大家好！今天我们来聊聊ELISA实验的那些事儿。这个实验虽然看起来有点复杂，但其实只要掌握了细节，其实也没那么难。下面我就一步一步带你走过这个实验流程。前期准备 𐟓… 首先，实验前你得确保样本和试剂盒都在室温下平衡至少1小时。如果你的样本是冻存的，记得提前拿到2-8摄氏度解冻，千万别直接室温解冻，不然会影响实验结果。然后准备好所有需要的耗材，比如蒸馏水（去离子水）。操作流程 𐟓 设定版孔：先确定你要做的实验版孔布局。一般来说，标准品需要5个点，每个点做平行，这样就需要10个孔。空白孔只需要1个，剩下的孔可以用来做样本。稀释标准品：准备5个EP管，每个管里加入150微升的标准稀释液，分别编号1到5。在1号管里加入150微升的标准品，然后用枪头反复吹打10次左右（注意不要产生气泡）。如果有涡旋仪，可以用涡旋仪涡旋5秒左右。然后换枪头，从1号管取150微升加入到2号管，依次类推。最后，前4个管里每管液体是150微升，第5个管是300微升，浓度从大到小。加样：标准品每个浓度点加2个孔（做平行），每孔50微升。加样过程中要注意换枪头。样本孔每孔加10微升（40微升样本稀释液），加样时也要注意换枪头。特别注意，标准加样和样本加样尽量在15分钟内完成，不然会影响实验结果。加完样后盖上封板膜，37摄氏度孵育30分钟。洗版：在孵育过程中，可以把洗涤液配好。20ml30倍浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水定容到600ml。每孔加入250-300微升的洗涤液（不要漫过版孔）。如果有震荡仪，可以把板子放入震荡仪上5秒左右，然后静止30秒。没有震荡仪的话，直接在桌子上晃动5秒左右，然后静置30秒，甩干，拍板。甩干过程要快，1秒内完成，不要慢慢倾斜倒掉液体，直接翻板甩掉液体即可。拍板时在桌子上垫一层吸水纸或滤纸，版孔朝下拍几下，拍干为止。加酶标试剂：每孔加入50微升的酶标试剂，空白孔不需要加。然后孵育30分钟。再次洗版：步骤同4。显色：先每孔加入50微升的显色A液，然后每孔加入50微升的显色B液。避光37摄氏度显色15分钟。终止反应：每孔加入50微升的终止液，注意加完终止液后15分钟内读数，超过时间读数无效。小贴士 𐟒እŠ 液过程中不要让枪头触及板子底部，一般枪头都悬空。可以将枪头靠在孔边缘，但枪头尖悬空。如果枪头上残留液体，看整体多少量，不要吹打下去。特别忌讳在版孔内壁流向版孔。整个加液过程不要产生气泡（洗涤液除外）。好了，以上就是ELISA实验的基本操作流程。希望这些细节能帮到你，祝大家实验顺利！𐟧쀀

医学专硕生的日常：科研与生活的小插曲 ❕❕周六的Elisa实验结果不仅和预想的毫不沾边，而且是完全相反𐟘 周日值班再确定一下纳排标准、分析数据//还有48孔，下周收拾收拾再去收集样本[皱眉R][皱眉R]科研么，这才哪儿到哪儿。很多事情不是努力才有结果，学会享受过程吧，把它当做锻炼学习能力的一种方式，正在升级打怪𐟑𞊊———————————————————————— [种草R]找到了新的学习地儿，𐟔Š都能外放，就像和考研备考一样，俺还是喜欢一个人。 [种草R]当奶茶社交成为风尚，拒绝一次后都不好意思拒绝第二次𐟘쥽“然偶尔喝我也能体会到快乐！ [拔草R]和小伙伴一起填了问卷，在“不希望子女从事医师工作”这一栏中不约而同☑️非常同意 [拔草R]地上的落叶让我对于秋日的到来多了切实感受，这几天天气可太热了！下周出去觅秋𐟍‚ ———————————————————————— 充实、忙碌的生活能直接扼杀焦虑、悲伤等情绪，压根儿没空沉溺在这样的情绪里，即使偶尔冒出的也和一味忧思不同//注意力转移𐟌€感谢这几日

𐟔젅LISA实验必备五大技巧与细节𐟔 一、实验原理𐟓– ELISA实验利用抗原与抗体的特异性结合，通过酶标记放大信号，从而对样本中的目标物进行定量测定。二、抗体与抗原的选择𐟧ꊩ€‰择高特异性、高亲和力的抗体或抗原，以确保实验的准确性和灵敏度。注意抗体或抗原的保存条件和使用方法，避免其失活或变性。三、样本处理𐟧𜊦 𙦍ž验目的和样本类型，选择合适的样本处理方法，如稀释、离心、过滤等。注意避免样本中的干扰物质对实验结果的影响，如非特异性结合物质、酶抑制剂等。四、实验步骤𐟓 包被：选择合适的包被抗原或抗体，按照一定比例稀释后，加入96孔板中，确保每孔均匀覆盖。包被后，将孔板放入孵育箱中，进行一定时间的孵育，使抗原或抗体牢固吸附在孔板上。封闭：使用封闭液封闭孔板中未结合位点，以减少非特异性结合。封闭后，同样需要进行孵育，并确保封闭液均匀覆盖每个孔。加样：准确加入待测样本或标准品，确保每孔加样量一致。注意避免样本或标准品在孔壁上残留，影响结果的准确性。孵育：将加样后的孔板放入孵育箱中，进行一段时间的孵育，使样本中的抗原或抗体与包被的抗体或抗原充分结合。控制孵育时间和温度，避免过长或过短的孵育时间。洗涤：洗涤步骤是去除未结合物质的关键，要确保洗涤充分且不损伤已结合的抗原-抗体复合物。洗涤时要确保每个孔都充分洗涤，避免残留物质干扰结果。加酶标抗体：加入酶标记的抗体，与已结合的抗原或抗体进行特异性结合。同样需要进行孵育和洗涤步骤，确保酶标抗体与抗原或抗体的结合牢固且纯净。显色：加入显色底物，酶标抗体催化底物发生显色反应。控制显色时间和温度，确保显色反应充分且均匀。终止与读数：加入终止液，停止显色反应。准确记录实验过程中的所有数据和观察结果，包括加样量、孵育时间、OD值等。目前商品化的试剂盒一般预先包被了抗体，活化后即可使用；具体步骤及实验条件需按照试剂盒说明书操作。五、实验优化𐟔„ 根据实验结果和需要，可以调整实验条件，如孵育时间、温度、抗体浓度等，以优化实验结果。通过设置不同的对照实验，如阳性对照、阴性对照和空白对照等，来监测实验的准确性和可靠性。

𐟔젅LISA实验全攻略：一看就懂！ 𐟧ꠤ𘀣€试剂准备洗涤液：计算好所需的体积，用双蒸水或去离子水将20倍浓缩洗涤液稀释成1倍应用液。未用完的浓缩洗涤液放至4℃保存。标准品梯度稀释：加入1mL标准品/样本稀释液（SR1）至冻干标准品中，静置15min后轻轻混匀（浓度为1000pg/mL）。然后按照250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.9、0pg/mL的浓度进行稀释。250pg/mL为标准曲线最高点浓度，标准品/样本稀释液作为标准曲线的零点（0pg/mL）。生物素化抗体工作液：用检测稀释液将100倍抗体浓缩液稀释成1倍应用工作液（稀释前充分混匀），在30min内加入到反应孔中。酶结合物工作液：按每次试验所需用量配制，用酶结合物稀释液将100倍浓缩酶结合物稀释成1倍应用工作液（稀释前离心），并在30min内使用。 𐟚🠤𚌣€洗板自动洗板：甩净酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，注入洗涤液为250/孔，注与吸出间隔为30s，洗板5次。手工洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，用洗瓶加入洗涤液为250/孔，静置30s后甩净酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，洗板5次。 𐟌᯸ 三、反应程序根据检测种属、指标、反应条件等差异性，采用不同的检测实验条件。大多数ELISA试剂盒采用以下普通程序：实验前30min，拿出试剂盒，恢复至室温，实验前洗板三次，按照说明书配制标准品。加入100标准品及检测样本至反应孔中，封板后于37℃，温箱孵育90min。拍板&洗板4次。加入100生物素化抗体工作液至反应孔中，封板后于37℃，温箱孵育60min。拍板&洗板4次。加入100酶结合物工作液至反应孔中，封板后于37℃，温箱孵育30min。拍板&洗板5次。加入100显色底物至反应孔中，封板后于37℃，避光显色10~20min。加入50𛈦�𖲯𜌥𓥈𛧔詅𖦠‡仪450nm波长测OD值（5min内）。 𐟓Š 四、数据处理及分析用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度值（OD值）。以标准品的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。根据样品的OD值，在标准曲线上查出相应的浓度。

ELISA样本处理，一文搞定！在进行ELISA实验时，样本的处理至关重要。以下是几种常见样本的处理方法，帮助你更好地准备实验材料。血清处理 𐟩𘊩‡‡集血液样本：使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液。室温放置：将试管或离心管在室温下放置1小时，或在2-8℃条件下过夜，分离出血清。离心收集：在2-8℃条件下，以1000㗧离心20分钟，小心收集上层血清。血浆处理 𐟩𘊩‡‡集血液样本：使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液，采集后30分钟内处理。离心分离：在2-8℃条件下，以1000㗧离心15分钟，小心收集上层血浆。常见抗凝剂：EDTA钠盐、肝素钠、枸橼酸钠等。细胞培养上清液处理 𐟧슦”𖩛†上清液：将细胞培养上清液吸入离心管中。离心去除杂质：在2-8℃条件下，以1000㗧离心20分钟，除去细胞碎片和杂质，收集上清液。细胞裂解液处理 𐟧슦𖈥Œ–细胞：吸出培养板中的培养基，用胰蛋白酶消化细胞，再加入适量的培养基，将培养板上的细胞冲洗干净（悬浮细胞可以省略该步骤）。收集细胞：将细胞悬浮液收集到离心管中，在2-8℃条件下，以1000㗧离心5分钟，再吸去培养基，用预冷PBS洗涤细胞3次。重悬细胞：加入适量的预冷PBS（建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂），重悬细胞。添加比例：约1㗱06个细胞加入150-250 PBS重悬细胞。裂解细胞：使样本在-20℃或-80℃条件和室温条件下反复冻融，重复冻融过程数次，直至细胞完全裂解。也可使用超声波细胞破碎器，超声处理悬浮液来裂解细胞。离心收集：在2-8℃条件下，以1500㗧离心10分钟，去除细胞碎片，收集上清液。组织匀浆处理 𐟧슥†𒦴—组织：用预冷的PBS（0.01M，PH7.4）冲洗组织，除去表面残留的血液或杂质。称重切片：将组织块称重，再切成尽可能小的碎块，以便充分匀浆。制备匀浆：加入适量的预冷PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g组织样品对应9mL PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂），用玻璃匀浆器在冰上或冰浴中充分匀浆。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。离心收集：将匀浆液吸入离心管中，2-8℃条件下，以5000㗧离心5分钟，收集上清液。通过以上步骤，你可以更好地准备ELISA实验的样本，确保实验结果的准确性。

𐟎“ 五年的本科生涯，你该如何度过？𐟒𜊰ŸŒŸ 回首过去的五年，仿佛一切都历历在目。2024年9月9日，我决定记录下这五年的时光，或许能给你未来的道路提供一些参考。 𐟔 大一时，我懵懵懂懂地开始了这段旅程。大二时，我开始追求实验室研究，因为我没有其他突出的地方。我跟着研究生学习了养细胞、WB、ELISA等实验方法。大三时，我跟随导师申报了一个小课题，大四时在核心期刊上发表了人生第一篇论文。 𐟎“ 五年的时光匆匆而过，专业课的学习并不理想。我们在学校的好时候错过了，专业基本功并不扎实。在口腔内科实习轮转时，带教老师对我的嘲讽让我备受打击。但无论如何，我还是坚持了下来，希望在口腔方向就业。 𐟤” 我是否想考研究生呢？或许有些想法，但论文已经写了。我知道研究生之路的孤单和无聊，甚至可以说是压抑。我讨厌科研，但本科科研的导师对我非常好。如果研究生导师不好，要我天天加班做实验、看文献、准备PPT开组会等，我十分厌恶这种生活。科研压力加上规培压力，我真的难以独自承受。 𐟘… 所以，我根本没有打算走研究生这条路。考研裸考总分加起来只有150分。我认为临床应该是一个纯净的环境，不能既要又要，既要规培好好学习临床知识和技能操作能力，又要满足医学院那边的导师的科研要求。 𐟌™ 值过住院部的夜班，让一个住院医师从早上八点半查房一直呆到第二天十二点下班，36个小时对夜班医生来说家常便饭，这种生活在三甲医院比比皆是。我不想这样活着，太累。双休要值班，节假日要值班，我是人，不是工具，也不是AI，为什么要这么卷？我的工资哪怕比别人低一点，我也不想去卷。 𐟒𜠦œ‰很多医学生卷考研这条赛道，如果是自己内心有明确的目标那还好，但如果是随波逐流地去跟着大部分人“考研”，考研的路上煎熬死，考上读研的过程痛苦死，择业时如果没好的校招企业，你还得去卷考公考编这条赛道，这样，不累么？为了研究生这个大部分人看起来是必经的路，然后直接舍弃掉本科校招的机会，考不上又得去考规培，或者二战、三战、四五六七八战？ 𐟔š 于是我下定决心就业。很幸运，校招签了一个普普通通的小二甲。或许以后也会有后悔没有考研的想法出现。但那是以后了。